З А Н Я Т И Е № 20

 

Тема: АНЕМИИ. ЭРИТРОЦИТОЗЫ

Цель занятия. Изучить классификации анемий, этиологию, патогенез, клинические проявления и методы диагностики различных видов анемий.

Задачи занятия – студент должен:

З н а т ь:

• основные виды классификаций анемий (по этиопатогенезу, цветовому показателю, типу кроветворения, степени тяжести, регенераторной способности костного мозга, размеру эритроцитов);

• этиологию и механизмы развития отдельных видов анемий, клинические проявления и механизмы их развития;

• лабораторные признаки различных видов анемий;

У м е т ь:

• определять количество эритроцитов в крови с помощью камеры Горяева;

• оценивать содержание гемоглобина в крови с помощью гемометра Сали;

• рассчитывать цветовой показатель;

• определять в мазках крови патологические формы эритроцитов;

• определять вид анемии в исследуемом мазке крови.

О з н а к о м и т ь с я:

• с современными методами диагностики анемий.

К О Н Т Р О Л Ь Н Ы Е В О П Р О С Ы

1. Показатели эритроцитов, гемоглобина у взрослых и у детей. Расчетные индексы эритроцитов.

2. Эритропоэз. Стадии эритропоэза.

3. Эритроцитозы, классификация и характеристика. Болезнь Вакеза.

4. Анемии. Характеристика общих клинических симптомов при анемиях и механизмы их развития.

5. Классификациии анемий (по этиопатогенезу, степени тяжести, типу кроветворения, цветовому показателю, регенераторной способности, размеру эритроцитов и др.).

6. Постгеморрагические анемии. Картина периферической крови при острой и хронической постгеморрагической анемиях.

7. Железодефицитные анемии. Этиология, патогенез. Железоперераспеделительные и сидероахрестические анемии. Сидеропенический синдром. Картина периферической крови.

8. Этиология и патогенез В₁₂–дефицитных (болезнь Аддисона-Бирмера) и фолиеводефицитных анемий. Картина периферической крови. Патогенез основных синдромов.

9. Гипо- и апластические анемии. Этиология, патогенез, диагностика.

10. Гемолитические анемии. Виды (приобретенные, наследственные), причины и механизмы развития. Клинические проявления. Картина периферической крови.

11. Наследственные гемолитические анемии (мембранопатии, гемоглобинопатии, энзимопатии).

12. Гемолитическая болезнь новорожденных. Этиопатогенез. Пути профилактики.

 

Таблица 2. Показатели крови взрослого человека в норме

Показатель	Значение показателя при «ручном» методе подсчета	Значение показателя при автоматическом подсчете на аппарате Hemacomp-10
Эритроциты (RBC) у женщин у мужчин	(3, 9 – 4, 7) ´ 1012 /л (4, 0 – 5, 1) ´ 1012 /л	(4, 2 – 5, 4) ´ 1012 /л (4, 6 – 6, 2)´ 1012 /л
Гемоглобин (Hb) у женщин у мужчин	120 – 140 г/л 130 – 160 г/л	120 – 160 г/л 140 – 180 г/л
Гематокрит (Hсt) у женщин у мужчин	36 – 42 % 40 – 48 %	37 – 47 % 41 – 53 %
Средний объем эритроцита (mean corpuscular volume – MCV)	80 – 100 фл (мкм3)	79 – 95 фл
Среднее содержание гемоглобина в эритроците (mean corpuscular hemoglobin – MCH)	25, 4 – 34, 6 пг	27 – 31 пг
Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (mean corpuscular hemoglobin concentration – MCHC)	30 – 38 г/дл	32 – 36 г/дл
Показатель анизоцитоза эритроцитов (red cell distribution width – RDW)	11, 5 – 14, 5 %	11, 5 – 14, 5 %
Цветовой показатель	0, 85 – 1, 05	-
Ретикулоциты	2 – 12‰	-
Лейкоциты (WBC) Нейтрофилы палочкоядерные сегментоядерные Эозинофилы Базофилы Лимфоциты Моноциты	(4– 9)´ 109 /л   1 – 6 % 47 – 72 % 0, 5 – 5 % 0 – 1 % 18 – 40 % 2 – 9 %	(4, 5 – 10, 5) ´ 109 /л 40 – 70 % – – 0, 0 – 7 % 0, 0 – 1, 5 % 19 – 48 % 3, 4 – 9 %
Тромбоциты	180 – 320 ´ 109 /л	150 – 400 ´ 109 /л

