Работа 8. Определение перекисного числаПерекисное число (ПЧ) выражают в миллимолях активного кислорода на 1000 г жира или процентах йода, выделившегося при взаимодействии активного пероксидного или гидропероксидного кислорода с йодистоводородной кислотой. Метод основан на реакции взаимодействия активного пероксидного или гидропероксидного кислорода с йодистоводородной кислотой при титровании:
Выделившийся свободный йод оттитровывают тиосульфатом натрия:
Метод предназначен для определения первичных продуктов окисления жиров и масел – пероксидных и гидропероксидных соединений.
Реактивы и материалы: ü Хлороформ, х.ч. ü Ледяная уксусная кислота ü 50%-ный водный свежеприготовленный раствор йодистого калия o моль/дм3 раствор тиосульфата натрия ü 1%-ный раствор свежеприготовленного крахмального клейстера (0.25 г растворимого крахмала смешивают с 5 см3 воды и добавляют эту смесь к 20 см3 кипящей воды, кипятят 2-3 минуты)
Методика проведения анализа В коническую колбу с пришлифованной крышкой взвешивают с точностью до третьего десятичного знака 1 г исследуемого масла (жира). Навеску масла (жира) растворяют в предварительно приготовленной смеси ледяной уксусной кислоты и хлороформа (в соотношении 2: 1 по объему). Добавляют в колбу 1 см3 50%-ного раствора KI (не должно быть расслоения, в противном случае необходимо увеличить количество смеси). Колбу выдерживают 20 минут без доступа света. Затем в колбу добавляют 50 см3 дистиллированной воды и 5-6 капель 1%-ного раствора крахмального клейстера. Выделенный йод титруют 0.01 моль/дм3 раствором тиосульфата натрия. Параллельно с основным определением проводят контрольное определение. Перекисное число в миллимолях активного кислорода на кг вычисляют по формуле:
ПЧ = (V1-V2)· C ·1000/ m
где V1 – количество 0.01 моль/дм3 раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование в основном опыте, см3; V2 – количество 0.01 моль/дм3 раствора тиосульфата натрия, пошедшее на титрование в контрольном опыте, см3; C – концентрация раствора тиосульфата натрия, моль/дм3; m – масса исследуемого образца масла или жира, г; 1000 – коэффициент, учитывающий пересчет результата измерения в миллимоли на кг. Работа 9. Реакция с уксусным ангидридом (реакция Либермана-Бурхарда) Под действием серной кислоты может происходить дегидратация и окисление стеринов, в результате чего две молекулы, например холестерина, потерявшие 2 молекулы воды, взимодействуют между собой по третьему атому углерода, образуя вещества с суммарными формулами С54Н86 и С54Н88. Эти непредельные углеводороды с сопряженными двойными связями дают различные производные с серной кислотой и уксусным ангидридом.
Реактивы и материалы: ü Растительное масло ü Молочный жир (сливочное масло) ü Отфильтрованный раствор яичного порошка ü 50%-ные хлороформные растворы продуктов ü Серная кислота концентрированная ü Уксусный ангидрид Методика проведения анализа К 1 мл хлорофомного раствора растительного, сливочного масла и яичного порошка добавляют 10 капель уксусного ангидрида и 6 капель концентрированной серной кислоты. Жидкость хорошо встряхивают и наблюдают образование сначала красной, затем красно-фиолетовой, фиолетовой, аметисто-синей, синей и, наконей, зеленой окраски. При маленькой концентрации холестерина может сразу появиться зеленая окраска. Эта реакция положена в основу количественного определения холестерина.
|
