Лабораторные работы. Работа 1. Приготовление нервно-мышечного препаратаРабота 1. Приготовление нервно-мышечного препарата.
Цель работы: научиться готовить нервно-мышечный препарат лягушки. Ход работы. Обезболивают и обездвиживают лягушку разрушением головного и спинного мозга. Для этого лягушку заворачивают в бинт, притягивая поочередно передние лапки к туловищу (как при пеленании), берут в левую руку, в угол рта вводят нижнюю браншу ножниц и делают декапитацию, отсекая голову за глазами с помощью быстрого разреза ножницами. Затем иглу вводят в спинномозговой канал и вращательными движениями разрушают спинной мозг. В каудальной части туловища с вентральной стороны вскрывают грудобрюшную полость с помощью V-образного разреза (сначала кожи, затем мышечной стенки). Берут лягушку за пальцы задних лапок, переворачивают вниз головой, и с помощью пинцета удаляют внутренние органы, сдвигая их в краниальном направлении так, чтобы обнажился каудальный отдел позвоночника. Ножницами перерезают позвоночник примерно посередине туловища и отделяют верхнюю половину тела с остатками внутренностей. Удерживая остаток позвоночника с помощью пинцета, другим пинцетом снимают кожу со спины и обеих лапок. Держа препарат так, чтобы лапки висели вниз под углом к позвоночнику, ножницами осторожно вырезают копчиковую кость - уростиль, которая при таком положении препарата выдается кверху. Затем, стараясь не задеть нервных стволиков крестцового сплетения, продольно разрезают по средней линии позвоночник и все другие ткани с тем, чтобы отделить лапки друг от друга. Следующим этапом работы является препаровка икроножной мышцы и седалищного нерва. Для препаровки нерва бедро располагают задней поверхностью вверх. Мышцы задней поверхности бедра разводят пинцетами и отпрепаровывают лежащий в глубине седалищный нерв по всей его длине. Затем подводят под ахиллово сухожилие браншу ножниц, отделяют сухожилие по всей длине и подрезают ниже сесамовидной косточки. Захватив сухожилие пинцетом, оттягивают мышцу в сторону, разрывая фасции, связывающие ее с другими тканями. Перерезают лапку ниже коленного сустава. Затем отделяют мышцы бедра от бедренной кости в дистальной ее части и перерезают бедренную кость приблизительно посередине. Таким образом, препарат состоит из седалищного нерва, икроножной мышцы, фрагмента позвоночника и бедренной кости.
Работа 2. Сравнение возбудимости нерва и мышцы (прямое и непрямое раздражение мышцы).
Цель работы: убедиться в различной возбудимости тканей, оценивая порог возбудимости. Ход работы. Готовят нервно-мышечный препарат. Накладывают пару электродов на седалищный нерв. Электроды соединяют с выходом стимулятора. Постепенно увеличивая амплитуду стимулирующих импульсов, определяют величину порогового раздражения для нерва. Затем электроды накладывают на мышцу, и определяют порог возбуждения мышцы. Результаты.
Выводы.
Работа 3. Наблюдение тетанического сокращения (зубчатого и гладкого) на икроножной мышце лягушки. Оптимум и пессимум частоты раздражения.
Цель работы: выявить зависимость характера сокращений поперечно-полосатой мышцы от частоты ее ритмического раздражения. Ход работы. Приготовить препарат икроножной мышцы лягушки. Пронаблюдать мышечные сокращения, постепенно увеличивая частоту стимуляции, начиная с 1 Гц. Отметить частоту, при которой амплитуда укорочения мышцы наибольшая. Результаты.
Выводы.
Вопросы и задания.
1. Предположим, что в эксперименте Вы наблюдаете, что одна и та же мышца, сокращаясь с одной и той же нагрузкой, в одних условиях укорачивается на 50%, а в других – только на 25%. В каких условиях развиваемая мышцей сила больше? Почему? 2. Как изменяется сила мышечного сокращения при увеличении силы стимула? Почему? Как наблюдаемые результаты согласуются с законом «все или ничего»? 3. Объясните условия, при которых возникает зубчатый и гладкий тетанус, оптимум и пессимум частоты стимуляции.
