Порядок проведения работы. 1 В чистый сухой жиромер для молока отмерить автоматической пи­петкой 10 мл серной кислоты плотностью от 1,81 до 1,82 г/см3

1 В чистый сухой жиромер для молока отмерить автоматической пи­петкой 10 мл серной кислоты плотностью от 1, 81 до 1, 82 г/см³. Серная ки­слота плотностью выше или ниже указанной к определению жира непригод­на. При плотности выше 1, 82 г/см³ кислота вызывает обугливание белковых веществ и молочного сахара; образующиеся при этом черные комочки и ши­рокая полоска располагаются на границе жирового слоя и мешают отсчету жира. При плотности кислоты ниже 1, 81 г/см³ белковая оболочка частью ос­тается неразрушенной и не происходит полного и отчетливого выделения жира.

2. По внутренней стенке жиромера влить пипеткой 10, 77 мл хорошо размешанного молока. Молоко вливать в жиромер осторожно, чтобы оно не смешивалось с серной кислотой. Кончик пипетки не должен касаться серной кислоты, так как в этом случае молоко в нем свернется, образуя пробку, что затрудняет дальнейшее его вытекание. Так как объем пипетки рассчитан на свободное вытекание молока, выдувать его из пипетки не следует. Нельзя пользоваться пипеткой с отбитым кончиком, так как ее объем меньше 10, 77 мл.

3. В жиромер с молоком, стараясь не смочить горлышко, отмерить автоматической пипеткой 1 мл изоамилового спирта. Смачивание в последующем приводит к выскакиванию пробки. Добавление большего количества спирта не допускается, так как растворимость. Его невелика (1: 35) и избыток может перейти в жировую фракцию, увеличивая ее объем.

4. Заполненный жиромер закрыть резиновой пробкой. Для этого с помощью полотенца или тряпки взять жиромер левой рукой за расширенную часть (не за шкалу) и вращательным движением ввести пробку в горлышко до соприкосновения с поверхностью спирта. Жиромер поверх пробки обернуть полотенцем или тряпкой и, придерживая указательным пальцем пробку, встряхнуть содержимое до полного растворения белка. Затем жиромер перевернуть от 2 до 3 раз, чтобы кислота из узкой части прибора полностью смешалась со всем раствором.

5. Проверить степень заполнения жиромера компонентами и при необходимости добавить в него 1-2 мл кислоты (но не воды!).

6. Поставить жиромер пробкой вниз в водяную баню на 5 минут при температуре (65±2) °С. При такой температуре молочный жир находится в расплавленном состоянии и занимает истинный объем. Подогревание облегчает отделение жира при центрифугировании. Вода в бане должна находиться выше слоя жидкости в жиромерах.

Если анализируется только одна - две пробы или жиромеры встряхи­ваются одновременно в специальном штативе, то предварительное подогре­вание можно отпустить.

7. После подогрева жиромер вынуть из водяной бани и, вытерев его, вставить в патрон центрифуги узкой частью вытерев его, вставить в патрон центрифуги, жиромеры расположить в ней симметрично. При нечетном количестве жиромеров добавить жиромер, заполненной водой.

8. Привинтить крышку центрифуги и вращать в течение 5 мин со скоростью 1000 об/мин.

Отсчет времени начать с того момента, когда центрифуга наберет нужное число оборотов. При сокращении времени центрифугирования и за­медленном вращении центрифуги жир выделяется не полностью, и результат может быть занижен.

9. По окончании центрифугирования поставить жиромер на 5 мин в водяную баню пробкой вниз. Жиромер должен быть покрыт водой выше жирового слоя. Водяная баня должна иметь температуру (65±2) °С.

10. Вынуть жиромер из бани, вытереть его и быстро произвести от­счет жира. Для этого взять жиромер в левую руку (вертикально) таким обра­зом, чтобы граница жира находилась на уровне глаза, а правой рукой изме­нять положение пробки (ввинтить или вывинтить), пока нижняя граница столбика жира не совпадает с ближайшим целым делением шкалы. За верх­нюю границу столбика жира принимается нижний край мениска.

