Примеры. 1) Необходимо определить бензол и толуол в сточной воде.

1) Необходимо определить бензол и толуол в сточной воде.

После их экстракции из воды органическим растворителем (например, хлороформом) определяют вещества ОФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза – силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрила или метанола с водой. Детектор – спектрофотометрический. Можно провести определение и НФ ВЭЖХ. В данном случае неподвижная фаза – силикагель, подвижная фаза – гексан с добавкой изопропанола. Детектор – спектрофотометрический. Эту задачу можно решить и газовой хроматографией.

2) Необходимо определить фенол и хлорфенолы в воде.

Используют ОФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрила или метанола с водой, содержащей добавку кислоты для подавления ионизации фенолов. Детектор – амперометрический, флуоресцентный, спектрофотометрический, МС. Можно использовать НФ ВЭЖХ. В данном случае неподвижная фаза – силикагель, подвижная фаза – смесь гексана, хлороформа и изопропанола. Детектор –спектрофотометрический, флуоресцентный.

3) Стоит задача разделения нафталина, антрацена и пирена. Укажите два хроматографических метода, которые позволят это сделать.

Используем метод ОФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрил - вода. Второй метод - НФ ВЭЖХ. В данном случае неподвижная фаза – силикагель, подвижная фаза – гексан с добавкой изопропанола. Детектор – флуоресцентный, спектрофотометрический.

4) Необходимо определить бензойную и салициловую кислоты, которые используются как консерванты в пищевой промышленности.

Используем метод ОФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрил - фосфатный буферный раствор. Можно использовать также метод ИП ОФ ВЭЖХ, в подвижную фазу необходимо ввести добавку гидрофобного катиона, например, бромида тетрабутиламмония. Можно использовать и ион-эксклюзионную хроматографию. Детектор – спектрофотометрический.

5) В кормах для животных необходимо определять содержание важнейших аминокислот (триптофана, фенилаланина, тирозина). Какие хроматографические методы (не меньше двух) Вы будете использовать для решения такой задачи?

Используем метод ИХ. Аминокислоты можно разделять на анионообменнике в виде комплексов с медью при элюировании буферным раствором с рН 8, либо в форме катионов, подвижная фаза – буферные растворы с рН < 7. Детектор спектрофотометрический. После получения более гидрофобных производных (например, с орто-фталевым альдегидом) можно использовать ОФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрил - фосфатный буферный раствор. Детектор – спектрофотометрический, флуориметрический, масс-спектрометрический. Ранее описано разделение и определение аминокислот ТСХ.

6) Образцы почвы могут быть загрязнены гидразинами. Какие хроматографические методы можно использовать для определения гидразинов в водной почвенной вытяжке.

Для разделения и определения гидразинов используют методы ИХ или ион-парной хроматографии. В ИХ неподвижная фаза – катионообменник, подвижная фаза – буферный раствор с рН < 7 (например раствор ацетата аммония). Детектор – амперометрический, кондуктометрический. В ион-парной ОФ ВЭЖХ неподвижная фаза - силикагель с привитыми группами С18, подвижная фаза смесь ацетонитрил - буферный раствор с добавкой додецилсульфата натрия. После получения производных можно использовать ОФ ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектором, а также ГХ с масс-спектрометрическим детектором

7) Средство от головной боли - цитрамон содержит аспирин, кофеин и парацетамол.

кофеин

парацетамол

 

Какие варианты хроматографии можно использовать для анализа этого продукта?

Для решения этой задачи можно использовать ОФ и НФ ВЭЖХ. Возможные неподвижные фазы см. пример 2. Детектор – спектрофотометрический, МС.

8) Каким методом можно разделить водорастворимые витамины.

На практике используют ОФ ВЭЖХ в градиентном режиме. Возможные неподвижную и подвижную фазы см. пример 2. Детектор – спектрофотометрический, МС.

9) Какими хроматографическими методами определяют углеводы.

На практике используют НФ ВЭЖХ. Неподвижная фаза – аминосиликагель, подвижная фаза – ацетонитрил с невысоким содержанием воды. Детектор – рефрактометрический. Можно использовать ТСХ на полярных сорбентах (силикагеле и др.), в качестве подвижной фазы используют многокомпонентные смеси полярных растворителей и воды. Для обнаружения пятен хроматограмму обрабатывают специальными реагентами, самый простой – серная кислота. Для разделения сахаров применяют также ион-эксклюзионную, лигандообменную жидкостную хроматографию.

10) При производстве алкогольной продукции в воде определяют содержание катионов (натрий, кальций магний). Какой хроматографический метод Вы будете использовать для решения такой задачи?

Используют ионную двухколоночную хроматографию, разделение проводят на сильнокислотном катионообменнике, подвижная фаза – n∙10^{-3 М раствор азотной или соляной кислоты. Детектор – кондуктометрический.}