Очевидно, что зараженные вирусом клетки выживут и смогут передаватьПотомству измененную генетическую программу. Наиболее распростра- Ненными векторами являются многокопийные плазмиды с молекулярной массой 3–10 кб. Первые плазмиды были выделены из бактерий, впослед- Ствии их стали конструировать методами генной инженерии. Использование векторов общего назначения методически – несложная Задача, не требующая специального оборудования. Наиболее используе- Мыми плазмидными векторами для клонирования являются плазмиды E. Coli (pBR322, pBR325, pACYC117, pACYC 184), а также сконструирован- Ные на основе плазмиды CoIEI. Современные плазмидные векторы в при- Сутствии хлорамфеникола способны к репликации, независимо от деления хромосомы, количество копий плазмид при этом может возрастать до 1– Копий на клетку. При получении библиотеки генов растений и высших животных, у ко- торых общая длина генома составляет до 3⋅109 и более, емкость вектора Часто играет решающую роль. В данном случае в качестве вектора ис- пользуют ДНК фага λ. При помощи специальных методов рекомбинант- Ные ДНК вводят прямо в фаговые головки. Еще большей емкостью обла- дают плазмиды – космиды (до 40 кб), у которых cos-фрагмент генома фага λ, участвует в упаковке ДНК в фаговую частицу на конечной стадии раз- Вития. Для упаковки ДНК необходимо, чтобы ДНК содержала COS-
|
