Диагностические подтверждающие реакции при сифилисе.Используется комплекс серологических реакций КСР: ►Реакция Вассермана с двумя антигенами - кардиолипиновым и трепонемным, ►р-ция микропреципитации типа VDRL, ►РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем) ►РИФ. При разных формах сифилиса специфичность и чувствительность реакций неодинаковы! Стандартная реакция Вассермана (РВ) ставится в трех рядах пробирок с использованием двух антигенов: кардиолипинового - неспецифического и трепонемного антигена - специфического. Принцип реакции: кардиолипиновый антиген КЛАГ позволяет выявить реагины – аутоантитела к веществу митохондриальных мембран. В качестве КЛАГ используют спиртовой экстракт бычьего сердца, обогащённого холестерином и лецитином. В качестве специфического антигена используют экстракт из бледных трепонем, обработанных ультразвуком. Для индикации используют гемолитическую систему из эритроцитов барана и гемолитической кроличьей сыворотки Специфические антитрепонемные AT (если они есть в сыворотке обследуемого) вступают в соединение со специфическим АГ (или КЛАГ вступает в соединение с реагинами сыворотки). Образовавшийся ИК связывает комплемент – РСК+ (гемолиз отрицательный). РИТ для определения антитрепонемных антител. С этой целью используют сыворотку больного, живые тканевые трепонемы, комплемент. Реакцию ставят в стерильных пробирках и через 20 часов инкубациив термостате оценивают в темном поле результаты по проценту обездвиженных трепонем. Если обездвижены более 50% трепонем, реакция положительная, 31-50% - слабоположительная, меньше — отрицательная. РИФ (непрямая): на препарат с фиксированными трепонемами наносят сыворотку больного, антитела связываются, после инкубации и промывания добавляют АТС, меченную ФИТЦ. При положительной реакции наблюдается свечение трепонем. РИП: вирулентные тканевые трепонемы сенсибилизируют сывороткой больного в присутствии комплемента и эритроцитов. При наличии антител в сыворотке больного трепонемы в комплексе с антителами, комплементом и эритроцитами исчезают из надосадочной жидкости в результате прилипания и осаждения. Используют также РПГА с трепонемным эритроцитарным диагностикумом, ИФА с трепонемным антигеном. Неспецифические тесты (с кардиолипиновыми антигенами) n РСК (Вассермана) n РП на стекле (предварительное обследование) n РНГА (экспресс-диагностика) Специфические тесты (с трепонематозными антигенами) n РСК (Вассермана)
|
