Работа 5. Подсчет количества лейкоцитов в крови при помощи камеры Горяева.

Подсчет лейкоцитов производится в камере Горяева в больших квадратах. Сторона тако­го квадрата равна 1/5 мм, а объем жидкости над каждым квадратом в каме­ре равен 1/5^.1/5^.1/10=1/250 мм³ Для подсчета лейкоцитов кровь разводят в 20 (10) раз 5 % раствором уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Уксусная кислота разрушает мембраны эритроцитов, благодаря че­му последние не мешают подсчету лейкоцитов, а окраска ядер лейкоцитов метиленовой синью улучшает их видимость.

Методика выполнения работы: Обработать безымянный палец левой руки спиртом, проколоть скарификатором, снять ватным там­поном каплю крови. Выдавить следующую каплю, натянуть в капилляр смесителя для лейкоцитов до отметки 0,5. Быстро втянуть раствор уксус­ной кислоты до метки 11, перемешать кровь с раствором в расширенной части смесителя. Подготовить камеру Горяева к работе и заполнить ее раствором с лейкоцитами. Для этого аккуратно размешать раствор в смесителе, выпустить первые две капли крови на ватку и прикоснуться кончиком смесителя к краю притертого покровного стекла. Лейкоциты удобнее считать при малом увеличении микроскопа (окуляр 15, объектив 20).

Сосчитать число лейкоцитов в 25 больших квадратах. Для полу­чения точного результата необходимо считать лейкоциты, лежащие внутри, на верхней и левой границе большого квадрата. После подсчета найти сумму лейкоцитов в 25 больших квадратах и вычислить по формуле количество лейкоцитов в 1 мкл (мм³) крови.

ФОРМУЛА ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЛЕЙКОЦИТОВ:

где:

X - искомое число лейкоцитов в 1 мкл (мм³), Л - сумма лейкоцитов в 25 больших квадратах, 25 - количество больших квадратов, 20 - разведение крови, 1/250 - объем столбика жидкости над большим квадратом.

Рекомендации к оформлению протокола. Сравнить результат исследований крови с нормой. При отклонении от нормы указать возможные причины данного несоответ­ствия.