Занятие № 19

 

ТЕМА. СВЁРТЫВАНИЕ КРОВИ И ФИБРИНОЛИЗ

 

Цель занятия: 1.Ознакомиться с современными представлениями о свёртывании крови.

2.Знать роль основных факторов свёртывающей системы.

3.Усвоить природу противосвёртывающей системы крови.

4.Ознакомиться с методами определения фибриногена.

Исходный уровень знаний:

- структура и биологическая роль белков;

- классификация белков;

- каталитическая функция белков;

- кровь: химический состав, физико-химические характеристики, функции;

- форменные элементы крови;

- отличие плазмы крови от сыворотки.

Содержание занятия.

I.2. Плазменные факторы свёртывания крови: место синтеза, строение, функция.

Тромбоцитарные факторы свёртывания: название, функция.

"Внешний" и "внутренний" пути активации свёртывающей системы крови.

Схема фибринолиза.

Лекарственные препараты, используемые для лечения и профилактики тромбозов.

Гемофилии: природа, способы лечения.

 

II.1 Работа № 1. ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ФИБРИНОГЕНА ГРАВИОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

(по Рутбергу Р.А.)

 

Принцип метода. При добавлении к плазме раствора хлористого кальция происходит свертывание фибриногена и выпадение его в осадок.

Количество выпавшего в осадок фибриногена определяют путем взвешивания сгустка на торсионных весах.

Порядок выполнения работы. В пробирку внести 1 мл плазмы и добавить 0,1 мл 5% раствора хлористого кальция. Пробирку встряхнуть и оставить в термостате при температуре 37⁰С на 15 минут. Образовавшийся фибриновый сгусток отжать на фильтровальной бумаге до исчезновения следов влаги. Отжатый сгусток взвесить на торсионных весах с точностью до 1 мг. Полученный результат умножить на коэффициент 0.222. Количественный результат выражается в граммах на 1 литр плазмы.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

ВЫВОД:

 

Клинико-диагностическое значение.

У здоровых людей концентрация фибриногена в плазме колеблется в пределах 2 - 4 г/л. Значительное повышение концентрации фибриногена отмечается при системных заболеваниях соединительной ткани и острых воспалительных процессах. Снижение обусловлено, в первую очередь, нарушением синтеза при заболеваниях печени и потреблением в большом количестве при ДВС синдромах.

 

Работа № 2. МИКРОМЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

ФИБРИНОГЕНА В В ПЛАЗМЕ

 

Принцип метода. Спиртовый раствор b-нафтола осаждает из плазмы фибрин-мономеры и их комплексы с фибринопептидами А и В, фибриногеном.

Порядок выполнения работы. В центрифужную пробирку внести 0.5 мл. плазмы и добавить 2 капли 2% раствора b-нафтола. Пробирку встряхнуть и оставить в штативе при комнатной температуре на 10 минут. При наличии в плазме фибриногена В в пробирке образуется сгусток, нити или гранулы.

Клинико-диагностическое значение.

В норме фибриноген В в крови не определяется. Появление фибриногена В в плазме обусловлено патологическим нарастанием уровня тромбина в крови, поэтому положительная реакция на фибриноген В имеет большое значение для диагностики пред- и тромботических состояний, ДВС-синдромов.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

ВЫВОД:

 

III.2. Контрольные вопросы.

Какова концентрация фибриногена в плазме крови у здоровых людей?

Укажите причины гиперфибриногенемии, гипофибриногенемии.

Когда в плазме определяется фибриноген В?

 

Материал для самоподготовки: I а)1. с. 599-607; II; III.

 

Ч А С Т Ь II

Ф У Н К Ц И И И О Б М Е Н

О С Н О В Н Ы Х В Е Щ Е С Т В В О Р Г А Н И З М Е

РАЗДЕЛ VII. ОБМЕН И ФУНКЦИЯ УГЛЕВОДОВ

Занятие № 19

 

ТЕМА. ПЕРЕВАРИВАНИЕ И ВСАСЫВАНИЕ УГЛЕВОДОВ. СИНТЕЗ И РАСПАД ГЛИКОГЕНА. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ И КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ УГЛЕВОДОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ.

