Контроль качества дезинфекции объектов больничной средыПри бактериологическом исследовании микробной обсемененности поверхности предметов и изделий медицинского назначения (приборы и аппараты медицинские, оборудование санитарно-гигиеническое, средства перемещения и перевозки, установки стоматологические, оборудование стоматологическое, зубопротезное, оториноларингологическое и т.д.) определяют наличие: 1. Стафилококков 2. БГКП 3. Синегнойной палочи (Ps.аeruginosa) 4. Сальмонеллы Отбор проб с поверхности различных объектов осуществляется методом смывов. Взятие смывов производят стерильными ватными тампонами на палочках, помещенными в стерильные пробирки. Для увлажнения тампонов в пробирки наливают по 2,0 см3 стерильной 0,1% пептонной воды. Тампоны увлажняют непосредственно перед использованием, берут смыв с объекта и погружают в раствор в той же пробирке. При контроле мелких предметов смывы проводят с поверхности всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы производят в нескольких местах исследуемого предмета с площади примерно 100 cм2. 5.5.2.1. Выявление стафилококков. Из каждой отобранной пробы производят посев 0,2-0,3 см3 смывной жидкости в пробирку, содержащую 5,0 см3 6,5 % солевого бульона. Засеянные пробирки инкубируют 24 часа при 37 оС, после чего производят высев на ЖСА или МЖСА. Посевы инкубируют 48 часов при 37 ºС. Отбирают подозрительные колонии (круглые, блестящие, выпуклые, пигментированные, с положительной и отрицательной лецитовителлазной реакцией). Подозрительные колонии (не менее 2-х) микроскопируют и пересевают в пробирки со скошенным питательным агаром и инкубируют 24 часа при 37 ºС. Идентификацию проводят по морфологическим, тинкториальным свойствам и наличию (отсутствию) плазмокоагулирующей активности. По Граму стафилококки окрашиваются положительно (фиолетово-синие кокки, располагающиеся гроздьями). Плазмокоагулирующую активность выявляют в реакции коагуляции плазмы (РКП). При выявлении только плазмокоагулирующей или только лецитовителлазной активности выделенной культуры, определяют ферментацию маннита и мальтозы в анаэробных условиях, гемолитическую активность, хлопьеобразование, образование ацетоина. При необходимости проводят фаготипирование выделенных культур, определяют чувствительность к антибиотикам, бактериофагам и дезинфектантам.
5.5.2.2. Выявление бактерий группы кишечной палочки (БГКП). Производят посев 0,2-0,3 см3 в пробирку с 5,0 см3 среды Кесслера. Через 24часа инкубирования при 37 ºС делают пересев на среду Эндо. На среде Эндо колонии БГКР — красных с металлическим блеском или без него, розовых с тёмным центром, розовых, слизистых, бледно-розовых готовят мазки, окрашивают по Граму, микроскопируют. Пересевают на среду Гисса с лактозой, инкубируют 24 часа при 37 ºС. Лактозаотрицательные колонии изучают для установления их возможной принадлежности к патогенным энтеробактериям. 5.5.2.3. Выявление синегнойной палочки.Производят высев на среду Эндо. Подозрительные колонии (с ровными, слегка волнистыми краями, гладкой блестящей поверхностью с характерным приятным запахом и пигментом (или непигментированные) пересевают на скошенный агар. Идентификацию Ps.аeruginosa производят по следующим свойствам: грамотрицательные, подвижные палочки, оксидазаположительные, растущие при 42 оС градусах, не ферментирующие глюкозу. 5.5.2.4. Обнаружение сальмонелл. По 0,2-0,3 см3 смывной жидкости засевают в пробирку с 5,0 см3 одной из сред обогащения (магниевой, селенитовой или среды Раппапорта-Вассилиадиса). После инкубирования в течение 18-20 часов при 37 ºС делают пересев на среду Эндо и висмут-сульфит агар. Затем отбирают подозрительные колонии и идентифицируют. Норматив: в 1г (см3) образца должны отсутствовать стафилококки, бактерии семейства Enterobacteriaceae и Ps.аeruginosa.
|