Работа 3. Наблюдение рефлекторных реакций у человека
Цель работы: научиться вызывать сухожильные и кожные рефлексы у человека. Ход работы. С помощью неврологического молоточка по имеющимся описаниям рефлексов, используемых для топической диагностики поражений ЦНС, пронаблюдать следующие рефлексы: коленный, ахиллов, сгибательно-локтевой, разгибательно-локтевой, подошвенный, верхний, средний и нижний брюшные.
Работа 4. Спинальные рефлексы у лягушки
Задача 1. Подготовительная часть. Приготовление препарата спинальной лягушки.
Цель работы: Охарактеризовать двигательные свойства спинальной лягушки. Ход работы: У лягушки удаляют головной мозг с помощью декапитации. Сразу после этого наступает спинальный шок. В это время можно попытаться вызвать рефлексы, нанося механические или химические раздражения на кожу лапок. Выжидают 2-3 мин, пока пройдет спинальный шок, и подвешивают лягушку за нижнюю челюсть в зажиме, к пробке или крючку, закрепленным в штативе. После этого оценивают способность спинального животного реагировать на химические раздражители и мышечный тонус.
Результаты: Сравните двигательные функции спинального животного и животного в состоянии спинального шока.
Покажите механизм изменений с помощью рефлекторных дуг.
Выводы: (отразите функцию спинного мозга в реализации движений и поддержании мышечного тонуса)
Задача 2. Определение времени спинномозгового рефлекса (по методу Тюрка).
Цель работы: исследование длительности латентного периода рефлекса в зависимости от силы стимула. Ход работы: Погружают заднюю лапку спинальной лягушки до уровня коленного сустава в стакан с 0,1 % раствором H2SO4. С помощью секундомера фиксируют время рефлекса, т.е. время от момента погружения лапки в кислоту до начала сгибательного рефлекса раздражаемой конечности. После исследования погружают лапку в стакан с водой и тщательно промывают. Несколько раз повторяют этот опыт с интервалами в 2-3 мин и определяют средний показатель времени рефлекса для данной силы раздражения. Затем измеряют время рефлекса, используя 0,3 и 0,5 % растворы кислоты.
Результаты:
Укажите вероятную причину отличий длительностей латентного периода.
Выводы:
Задача 3. Рецептивные поля спинномозговых рефлексов.
Цель работы: Сравнить рефлексы, возникающие в ответ на аналогичные раздражения в различных рецептивных полях. Ход работы: Кусочек фильтровальной бумаги смачивают в 0,1 % растворе H2SO4 и пинцетом помещают на наружную поверхность кожи голени задней лапки. Наблюдают сгибательную реакцию соответствующей конечности. Смывают кислоту, погружая лапку в стакан с водой. Проводят раздражение той же лапки 0,3 %, а затем 0,5 % растворами кислоты. Выбирают ту концентрацию (силу раздражения), при которой обнаруживается наиболее четкий сгибательный рефлекс. Бумажку, смоченную кислотой выбранной концентрации, помещают на боковую поверхность брюшка. Спустя некоторое время наблюдается защитный рефлекс – лягушка сбрасывает раздражающий агент ближайшей лапкой. Накладывают бумажку на наружную поверхность передней лапки, на брюшко ближе к грудной части, между передними и задними лапками. При этом каждый раз отмечают характер реакции, вызываемой раздражением данного рецептивного поля. Интервалы между раздражениями должны быть не менее 2-3 мин, после каждого раздражения лягушку погружают в стакан с водой и смывают остатки кислоты.
Результаты: Опишите разные варианты двигательной реакции при локализации раздражителя в разных рецептивных полях:
Выводы:
Задача 4. Анализ рефлекторной дуги.
Цель работы: изучить роль различных элементов рефлекторной дуги в реализации рефлекса. Ход работы: С помощью кусочка фильтровальной бумаги, смоченной H2SO4, осуществляют раздражение голени задней лапки и наблюдают сгибательный рефлекс. Затем делают круговой разрез кожи в области верхней трети бедра и снимают ее с лапки. Повторно наносят раздражение на голень этой лапки кислотой и убеждаются в отсутствии рефлекса. Делают продольный разрез кожи бедра на наружной поверхности другой задней лапки лягушки. Раздвинув мышцы бедра, обнажают седалищный нерв и осторожно отпрепаровывают его на протяжении 1,0 – 1,5 см. Подводят под нерв лигатуру, подтягивают нерв и подкладывают под него вату, смоченную новокаином. При этом происходит блокада проведения возбуждения в чувствительных нервных волокнах. Острым предметом раздражают пальцы лягушки и наблюдают ежеминутно наличие сгибательного рефлекса. Затем наносят раздражение на кожу бедра выше уровня блокады нерва и наблюдают развитие рефлекса сгибания. После этого отмывают нерв раствором Рингера и вновь проверяют наличие рефлекса на раздражение пальцев. Убедившись в возможности формирования у спинальной лягушки рефлексов, полностью разрушают спинной мозг с помощью введенной в спинномозговой канал препаровальной иглы. Пытаются воспроизвести рефлекторные акты путем нанесения различных раздражений (электрических, механических, химических) и убеждаются в полном исчезновении всех рефлексов.