Таблица 3. Некоторые показатели системы крови у детей различного возраста (по данным А.Ф. Тура, Н.П. Шабалова, 1970; И.Тодорова, 1973; Е.Н. Мосягиной, Н.А. Торубаровой,
Е.В. Владимирской, 1981; Л.О. Жукова, 2001)

Показатель (ед. измерения)	Новорож- денный	1 мес.	1 год	5 лет	10-15 лет
Эритроциты(1012/л)	5, 7 (5, 2-6, 7)	4, 7 (4, 8-6, 0)	4, 6 (3, 9-4, 7)	4, 2 (4, 0-4, 4)	4, 5 (4, 2-4, 6)
Гемоглобин (г/л)	(185-230)	(170-210)	(110-130)	(115-130)	(120-140)
ЦП(цветовой показатель)	1, 2	1, 1	0, 8	0, 95	0, 95
Ретикулоциты (‰, промилле)	до 45	5-10	5-10	5-10	5-10
Ht (гематокрит) %
Средний диаметр эр. (мкм)	8, 12	7, 83	7, 0	7, 3	7, 36-7, 50
СОЭ(мм/ч)	2, 5	5, 0	7, 0	8, 0	8, 0
Лейкоциты(109/л)	(12-20, 5)	10, 5 (8, 5-14)	10, 5 (7-10)	8, 5 (6-10)	7, 0 (6-9)
Нейтрофилы: (%):
миелоциты	0, 5
метамиелоциты	1, 0	0, 5		0, 25
палочкоядерные	25, 0	2, 5	2, 5	2, 5	2, 5
сегментоядерные		22, 5	22, 5	42, 5	62, 5
Лимфоциты (%)	(5-55)	(20-70)	(50-65)		30-40
Моноциты (%)	15-35
Эозинофилы (%)	0, 5	2, 5 (1-7)	1-5		1-5
Базофилы (%)	0-4	0-2	0-1	0-1	0-1
Тромбоциты (109/л)	180-370	200-410	220-360	210-330	210-350

 

Расчетные индексы эритроцитов:

· средний объем эритроцита (mean corpuscular volume – MCV). В норме этот показатель составляет 80–100 мкм³ или 80-100 фл (10^{-15 л);}

MCV =

где Hct – гематокритный показатель в %,

RBC – число эритроцитов в млн. в 1 мм³ крови.

MCV < 79 фл свидетельствует о микроцитозе, а MCV > 100 фл – о макроцитозе.

 

· среднее содержание гемоглобина в эритроците, mean corpuscular hemoglobin – MCH, в норме – 25, 4-34, 6 пг (10^{-15 кг);}

MCH = ,

где Hb – количество гемоглобина в крови (г/л),

RBC – число эритроцитов в 1 л крови.

На основании величины MCH выделяют гипо-, гипер- и нормохромные анемии.

 

· средняя концентрация гемоглобина в эритроците (mean corpuscular hemoglobin concentration – MCHC), в норме cоставляет 30 – 38 %;

MCHС = ,

где Hb – количество гемоглобина в крови (г/л),

Hct – гематокритный показатель в %.

MCHC отражает абсолютное насыщение эритроцита гемоглобином. Снижение MCHC свидетельствует о нарушении синтеза гемоглобина. Повышения показателя не наблюдается.

 

· показатель анизоцитоза эритроцитов (red cell distribution width – RDW). RDW отражает различия в объеме эритроцитов, т.е. степень анизоцитоза (в норме 11, 5% – 14, 5%). В современных гематологических автоматах RDW определяется автоматически. RDW более 15, 0% указывает на присутствие гетерогенных по объему клеток (микро-, нормо-, макро- и шизоцитов). Данный показатель необходимо оценивать только параллельно с анализом размера эритроцитов и морфологическим исследованием мазка крови.

Одним из важных расчетных показателей является цветовой показатель (см. ниже).

