Б. Биуретовая реакцияБиуретовая реакция открывает в белке пептидную связь. Эту реакцию дают все белки, продукты их неполного гидролиза (пептоны, пептиды), некоторые небелковые вещества (биурет H2N–CO–NH–CO–NH2, оксамид H2N–CO–СО–NH2) а также свободные аминокислоты в больших концентрациях (гистидин, серин, треонин, аспарагиновая кислота). Биуретовая реакция обусловлена образованием окрашенного в сине-фиолетовый цвет медного комплекса. Полипептид в щелочной среде претерпевает полную енолизацию:
Енольная форма полипептида взаимодействует с гидроксидом меди и образует стабильное комплексное соединение:
Растворимый фиолетово-синий комплекс меди с белком Ход работы 1. В пробирку вносят 1 мл 1 %-го раствора яичного белка, добавляют 2 мл 10 %-го раствора гидроксида натрия и 1 мл 1 %-го раствора сульфата меди, появляется сине-фиолетовое окрашивание.
В. Ксантопротеиновая реакция Реакция обнаруживает в белке ароматические аминокислоты (фенилаланин, тирозин, триптофан). Большинство белков при нагревании с концентрированной азотной кислотой дает желтое окрашивание. Реакция обусловлена нитрованием бензольного кольца ароматических аминокислот с образованием нитросоединений жёлтого цвета:
Тирозин Динитротирозин
|
