ТЕМЫ ДЛЯ РЕФЕРАТИВНЫХ СООБЩЕНИЙ1. Мелатонин, место синтеза, химическая природа, влияние на метаболизм в норме и патологии. Возможность использования мелатонина в клинической практике. Нарушения функции соматотропного гормона. Молекулярные причины. Клинические проявления заболеваний, их диагностика. Основы лечения. Несахарный диабет, его виды. Молекулярные механизмы. Метаболические нарушения. Клинические симптомы. Основы лечения. Причины недостаточности функции щитовидной железы. Симптомы, клинические проявления у детей и взрослых. Основы лечения. Роль гипофункции щитовидной железы в репродуктивном здоровье женщины. Лабораторная работа 1 Качественные реакции на инсулин Принцип Инсулин является простым белком и дает характерные качественные реакции на белок: биуретовую, ксантопротеиновую, Фоля и др. Эти реакции не специфичны. Материал исследования Раствор инсулина. Реактивы 1) Реактив Фоля, содержащий 5% раствор (CH3COO)2Pb и 30% раствор NaOH, 2) 0, 5% р-р нингидрина, 3) 30% р-р NaOH, 4) 10% р-р NaOH, 5) 5% р-р Pb(CH3COO)2, 6) 5% р-р нитропруссида натрия, 7) конц. HNO3, 8) 5% р-р CuSO4. Проведение анализа В пробирки наливают по 5 капель раствора инсулина и проделывают качественные реакции на белок. Реакция на пептидную связь Для обнаружения пептидной связи в инсулине используется универсальная биуретовая реакция. Принцип Пептидная группа образует в щелочной среде с ионами Сu2+ комплексное соединение фиолетового цвета с красным или синим оттенком в зависимости от числа пептидных связей. Интенсивность окрашивания пропорциональна количеству пептидных групп. Проведение анализа В пробирку с 5 каплями раствора инсулина вносят 3 капли 10% раствора NаОН и 1 каплю 5% раствора CuSО4. Реакция для обнаружения a‑ аминогрупп Для обнаружения a‑ аминогрупп, содержащихся в аминокислотах, и концевых a‑ аминогрупп инсулина используется нингидриновая реакция. Принцип При нагревании белка с нингидрином происходят окислительное отщепление a‑ аминогрупп и восстановление нингидрина. Восстановленный нингидрин реагирует с аммиаком и другой молекулой окисленного нингидрина с образованием комплекса сине-фиолетового цвета. Проведение анализа 5 капель раствора инсулина смешивают с 5 каплями 0, 5% раствора нингидрина. Пробирки нагревают и кипятят до появления сине-фиолетового окрашивания. Реакция на ароматические аминокислоты Для обнаружения ароматических аминокислот (фенилаланин, тирозин, триптофан) используется ксантопротеиновая реакция.
|
