Исследование желчи.

Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просмат­ривают под микроскопом осадок. Этим методом можно обнаружить вегетативные стадии лямблий. В свежевыделенном материале, полученном при дуоденальном зондировании, можно обнаружить подвижные вегетативные формы.

Исследование испражнений/

Сбор материала. Фекалии исследуют с целью обнаружения простейших кишечника.

Движение простейших — одно из самых характерных и отличительных свойств, которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтому основное правило, которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергать исследованию только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения до исследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должны доставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо пони­мать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не подогретые искусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в течение 2 ч после выделения.

Исследуемый материал собирают в чистую сухую посуду. Наиболее подходящими для этой цели являются картонные парафинированные стаканчики, которые после одноразового использования сжигают. Если фекалии собирают в стеклянную или фарфоровую посуду, то перед употреблением ее стерилизуют кипячением.

Вегетативные формы простейших весьма чувствительны к химическим веществам, и если в посуде, куда собирают: фекалии, остаются следы дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают и распознавание их стано­вится трудным, а иногда и невозможным.

Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При этом отмечают консистенцию кала, наличие слизи и крови. Если в лабораторию доставлено одновременно несколько проб фе­калий, в первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии с патологическими примесями/

Сохранять пробу до исследования надо при обычной температуре в вытяжном шкафу. Помещать в термостат не следует, так как при повышенной температуре быстрее происходит размножение бактерий, больше образуется продуктов метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации простейших.

При каждом анализе испражнений с целью обнаружения простейших кишечника обязательным является исследование нативного препарата и мазка, окрашенного раствором Люголя.

Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистые испражнения без видимой примеси фекальных масс могут быть исследованы без добавления изотонического раствора хло­рида натрия. Деревянной палочкой каплю испражнений переносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Пользоваться стеклянными палочками не рекомендуется, так как ими невозможно набирать слизистые ко­мочки, в которых находятся простейшие. Правильно приготовленный препарат должен быть опрятным, покровное стекло должно плотно прилегать к предметному с равномерным распределением жидкости между стеклами без ее выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умеренной толщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если же взято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших можно не обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден печатный текст.

Микроскопическое исследование свежего мазка нужно проводить, обязательно соблюдая следующие правила:

1. освещение препарата не должно быть ярким. Правильное освещение достигается соответствующим положением кон­денсора, который опускают тем больше, чем сильнее источник света. Используют также светофильтр;
2. препарат про­сматривают сначала под малым увеличением микроскопа (X 10), а потом с сухой системой большого увеличения;
3. передвигать препарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить какие-либо участки мазка или не попасть повторно на уже просмотренное место.

При правильном освещении даже под малым увеличением можно увидеть вегетативные стадии и цисты лямблий. После ориентировочного просмотра под малым увеличением обязательно применяют большое увеличение (х10, х40).

Циста в нативном мазке отличается от вегетативной стадии постоянной формой благодаря оболочке. Строение цист в нативном препарате плохо заметно, невидны ядра. Поэтому для уточнения вида применяют мазок, окрашенный раствором 'Люголя.

Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя по унифицированной методике рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г, кристаллический йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяют йодид калия, затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре не более месяца.

Цисты окрашиваются в золотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы заметны ядра, их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневого цвета.

Методика просмотра препарата, окрашенного раствором Люголя, такая же, как и нативного мазка. Следует учитывать, что при окраске раствором Люголя вегетативные стадии погибают и определяются с трудом.

Так, если фекалии оформленные, то в нативном мазке при микроскопии (х 400) обнаруживают цисты. Сочетание методов копроскопии и дуоденального зондирования повышает частоту выявления лямблиоза.

Следует отметить, что широкое распространение лямблии (носительство) нередко вводит в заблуждение и вызывает гипердиагностику лямблиоза. Поэтому при наличии клинической картины поражения желудочно-кишечного тракта или желчных путей необходимо исключить другие возможные причины заболевания, например провести бактериологические исследования.