Ферменты в клинической диагностике

Об эффективности и надежности диагностики с использованием фермен­тативных тестов можно судить по их чувствительности и специфичности. Чув­ствительность теста определяется достоверным отличием ферментативной ак­тивности в норме и при заболевании. Специфичность ферментативного ана­лиза считается хорошей, если достоверное изменение ферментативной актив­ности имеет место только при одном патологическом процессе.

Чаще всего в качестве диагностических и прогностических тестов приме­няют ферменты, циркулирующие в плазме крови. Ферменты, воздействующие на соответствующие субстраты и выполняющие специфические физиологиче­ские функции, называются функциональными ферментами. Кроме того, в кровь могут попадать внутриклеточные ферменты, что указывает на деструкцию тка­ней и клеток в результате какого-либо патологического процесса. Анализ та­ких ферментов наиболее важен для лабораторной диагностики, так как их по­явление в крови не только указывает на наличие патологического процесса, но и дает возможность определять орган, подверженный деструкции. Например, имеется три молекулярных формы альдолазы, локализованных в различных органах животного организма: А-форма — в мышцах, В-форма — в печени и С-форма — в ткани мозга. Появление в крови избыточного количества той или иной формы альдолазы дает возможность идентифицировать больной ор­ган и определять степень деструкции его клеток.

Появление в крови большого количества а-амилазы или липазы свиде­тельствует о наличии острого панкреатита, а лактатдегидрогеназы — инфаркта миокарда. Увеличение в сыворотке крови активности кислой фосфатазы од­нозначно указывает на наличие рака предстательной железы, а повышенное содержание церулоплазмина связано с наследственной патологией — гепато-лентикулярной дегенерацией.

Специфичность ферментативных тестов можно значительно повысить, про­водя анализ не общей ферментативной активности, а отдельных молекулярных форм или изоэнзимов. Для этого применяют такие методики, как электрофо­рез, ионообменную или гель-распределительную хроматографию, изоэлектри-ческое фокусирование. Еще одним методом анализа изоферментов может слу­жить использование специфических к изоферменту антител. Этот метод обла­дает высокой чувствительностью и может быть легко автоматизирован. В по­следние годы получила распространение диагностика наследственных заболеваний при помощи рекомбинантных ДНК и метода полимеразной цеп­ной реакции. В этой технологии большую роль играют ферменты рестриктазы.