Занятие № 27
ТЕМА. АЗОТИСТЫЙ БАЛАНС. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ЦЕН-НОСТЬ, ПЕРЕВАРИВАНИЕ И ВСАСЫВАНИЕ БЕЛКОВ. ГНИЕНИЕ БЕЛКОВ В КИШЕЧНИКЕ. КАЧЕСТВЕННЫЙ И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА.
Цель занятия: 1.Знать процессы переваривания и всасывания белков. 2.Изучить процессы гниения аминокислот в кишечнике и обезвреживания продуктов гниения. 3.Овладеть методами количественного и качественного анализа желудочного сока. Исходный уровень знаний: - строение и физико-химические свойства аминокислот; - химия и биологическая роль белков; - заменимые и незаменимые аминокислоты; - специфичность действия ферментов. Содержание занятия. I.2. Критерии биологической ценности белков. Азотистый баланс: виды, примеры. Физиологический минимум и оптимум белка. Переваривание и всасывание белков: условия, отделы желудочно-кишечного тракта. Протеолитические ферменты: название, место и механизм активации, субстратная специфичность. Гниение аминокислот в кишечнике, обезвреживание продуктов гниения.
II.1.Работа № 1. ПАТОЛОГИЧЕСКИЕ СОСТАВНЫЕ ЧАСТИ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА И ИХ ОБНАРУЖЕНИЕ. Наряду с нормальными компонентами в желудочном соке при ряде заболеваний могут появляться и другие вещества: молочная кислота, кровь, желчные пигменты. В клинике часто определяют эти вещества с помощью специальных реакций. При ахлоргидрии наряду с молочной кислотой образуются летучие жирные кислоты (уксусная, масляная), т.к. под влиянием микроорганизмов в желудке развиваются процессы брожения. Кровь (кровяные пигменты) может попадать в желудочный сок при изъязвлении стенок желудка. Желчные пигменты появляются в желудке из двенадцатиперстной кишки вследствие антиперистальтики. а) Обнаружение молочной кислоты. Принцип метода и химизм реакции см. зан..№20, (с.73). Порядок выполнения работы. К 1 мл реактива Уффельмана добавить 5 кап желудочного сока, содержащего молочную кислоту. РЕЗУЛЬТАТ:
б) Бензидиновая проба на кровь. Принцип метода и химизм реакции. Реакция обусловлена способностью гемоглобина катализировать окисление бензидина перекисью водорода. Бензидин при этом окисляется в парахинондиимин и жидкость приобретает синюю окраску, а при стоянии - красную. Эта реакция очень чувствительна и служит для определения минимальных примесей крови в биологических жидкостях.
Hb Порядок выполнения работы. К 5 кап. бензидина прилить 5 кап. 3% раствора перекиси водорода и 5 кап. желудочного сока, содержащего кровь. Отметить окраску. РЕЗУЛЬТАТ:
Работа № 2. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ КИСЛОТНОСТИ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА. При определении кислотности желудочного сока различают общую кислотность, общую соляную кислоту, свободную соляную кислоту и связанную соляную кислоту. Под общей кислотностью желудочного сока понимают сумму всех кислореагирующих веществ. Принцип метода. Общую кислотность измеряют в миллилитрах 0,1 N раствора NaOH, затраченного на нейтрализацию 1000 мл желудочного сока в присутствии индикатора фенолфталеина (зона перехода 8,3-10,0; ниже 8,3 - бесцветный, выше 10,0 - красный). Содержание свободной HCl измеряют в мл 0,1 N раствора NaOH, затраченного на нейтрализацию 1000 мл желудочного сока в присутствии индикатора диметиламиноазобензола (зона перехода рН 2,9-4,0; ниже - розово-красный, выше - желтый). Соляная кислота, называемая " связанной ";, находится в солеобразном состоянии с белками и продуктами их переваривания. Определяется путём расчёта при титровании желудочного сока в присутствии двух индикаторов (диметиламиноазобензола и фенолфталеина). Общая соляная кислота - сумма свободной и связанной соляной кислоты. В норме у взрослого человека показатели кислотности колеблются в следующих пределах: общая кислотность - 40-60 ммоль/л свободная HCl - 20-40 ммоль/л связанная HCl - 10-20 ммоль/л общая HCl - 30-60 ммоль/л Порядок выполнения работы. Отмерить пипеткой в колбочку 5 мл желудочного сока, добавить 1 кап. диметиламиноазобензола и 2 кап. фенолфталеина. При наличии в желудочном соке свободной HCl он окрашивается в красный цвет с розовым оттенком, при отсутствии ее сразу появляется желтая окраска. Титровать свободную HCl 0,1 N раствором щелочи из микробюретки до появления желтовато-красного (оранжевого) окрашивания, результат зафиксировать (n1). Продолжить титрование, не добавляя щелочи в бюретку до появления лимонно-желтого цвета, результат записать (n2). Продолжить титрование до появления розового окрашивания (n3). NB! n3 > n2 > n1. Расчет: N • 1000 • 0,1 X = ------------------------,где
X - кислотность желудочного сока; n - количество щелочи, пошедшей на титрование желудочного сока. NB! n=n1 - для определения свободной соляной кислоты; n=n3 - для определения общей кислотности; n=(n2+n3):2 - для определения общей соляной кислоты. 1000 - количество мл желудочного сока для расчета; 0,1 - кол-во мг-экв щелочи в 1 мл 0,1 N р-ра в ммоль; 5 - кол-во желудочного сока, взятого для титрования в мл. РЕЗУЛЬТАТЫ:
ВЫВОД:
Клинико-диагностическое значение. При заболеваниях желудка кислотность может изменяться. При язвенной болезни желудка или гиперацидном гастрите содержание свободной HCl и общей кислотности увеличивается (гиперхлоргидрия). При гипацидном гастрите или раке желудка наблюдается уменьшение количества свободной HCl и общей кислотности (гипохлоргидрия). При раке желудка, хроническом гастрите отмечается полное отсутствие HCl и значительное снижение общей кислотности (ахлоргидрия). При злокачественном малокровии, при раке желудка наблюдается полное отсутствие HCl и пепсина (ахилия).
Работа в плане УИРС. Получить у преподавателя две пробирки с клиническим материалом. Содержимое 1-ой пробирки проанализировать на содержание патологических компонентов, а образец из 2-ой пробирки оттитровать для определения показателей кислотности желудочного сока. РЕЗУЛЬТАТЫ:
ВЫВОД:
III.2. Контрольные вопросы. Что такое желудочный сок? Каков его состав в норме? Какова роль HCl желудочного сока в пищеварении? Какие патологические компоненты можно обнаружить в желудочном соке? Какой реакцией открывают молочную кислоту? Какая проба используется для выявления крови? Чему в норме равны показатели кислотности желудочного сока? Как называются состояния изменения кислотности?
Материал для самоподготовки. а)1 с.409-431; II, III
|
