СПЕЦИАЛЬНЫЕ (ЭЛЕКТИВНЫЕ) ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ

Среды для выявления стафилококков

 

Молочно-солевой агар: в 100 см³ питательного агара растворяют при кипячении 6, 5 г хлорида натрия, стерилизуют при 0, 1 МПа в течение 20 мин. К расплавленному и остуженному до 45°С агару добавляют 10 см³ на 100 см³ обезжиренного стерилизованного молока, тщательно размешивают и разливают тонким слоем в чашки Петри. Учитывают колонии с зоной просветления.

 

Желточно-солевой агар: к 150 см³ расплавленного и охлажденного до 45°С 6%-ного солевого агара стерильно добавляют 50 см³ желточного раствора (1 желток куриного яйца растворяют в 150-200 см³ физиологического раствора). Быстро перемешивают и разливают в чашки Петри.

 

Среды для культивирования дрожжей и микроскопических грибов

 

Среда Сабуро. Основой этой среды является дрожжевая вода. Для приготовления дрожжевой воды 70…100 г свежих прессованных дрожжей (7…10 г сухих дрожжей) кипятят в течение 20…30 мин в 1 л дистиллированной воды и отстаивают в высоком цилиндре на холоде 12 час. Отстоявшуюся жидкость декантируют, добавляют еще 1 л воды, кипятят 30 мин, фильтруют, доводят рН до требуемого значения. Приготовленную среду стерилизуют дробно по 20 мин 2…3 сут. К 100 мл стерильной дрожжевой воды добавляют 1% пептона, 2% агара, после растворения агара вносят 4% глюкозы или мальтозы, фильтруют, разливают в пробирки и стерилизуют при 0, 05 МПа в течение 20 мин.

Среду можно готовить и на обычной 1%-ной пептонной воде.

Синтетическая среда Ридер для дрожжей. В состав среды входят (в г/л): сульфат аммония 3, сульфат магния 0, 7, нитрат кальция 0, 04, хлорид натрия 0, 5. дегидрофосфат калия 1, 0, гидрофосфат калия. Начальное значение рН среды 6, 6.Для изучения размножения дрожжей добавляют 2% сахара, для исследования брожения 5…10%. Полная синтетическая среда содержит также витамины (в мкг/мл): инозит 5, биотин 0, 0001, пантотеновую кислоту 0, 25, тиамин 1, 0, пиридоксин 0, 25, никотиновую кислоту 0, 5. Стерилизуют среду в автоклаве при давлении 0, 1 МПа.

Картофельно-глюкозный агар. Очищенный и нарезанный ломтиками картофель массой 200 г заливают 1 л дистиллированной воды и кипятят в течение 1 часа. Отвар фильтруют, к фильтрату добавляют воду до первоначального объема, 2% глюкозы и 2…3% агар-агара. Среду разливают в пробирки или колбы и стерилизуют при 0, 1 МПа в течение 10 мин. При употреблении устанавливают рН 3, 5 при помощи 10%-ного стерильного раствора безводной лимонной кислоты.

Синтетическая среда Чапека для грибов. Состав среды (в г/л): сахароза или глюкоза 30, дигидрофосфат калия 1, 0, нитрат натрия 2, 0, сульфат магния 0, 5, хлорид калия 0, 05, сульфат железа 0, 1, агар 20. Навеску агара выщелачивают и добавляют к указанным ингредиентам, предварительно растворенным в 1 л дистиллированной воды, прогревают текучим паром, устанавливают рН 4, 0…5, 5 10% раствором лимонной кислоты или гидроксида натрия. Фильтруют, разливают в пробирки и стерилизуют дробно текучим паром 3 сут по 30 мин.

Полная среда с лизином для выявления несовершенных дрожжей. В 1 л водопроводной воды вносят (в г/л): глюкозу - 50, сульфат магния - 1, дигидрофосфат калия - 2, лактат калия - 12 мл 50% раствора, L(+) моногидрат лизина – 1, витаминный раствор (на 100 мл стерильной дистиллированной воды добавляют (в г) инозитола 2, пантотената кальция 0, 4, никотинамида 0, 5, хлоргидраттиамина 0, 1), агара - 20. рН среды составляет 5, 0…5, 2. Среду разливают в пробирки и стерилизуют 15 мин при 0, 1 МПа.

 

Среда с ацетатом для обнаружения несовершенных дрожжей. На 1 л водопроводной воды берут 10 г ацетата натрия, 10 г хлорида аммония, 5 г глюкозы, 3 мл дрожжевого автолизата, разливают в пробирки и стерилизуют при давлении 0, 05 МПа в течение 30 мин.