Результаты: последовательно опишите наблюдаемые явления и нарисуйте рефлекторную дугу, на которой покажите применяемые воздействия.
Выводы: Работа 5. Исследование вегетативной реактивности
Задача 1. Кожные сосудистые рефлексы (дермографизм).
Цель работы: Научиться определять тонус симпатической системы в кожных сосудах с помощью реакции дермографизма. Ход работы: При легком штриховом раздражении кожи внутренней поверхности предплечья концом стеклянной палочки или рукояткой молоточка, шпателя через несколько секунд у здоровых лиц появляется белая полоска, что связано со спазмом поверхностных кожных сосудов – белый дермографизм. Если нанести раздражение сильнее и медленнее, то у здоровых лиц появляется красная полоска, окруженная узкой белой каймой - это красный дермографизм, который возникает в ответ на снижение симпатических вазоконстрикторных воздействий на сосуды кожи. Результаты: Опишите наблюдаемые явления по следующей схеме: вид воздействия, цвет центральной полоски, наличие и цвет каймы.
Объясните механизм наблюдаемого явления.
Оценка пробы: Возможно несколько вариантов результатов исследования: а) легкое и более сильное раздражение вызывает в каждом случае только белую полоску (местный белый дермографизм), что указывает на повышенный сосудистый тонус, обусловленный мощным влиянием симпатической системы на кожные сосуды; б) если оба вида раздражения (и слабое, и сильное) дают красный дермографизм, это указывает на пониженный сосудистый тонус, что обусловлено слабым влиянием симпатической системы на сосуды в коже.
Задача 2. Глазосердечный рефлекс (Ашнера).
Цель работы: Научиться определять тонус автономной нервной системы по степени выраженности глазосердечного рефлекса. Ход работы: После 10-минутной адаптации (покоя) в положении лежа подсчитывают частоту сердечных сокращений (ЧСС) в течение 30 секунд с последующим пересчетом на 1 минуту (исходный фон). Затем подушечками пальцев надавливают на оба глазных яблока до появления легкого болевого ощущения. Через 20 секунд после начала воздействия, не прекращая давления, регистрируют ЧСС в течение 15 секунд с пересчетом на 1 минуту. Результаты: Приведите величины ЧСС в исходном состоянии и во время воздействия.
Задание к работе. Изобразите предполагаемую рефлекторную дугу, объясняющую наблюдаемые явления.
Оценка пробы: уменьшение ЧСС на 6-12 ударов в минуту – нормальная вегетативная реактивность; более сильное снижение (парасимпатическая, вагальная реакция) – повышенная вегетативная реактивность; менее выраженное уменьшение – пониженная вегетативная реактивность; увеличение ЧСС (симпатическая реакция) – извращенная вегетативная реактивность.
Задача 3. Синокаротидный рефлекс (Чермака-Геринга).
Цель работы: Научиться определять тонус автономной нервной системы по степени выраженности синокаротидного рефлекса. Ход работы. После 10-минутной адаптации (покоя) в положении лежа подсчитывают ЧСС за 30 секунд в пересчете на 1 минуту и артериальное давление (АД) - исходный фон. Далее попеременно (через 1-2 с) пальцами рук (указательным и большим) надавливают на область кпереди от грудинноключичнососцевидной мышцы несколько ниже угла нижней челюсти до ощущения пульсации сонной артерии. Рекомендуется начинать давление с правой стороны, т.к. эффект раздражения справа сильнее, чем слева. Давление должно быть легким, не вызывающим болевых ощущений, в течение 15 секунд. С 15-ой секунды, не прекращая давления, начинают регистрировать ЧСС в течение 15 секунд с пересчетом на 1 минуту и измерять АД. Результаты: Приведите величины ЧСС и АД в исходном состоянии и во время воздействия.
