Организация ДНК эукариотФизико-химические свойства ДНК 1. Денатурация - происходит при действии химических факторов (мочевина, гуанидинхлорид, кислота, щелочь) и физических факторов (температура). Денатурация при действии температуры – плавление ДНК. Гиперхромный эффект – увеличение оптической плотности ДНК при плавлении ДНК. Максимальное повышение оптической плотности раствора ДНК при длине волны 260 нм приблизительно равно 80 %, при полном распаде ее до мононуклеотидов. 2. Гибридизация - возможна гибридизация между различными молекулами ДНК и между ДНК и РНК. Гибридизация позволяет выявить родство различных ДНК. Чем ближе родство, тем выше степень гибридизации. Этапы гибридизации -плавление ДНК -перенос на нитроцеллюлозной фильтр -фильтр помещают в раствор анализируемой ДНК -отмывка не связавшейся ДНК -анализ результатов гибридизации
Организация ДНК эукариот Длина молекулы ДНК эукариот многократно превышает размеры клетки, в связи с этим существуют несколько уровней ее организации Голая ДНК - Такая ДНК обладает сверхчувствительностью к ДНКазам Бусинка на ниточке - ДНК (около 160 п.н.) делает два витка вокруг нуклеосомы (кора). Нуклеосома содержит по две молекулы каждого из гистонов Н2А, Н2В, Н3 и Н4, т.е. состоит из восьми молекул. Размер ДНК между нуклеосомами (линкерная ДНК) составляет около 60 п.н. 30 нм – хроматиновая фибрилла - формируется в результате взаимодействия гистона Н1 с линкерной ДНК Серия петельных доменов Метафазная хромасома
|
