В генетически сконструированной E. coli. Исходная трудность, с которойони столкнулись, – низкий уровень мРНК в лейкоцитах, даже стимулиро- Ванных заражением вирусом. При переработке 17 л крови удалось выде- Лить мРНК и получить ДНК-копию. Последнюю встроили в плазмиду и Клонировали в E. coli. Было испытано свыше 20 000 клонов. Отдельные клоны были способны к синтезу интерферона, но с низким выходом, 1–2 Молекулы на клетку. Аналогичные исследования проводили в Японии, Англии, Франции, России. В 1980 г. были установлены нуклеотидные последовательности α- и β- интерферонов: мРНК фибробластного интерферона состоит из 836 нук- леотидов; из них 72 и 203 нуклеотида приходятся на 5’- и 3’- Нетранслируемые области, 63 кодируют пептид, ответственный за секре- Цию интерферона из клеток и 498 нуклеотидов кодируют 166 аминокис- Лотных остатков собственно интерферона. После этого химическим син- тезом были получены гены α- и β-интерферонов, которые клонировали в E. coli. В 1981 г. была расшифрована нуклеотидная последовательность Иммунного интерферона, существенно отличающегося от первых двух, но Сравнимого по величине молекулы. Существенным моментом был полный Синтез гена лейкоцитарного интерферона человека, осуществленный в Великобритании сотрудниками фирмы «Империал кемикал индастри» и Школы биологических наук Лестерского университета. В течение полуто-
|