Задание к работе. Изобразите предполагаемую рефлекторную дугу, объясняющую наблюдаемые явления (учесть изменения ЧСС и АД). Объясните, каково физиологическое значение данного рефлекса.
Оценка пробы: за нормальное изменение принимают снижение ЧСС на 7 ударов в минуту, т.е. увеличение парасимпатической или уменьшение симпатической активности, если изменение меньше, это говорит о снижении вегетативной реактивности. Патологические отклонения: внезапное и существенное замедление ЧСС без падения АД (вагокардиальный тип), сильное падение АД (больше 10 мм Hg) без замедления пульса (депрессорный тип), головокружение, обморочное состояние без изменения АД или пульса или с изменениями этих показателей (церебральный тип), Увеличение ЧСС и АД свидетельствует об извращенной реакции.
Задача 4. Ортоклиностатическая проба.
Цель работы: Изучить действие ортостатической нагрузки на параметры гемодинамики. Оценить автономный тонус с помощью ортоклиностатической пробы. Ход работы. В покое и горизонтальном положении после 10 минут адаптации определяют ЧСС за 30 секунд в пересчете на 1 минуту и АД. Затем пациент медленно, без лишних движений встает и в удобном положении у него измеряют пульс и АД, а затем это делают через минутные интервалы в течение 10 минут. Если патологические изменения появляются в конце пробы, измерения следует продолжать. Затем пациента просят снова лечь; сразу же после укладывания измеряют через минутные интервалы АД и ЧСС до тех пор, пока не достигнут исходного значения. Результаты: Приведите измеренные значения АД и ЧСС. Для каждого измерения дополнительно рассчитайте значение пульсового и среднего давления по формулам:
Рпульс = Рсист – Рдиаст; Рср = Рдиаст + 1/3 Рпульс, где
Рпульс – пульсовое АД; Рсист – систолическое АД; Рдиаст – диастолическое АД; Рср – среднее АД.
Данные измерений и расчетов представьте в следующем виде:
Отметьте наибольшие изменения среднего АД и ЧСС. Постройте график изменения в ходе пробы а) среднего АД и ЧСС (мин-1); б) систолического, диастолического и среднего давления.
Задание к работе. На графиках укажите вероятные причины изменения хода кривых АД и ЧСС. Изобразите предполагаемую рефлекторную дугу, объясняющую наблюдаемые явления (учесть изменения ЧСС и АД). Объясните, каково физиологическое значение данного рефлекса.
Оценка пробы. Нормальные реакции (нормальная вегетативная реактивность): при вставании - кратковременный подъем систолического давления на 20 мм Hg, в меньшей степени - диастолического и преходящее увеличение ЧСС на 30 в 1 минуту. После возвращения в горизонтальное положение АД и ЧСС должны через 3 минуты прийти к исходному уровню. Непосредственно после укладывания может наступить кратковременный подъем давления. Субъективных жалоб быть не должно. Признаки повышенной вегетативной реактивности: а) повышение систолического (более, чем на 20 мм Hg) и диастолического давления при вставании; б) изолированное повышение диастолического давления при вставании; в) увеличение ЧСС при вставании более чем на 30 в 1 минуту; г) ощущение прилива крови к голове, потемнение в глазах в момент вставания. Признаки пониженной вегетативной реактивности: а) преходящее падение систолического давления более чем на 10-15 мм Hg непосредственно после вставания, при одновременном снижении или повышении диастолического давления; б) покачивание и ощущение слабости в момент вставания.
Работа 6. Изучение подвижности нервных процессов и асимметрии полушарий с помощью тэппинг-теста. Цель работы: Сравнить подвижность нервных процессов и развитие утомления в доминантном и субдоминантном полушариях. Ход работы. Испытуемому предлагается с максимальной частотой касаться пальцами руки горизонтальной поверхности (наносить ручкой или карандашом на бумагу точки) в течение 6 десятисекундных интервалов. Для проведения работы используется бланк, представляющий собой шесть квадратов, в каждом из которых, двигаясь по кругу, испытуемый ставит точки в течение 10 секунд, заполняя в течение одной минуты все шесть квадратов. После выполнения пробы подсчитывают количество точек в каждом квадрате. С помощью теста определяют: 1. Подвижность нервных процессов (т. е. способность переключать возбудительные процессы на тормозные и наоборот) – по среднему количеству касаний за 10 секунд. 2. Скорость развития утомления – по изменению количества касаний в ходе теста (число касаний в первом квадрате – число касаний в шестом квадрате). 3. Стабильность подвижности нервных процессов – по величине вариационного размаха (максимальное – минимальное количество касаний). 4. Врабатываемость (т. е. способность быстро включаться в работу) – по количеству касаний, сделанных в первый десятисекундный интервал.