Отсчитать количество делений, занимаемых столбиком жира. Боль­шие деления школы с цифрой соответствуют целым, малые - десятым долям процента жира. Расхождения между показателями жиромера при параллель­ных определениях допускаются не более 0, 1 %.

В случае нечеткого отделения столбика жира необходимо жиромер, после чего произвести отсчет количества делений выделившегося жира.

При работе с серной кислотой проявлять особую осторожность и соблюдать следующие правила:

а) наполнять жиромер следует в строго указанной последовательности: кислота - молоко - спирт. Если в жиромер влить сначала молоко, а потом серную кислоту, то в узкой части прибора образуется пробка свернувшихся белков и анализ придается повторить. Если же смешать спирт с кислотой, то образуется ряд нерастворимых соединений, искажающих результат анализа;

б) поскольку смешивание крепкой кислоты и молока приводит к сильному нагреванию жидкости, жиромер следует предварительно укрепить в штативе и заполнять кислотой только над кюветами;

в) если при заполнении жиромера горлышко оказалось смоченным серной кислотой, то для нейтрализации кислоты пробку с поверхности надо покрыть мелом (продольными штрихами) и только после этого закрыть жиромер пробкой;

г) содержимое жиромера встряхивать только при закрытой пробке. Предварительно завернув его в полотенце или тряпку. При этом отверстие жиромера направлять в сторону от себя и окружающих;

д) после окончания определения жира содержимое жиромера тщательно перемешать и вылить в еще теплом состоянии в специально предназначенные склянки с этикетками (но не в раковину!);

е) в случае попадания кислоты на кожу немедленно промыть пораженное место водой, а затем 3 % раствором двууглекислой соды.

Определение качества и плотности серной кислоты Серная кислота, применяемая при определении жира в молоке, долж­на быть прозрачной и не содержать примесей. Допускается слабое окрашива­ние ее в буроватый цвет. Для проверки ее качества в жиромер налить 11 мл исследуемой кислоты и 11 мл воды. Жиромер закрыть пробкой, взболтать содержимое и центрифугировать 5 мин, при 100 об/мин. Затем выдержать 5 мин жиромер в воде при (65±2) °С после чего повторить чего повторить цен­трифугирование. Если при этом на поверхности смеси в узкой части жироме­ра не выделится жироподобной слой, кислота пригодна для работы. Плот­ность серной кислоты определяется ареометром, имеющим шкалу с делениями от 1, 40 до 1, 85. При отсутствии ареометра плотность кислоты можно оп­ределить весовым способом, а именно: на технохимических весах отвесить с точностью до 0, 01 г чистую сухую мерную колбу определенной емкости (от 50 до 100 мл), заполнить ее до метки дистиллированной водой при 20 °С и снова взвесить. Вылить воду, колбу ополоснуть проверяемой кислотой, за­полнить кислотой до метки также при 20 °С и взвесить. Рассчитать плотность кислоты по формуле:

П=

де а - вес чистой сухой колбы, г;

б - вес колбы с водой, г;

в - вес колбы с серной кислотой, г;

П - плотность кислоты при 20°, г/см³;

0, 999823- постоянная величина.

Чтобы получить серную кислоту нужной концентрации, можно вос­пользоваться таблицей 1.

Таблица 1.

Разведение серной кислоты

Плотность разбавляемой кислоты, г/см3	Количество мл воды, требующейся на 1 л кислоты плотностью 1, 82, г/см3
1, 840 1, 837 1, 835 1, 831 1, 825	113 85 69 46 19

 

 

Разбавлять серную кислоту водой нужно очень осторожно, в тонко­стенной стеклянной посуде, так как соединение воды с кислотой сопровож­дается выделением тепла, и посуда из толстого стекла, может лопнуть. При разбавлении нужно кислоту осторожно по стенке сосуда вливать небольши­ми порциями в воду (нельзя вливать воду в кислоту), перемешивая содер­жимое колбы кругообразными движениями. В стакане смесь размешивают стеклянной палочкой.