Принцип и применение метода блоттинга по Саузерну.

Метод Саузерн блоттинга заключается в переносе электрофоретически разделённых фрагментов ДНК с геля на мембрану и гибридизации нуклеотидов искомой ДНК с ДНК-зондом. Метод позволяет выявить различия молекулярной массы между фрагментами ДНК.

Основные этапы:

1. Полимеризация участвков ДНК.

2. Гель-электрофорез.

3. Перенос полимеризованных участков ДНК на мембрану.

4. Гибридизация с ДНК-зондом.

 

212. Что такое фенокопии и генокопии? Приведите примеры.

Фенокопия – ненаследственное изменение фенотипа похожее на внешнее проявление мутаций. Т. е. если в поколении наблюдается один и тот же фенотипический признак несколько раз, то можно предположить, что он закреплен в генотипе. Причины возникновения: длительное воздействие случайных факторов окр. среды: радиационное излучение, экстремально высокие или низкие температуры, особенности питания и др.

ГЕНОКОПИЯ

(от ген и лат. copia — множество, запас), одинаковые изменения фенотипа, обусловленные аллелями разл.генов. Возникновение Г. следствие контроля признаков мн. генами у человека известно неск. форм рецессивной наследств, глухоты, вызываемых мутантнымиаллелями, по крайней мере, трёх аутосомных генов и одного гена в Ххромосоме. Однако в разных случаяхглухота сопровождается, напр., или пигментным ретинитом, или зобом, или аномальнойэлектрокардиограммой. Проблема Г. (как и фенокопий) особенно актуальна в мед. генетике для прогнозавозможного проявления наследств, заболеваний у потомков, если родители имеют сходные болезни илианомалии развития.

213.Митохондриальная ДНК: строение, наследование. Заболевания, связанные с митохондриальной ДНК.

Митохондриальные заболевания – это заболевания обусловленные мутациями кольцевах молекул митохондриальной ДНК (мтДНК).

Наследование связано с исключительно материнским происхождением митохондрий и мтДНК во всех клетках организма.

1. Заболевание передается от больной матери всем ее детям.

2. Сыновья и дочери больной матери поражаются в равной степени.

Передача болезни по мужской линии невозможна.

 

214. Методы и условия применения прямой ДНК – диагностики.

Прямая ДНК – диагностика предполагает непосредственное выявление мутации, являющейся непосредственной причиной заболевания. Оно облает абсолютной точностью и требует для анализа только образец ДНК обследуемого лица. Необходимо знать структуру мутантного гена.

Для проведения прямой ДНК – диагностики необходимо точно знать структуру гена или конкретного участка гена, содержащего анализируемую мутацию.

 

215.Методы прямой ДНК – диагностики.

Прямая ДНК – диагностика предполагает непосредственное выявление мутации, являющейся непосредственной причиной заболевания. Оно облает абсолютной точностью и требует для анализа только образец ДНК обследуемого лица. Необходимо знать структуру мутантного гена.

Для проведения прямой ДНК – диагностики необходимо точно знать структуру гена или конкретного участка гена, содержащего анализируемую мутацию.