Пробу проводят сначала правой, а затем левой рукой и сравнивают результаты.
Результаты.
Результаты записывают в таблицу:
Строят график изменения количества касаний правой и левой рукой в течение шести десятисекундных интервалов.
Выводы:
Работа 7. Исследование сенсорных систем. Оборудование: таблица для определения остроты зрения, периметр Форстера, аудиометр, пинцет, циркуль, ватные тампоны, сосуды с водой различной температуры (10, 25 и 40°С), раствор сахара, соли, лимонной кислоты, (каждый в концентрации 1; 0,1; 0,01; 0,001%), глазные пипетки. Задача 1. Определение двухточечного порога тактильной чувствительности.
Испытуемого, сидящего на стуле, просят закрыть глаза. Циркулем Вебера с максимально сведенными ножками прикасаются к различным участкам кожи (кончики пальцев рук, ладони, предплечье, плечо, спина) При этом следят за тем, чтобы обе ножки эстезиометра прикасались к коже одновременно и с одинаковым давлением. Продолжают прикосновения к различным участкам кожи испытуемого в заранее избранной последовательности, постепенно раздвигая ножки циркуля (прибавляя каждый раз по 1 мм). Замечают, при каком расстоянии между ножками циркуля и на каком участке кожи испытуемый впервые различают двойные прикосновения. Таким образом определяют пространственный порог тактильной чувствительности. Определив пространственный порог тактильной чувствительности в различных участках кожи, занесите полученные данные в таблицу.
Задача 2. Определение симметричности тактильной чувствительности.
Испытуемого просят закрыть глаза и наносят ему на симметричные участки тела легкие прикосновения волоском Фрея (или распушенным ватным тампоном). Отмечают, верно ли испытуемый определяет локализацию раздражителя. Какую информацию дает данный метод, где эта информация может быть использована?
Задача 3. Исследование температурной чувствительности
Испытуемого просят закрыть глаза и к симметричным участкам тела прикасаются пробиркой с горячей или холодной водой. Отмечают, верно ли испытуемый определяет локализацию и качество раздражителя. Какую информацию дает данный метод, где эта информация может быть использована?
Задача 4. Определение болевой чувствительности
Испытуемого просят закрыть глаза и к симметричным участкам тела прикасаются иглой или тупым предметом (задним концом карандаша и т. п.). Испытуемого просят сказать, острое или тупое было прикосновение. Отмечают, верно ли испытуемый определяет качество раздражителя. Какую информацию дает данный метод, где эта информация может быть использована?
Задача 5. Исследование чувствительности обонятельной системы Испытуемому поочередно одну ноздрю закрывают ватным тампоном, а к открытой ноздре подносят ватку, смоченную пахучей жидкостью (спирт, эфир, духи, адеколон, аммиак и т. д.). Отмечают, правильно ли испытуемый определяет запахи, с какой стороны имеются нарушения чувствительности. Какую информацию дает данный метод, где такая информация может использоваться? Задача 6. Определение порога вкусовой чувствительности Испытуемому на кончик языка (не прикасаясь к языку) пипеткой наносят каплю какого-либо из перечисленных растворов, предлагают сделать глотательное движение и просят определить вкус раствора. Начинают исследование с нанесения раствора минимальной концентрации, постепенно увеличивая ее до тех пор, пока испытуемый не сможет определить вкус предлагаемого раствора. Эту концентрацию принимают за порог данной вкусовой чувствительности. Перед нанесением капли следующего раствора испытуемый должен тщательно прополоскать рот водой, после чего можно приступить к очередному этапу исследования другим раствором. Определенные вами пороги вкусовой чувствительности к различным веществам занесите в таблицу. Для пороговой концентрации вещества сравните чувствительность к нему разных зон языка. Сравните пороги чувствительности к различным веществам у разных испытуемых. Объясните результаты.
|