 

 

Таблица 4. Классификация анемий (по Литвицкому П.Ф., 1997 с дополнениями)

 

Критерии	Классификация
по причине	· первичные (наследственные, врожденные) · вторичные (приобретенные)
по этиопатогенезу	· постгеморрагические · дизэритропоэтические · гемолитические
по типу эритропоэза	· нормобластические · мегалобластические
по размеру эритроцитов	· нормоцитарные (≈ 7, 1 - 7, 9 мкм) · микроцитарные (< 7, 1 мкм) · макроцитарные (> 7, 9 мкм) · мегалоцитарные (> 12 мкм)
по цветовому показателю (ЦП)	· нормохромные (ЦП = 0, 85-1, 05) · гипохромные (ЦП < 0, 85) · гиперхромные (ЦП > 1, 05)
по способности костного мозга к регенерации (по числу ретикулоцитов)	· регенераторные (Rt до 5 %) · гиперрегенераторные (> 5 %) · гипо- и арегенераторные (< 0, 2 %)
по течению	· острые · подострые · хронические
по степени тяжести	· легкой степени (Hb 120-90г/л, Эр– не ниже 3, 0´ 1012/л) · средней степени (Hb 90-70г/л, Эр– не ниже 2, 5´ 1012/л) · тяжелой степени (Hb < 70 г/л, Эр – ниже 2, 5´ 1012/л)

 

 

Эритроцит	Листоподобная клетка (акантоцит)	Слезоподобная клетка (дакриоцит)	Мегалоциты
Ретикулоцит	Овалоцит, или эллиптоцит	Тельце Жолли	Стоматоциты
Макроцит	Мишеневидная клетка (кодоцит)	Анизоцитоз	Каскообразная клетка (шистоцит)
Макроовалоцит	Серповидная клетка (дрепаноцит)	Кольца Кебота	Листоподобная клетка (акантоцит)
Микроцит	Микросфероциты	Включения при малярии	Ортохро матофильный нормоцит
Зубчатая клетка (эхиноцит)	Монетные столбики	Тельца Гейнца	Базафильная пунктуация эритроцитов

 

Рис. 2. Качественные изменения эритроцитов

 

П Р А К Т И Ч Е С К И Е Р А Б О Т Ы

РАБОТА 1. Подсчет количества эритроцитов у кролика после острой кровопотери.

У кролика производим однократное кровопускание 20% от ОЦК. Через несколько суток после кровопотери берем кровь из краевой вены уха для исследования.

Ход работы: В пробирку с помощью автоматической пипетки набираем 4 мл 3% NaCI и 20 мкл крови. После перемешивания для подсчета количества эритроцитов заполняем камеру Горяева с притертым предварительно покровным стеклом.

Разведение крови для подсчета эритроцитов можно осуществлять в меланжере для этого до метки 0, 5 набираем кровь. Разводим 3% раствором NaCl до метки 101 (разведение в 200 раз). Смеситель интенсивно встряхиваем 5 минут, после чего первые 2 капли раствора выпускаем на ватный шарик и заполняем камеру Горяева.

Под малым увеличением микроскопа подсчитываем количество эритроцитов в 5 больших квадратах, разделенных на 16 маленьких, по диагонали сетки Горяева.

 

 

 

Расчет содержания эритроцитов производим по формуле:

 

 

 

X – содержание эритроцитов в 1 л крови,

А – сумма эритроцитов в 5 квадратах,

200 – разведение крови в меланжере,

(4000 и 80) – параметры камеры Горяева.

 

После сокращения показателей:

 

Х = А х 10¹⁰/л

РАБОТА 2. Определение содержания гемоглобина по методу Сали.

Ход работы: в градуированную пробирку гемометра Сали до нижней круговой метки наливаем пипеткой 0, 1 N р-р HCl. Сухой капиллярной пипеткой набираем 20 мкл крови, вытираем наружную поверхность пипетки и осторожно выдуваем кровь в градуированную пробирку. Пипетку несколько раз промываем HCl из верхнего прозрачного слоя. Смесь хорошо перемешиваем и оставляем на 5 минут. Затем осторожно (перемешивая) добавляем дистиллированную воду до достижения одинаковой интенсивности окраски раствора со стандартом. По шкале пробирки определяем содержание гемоглобина в исследуемой крови.

Определение гемоглобина крови гемоглобинцианидным методом

Принцип метода. Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием (красная кровяная соль) окисляется в метгемоглобин (гемоглобин), образующий с ацетонциангидрином окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна количеству гемоглобина.

Оборудование: фотоколориметр, или спектрофотометр.

Посуда: пипетки на 0, 02 мл и 5, 0 мл, пробирки