Студопедия Главная Случайная страница Задать вопрос

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Ход работы. В каждую из 8 пронумерованных пробирок по приведенной ниже табл





В каждую из 8 пронумерованных пробирок по приведенной ниже табл. 1 вносят соответствующие растворы после перемешивания + 1 мл танина. Содержимое пробирок снова хорошо перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 5 минут. В той пробирке, где обнаружится максимальное помутнение среды, рН раствора будет соответствовать ИЭТ белка.

Таблица 1

Прибавление, мл Номера пробирок
 
Вода 8,4 7,75 8,75 8,5 8,0 7,0 5,0 1,0
0,01 н. р-р СН3СООН   0,6   1,25   -   -   -   -   -   -
0,1 н. р-р СН3СООН   -   -   0,25   0,5   1,0   2,0   4,0   8,0
Раствор белка (0,5%-ный р-р желатина)     1,0     1,0     1,0     1,0     1,0     1,0     1,0     1,0
Танин 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
PH 5,9 5,6 5,3 5,0 4,7 4,4 4,1 3,8

 

По результатам опыта сделайте вывод об изоэлектрической точке белка и о том, какие заряженные аминокислоты преобладают в его составе.

Работа 3. Качественные реакции на белки

Методы качественного обнаружения белков основаны на трех типах реакций: а) по пептидным связям белковой молекулы; б) по a-аминогруппе; в) по аминокислотным радикалам.

Примером реакции первого типа служит биуретовая реакция, второго типа - нингидриновая реакция, а к третьему типу относятся многочисленные цветные реакции на радикалы аминокислот. По характеру цветных реакций третьего типа можно судить о качественном составе белков.

Оборудование, реактивы: баня водяная, пробирки химические, стаканы химические на 100 мл; пипетки, градуированные на 1, 2, 5 и 10 мл; лакмусовая бумага, хлорид натрия (10%-ный), сульфат аммония (насыщенный), гидроксид натрия (10 и 30%-ном), сульфат меди (1%‑ный), нингидрин (1%-ный в ацетоне 95%-ном), a-нафтол (0,2%‑ный спиртовой раствор), гипобромид натрия, ледяная уксусная кислота, серная, соляная и азотная кислоты (конц.), нитрит натрия (0,5%-ный), сульфаниловая кислота (5%-ная), карбонат натрия (10%‑ный), раствор плюмбита натрия.

Материалы.

Неразбавленный белок куриного яйца. Отделяют белок трех куриных яиц от желтков. Считая, что масса белка в одном яйце в среднем равна 33 г, получают около 100 мл неразбавленного раствора белков куриного яйца. Этот раствор содержит 88% воды, 1% углеводов и 0,5% минеральных веществ; остальное приходится на белок. Таким образом, полученный неразбавленный белок куриного яйца представляет собой примерно 10%-ный раствор белка.

Разбавленный раствор яичного альбумина. Белок одного куриного яйца после отделения от желтка хорошо взбалтывают и затем смешивают в колбе с десятикратным объемом дистиллированной воды. Раствор фильтруют через двойной слой смоченной водой марли или кусок стираного полотна, помещенные в воронку. Отфильтровывают раствор яичного альбумина; в осадке остается яичный глобулин. Учитывая, что концентрация альбумина в белке куриного яйца составляет около 6%, полученный разбавленный раствор яичного альбумина является примерно 0,5%-ным.






Дата добавления: 2014-10-22; просмотров: 229. Нарушение авторских прав

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2017 год . (0.007 сек.) русская версия | украинская версия