Студопедия — ИдентификациЯ аминокислот методом распределительной хроматографии
Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

ИдентификациЯ аминокислот методом распределительной хроматографии






 

ИдентификациЯ аминокислот методом распределительной хроматографии

 

Распределительная или жидко-жидкостная хроматография используется для разделения в частности высокополярных соединений, к которым относятся, например, аминокислоты. Разделение в этом методе основано на различном коэффициенте распределения компонентов образца между стационарной и подвижной жидкими фазами. Процессы распределения между жидкими фазами по сравнению с адсорбционными являются более чувствительными к самым незначительным структурным изменениям; поэтому этот метод успешно используется для разделения соединений одного гомологического ряда.

В данной работе разделение смеси аминокислот осуществляется за счет различного распределения (растворимости) между двумя жидкими фазами: стационарной фазой - водой и подвижной фазой - н-бутанол, уксусная кислота, вода в соотношении 4:1:1. Носителем стационарной фазы является силикагель (готовые пластинки ² Silufol²). Детекция аминокислот на пластинке производится с помощью нингидрина, который дает цветную реакцию с a-аминокислотами.

Для разделения используются водные растворы аминокислот (небольшое количество аминокислот растворяют в 0,5 - 1мл дистиллированной воды в микростаканчике). На пластинку ²Silufol², обработанную паром в точки тонким капилляром наносят приготовленные растворы исследуемого образца и свидетелей (стандарты аминокислот). Диаметр пятна не должен превышать 2мм. Точки нанесения должны отстоять от краев пластинки не менее чем на 1см.

После нанесения пробы пластинки помещают в камеру, в которую за 10 - 15мин до начала хроматографирования следует налить примерно 24 мл смеси н-бутанол - уксусная кислота - вода в сотношении 4:1:1. Для достижения лучшего разделения аминокислот в данной работе используется двухкратное хроматографирование. После того, как фронт подвижной фазы (системы растворителей) поднимется на 10 -12 см, пластинка вынимается из камеры, подсушивается в вытяжном шкафу и хроматографируется повторно в тех же условиях.

Пластинка, вынутая из камеры, вновь высушивается в вытяжном шкафу и опрыскивается 0,2% раствором нингидрина (из пульверизатора).

После опрыскивания пластинка помещается в сушильный шкаф при 110-120°С. Аминокислоты детектируются в виде розовато-лиловых пятен.

Совпадение значений Rf исследуемого образца и свидетеля говорит об их идентичности.

Зарисуйте расположение пятен аминокислот и запишите величины Rf аминокислот.

Какие виды хроматографии используются при выполнении данной работы? Нужные слова подчеркните.

 

а) жидко-жидкостная, твердо-жидкостная, газожидкостная.

б) адсорбционная, ионообменная, ситовая (гель-хроматография).

в) колоночная, в тонком слое, бумажная.

 

Лабораторная работа № 2:

 







Дата добавления: 2015-10-15; просмотров: 657. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!



Вычисление основной дактилоскопической формулы Вычислением основной дактоформулы обычно занимается следователь. Для этого все десять пальцев разбиваются на пять пар...

Расчетные и графические задания Равновесный объем - это объем, определяемый равенством спроса и предложения...

Кардиналистский и ординалистский подходы Кардиналистский (количественный подход) к анализу полезности основан на представлении о возможности измерения различных благ в условных единицах полезности...

Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...

Менадиона натрия бисульфит (Викасол) Групповая принадлежность •Синтетический аналог витамина K, жирорастворимый, коагулянт...

Разновидности сальников для насосов и правильный уход за ними   Сальники, используемые в насосном оборудовании, служат для герметизации пространства образованного кожухом и рабочим валом, выходящим через корпус наружу...

Дренирование желчных протоков Показаниями к дренированию желчных протоков являются декомпрессия на фоне внутрипротоковой гипертензии, интраоперационная холангиография, контроль за динамикой восстановления пассажа желчи в 12-перстную кишку...

Выработка навыка зеркального письма (динамический стереотип) Цель работы: Проследить особенности образования любого навыка (динамического стереотипа) на примере выработки навыка зеркального письма...

Словарная работа в детском саду Словарная работа в детском саду — это планомерное расширение активного словаря детей за счет незнакомых или трудных слов, которое идет одновременно с ознакомлением с окружающей действительностью, воспитанием правильного отношения к окружающему...

Правила наложения мягкой бинтовой повязки 1. Во время наложения повязки больному (раненому) следует придать удобное положение: он должен удобно сидеть или лежать...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2024 год . (0.008 сек.) русская версия | украинская версия