Цель занятия: 1.Повторить физико-химические свойства и биологическую роль углеводов.

2.Изучить процессы переваривания и всасывания углеводов.

3.Ознакомиться с обменом гликогена.

4.Овладеть методами качественного и количественного определения глюкозы в моче.

Исходный уровень знаний:

- строение моносахаридов;

- строение и свойства олигосахаридов;

- строение и свойства крахмала, гликогена, целлюлозы;

- классификация и биологическая роль углеводов;

- классификация и номенклатура ферментов.

Содержание занятия.

I.2. Стереоизомерия моносахаридов.

Циклические формы моносахаров.

Реакции полуацетального гидроксила.

Реакции с участием карбоксильной группы.

Физико-химические свойства и биологическое значение мальтозы, сахарозы и лактозы.

Особенности строения и биологическая роль гомо- и гетерополисахаридов.

Переваривание и всасывание углеводов.

Синтез гликогена.

Гликогенолиз.

 

II.1. Работа № 1. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА САХАР

В МОЧЕ.

Для определения сахара в моче применяются качественные реакции Троммера, Фелинга, Ниландера, основанные на окислении свободной альдегидной группы углеводов (напр., глюкозы до глюконовой кислоты) и восстановления металлов (медь, висмут, и др.) из их окисных соединений. Эта реакция довольно быстро происходит при нагревании в щелочной среде. Восстановленная форма металлов окрашена в характерный цвет (напр., закись меди - в красный, висмут - в черный).

 

Химизм реакции Троммера см. ч.I, зан. №4, работа №1.

Проба с жидкостью Фелинга основана на том же принципе, что и реакция Троммера. Отличие и преимущество этой реакции заключается в том, что Фелинг предложил прибавлять сегнетову соль для связывания избытка гидрата окиси меди, из которого при нагревании образуется оксид меди (СuO) - осадок черного цвета, затемняющий реакцию при малых количествах глюкозы в исследуемом образце.

 

COONa COONa

| |

(CHOH)₂+ Cu(OH)₂ → (CHO)₂Cu + 2H₂O

| |

COOK COOK

 

Порядок выполнения работы.

а) Реакция Троммера.

К 5 кап. мочи прибавить 5 кап. 10% раствора едкого натрия и 5 кап. 1% раствора сернокислой меди, нагреть.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

 

б) Реакция с жидкостью Фелинга.

К 20 кап. мочи прилить 10-20 кап. жидкости Фелинга и нагреть до кипения верхний слой жидкости.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

 

РАБОТА № 2. ЭКСПРЕСС-МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

САХА­РА В МОЧЕ.

Порядок выполнения работы.

Насыпать в пробирку небольшое количество порошка (состав: 1 часть сернокислой меди + 10 частей безводного углекислого натрия), прибавить несколько капель мочи, подогреть.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

Э Т А Л О Н

 

Цвет раствора	Количество сахара
Синий	Отсутствует
Желто-зеленый	0,5% (5 г/л)
Коричнево-красный	1-2% (10-20 г/л)
Красный	свыше 2% (20 г/л)

 

ВЫВОД:

 

 

Клинико-диагностическое значение.

В норме сахар с мочой выделяется в ничтожно малых количествах и обычными методами не определяется.

Появление сахара в моче в количествах, которые можно определить обычными клиническими методами, носит название глюкозурии. Моча содержит, в основном, глюкозу и, реже, фруктозу и галактозу. Глюкозурия может быть функциональная (пищевая, эмоциональная) и патологическая (при заболевании почек, при сахарном диабете), когда в суточной моче может содержаться до 200-300 г глюкозы. Иногда глюкозурия наблюдается при беременности.

III.2.Контрольные вопросы.

Что является мономером крахмала и целлюлозы?

Какие виды амилаз вы знаете, где функционируют a и b-амилазы и как гидролизуют крахмал (гликоген)?

Что такое глюкозурия?

Когда отмечается физиологическая глюкозурия?

Какие заболевания сопровождаются глюкозурией?

 

Материал для самоподготовки. а)1 с. 319-327, 665-669; II, III.