Пример решения задачи по теме: «Группа ядовитых и сильнодействующих веществ, изолируемых методами экстракции и сорбции полярными растворителями. Лекарственные вещества».Миша М., 4 лет поступил в С. Петербургскую педиатрическую академию в 22 ч 23.08.11 г. через 8 ч после того как съел несколько таблеток покрытых оболочкой. При осмотре ребенка состояние тяжелое: сознание резко угнетено, на вопросы не отвечает, реакция на болевые ощущения ослаблена. Произведено: промывание желудка, внутривенное введение раствора глюкозы 10%, с физиологическим раствором содержащим карбоксилазу и витамины В1, В2. Предварительный анализ мочи с реактивом FPN наблюдается розовое окрашивание, при добавлении раствора железа(III) хлорида розовато-лиловое. Решение задачи Исходя из обстоятельств дела и предварительных испытаний, можно предположить отравление производными фенотиазина. Объектом исследования является моча, кровь и промывные воды желудка ребенка. Изолирование из мочи и промывных вод следует проводит методом прямой жидкость-жидкостной экстракции органическим растворителем (например хлороформом) при селективных для фенотиазинов значениях рН среды 12, (т.к. они являются относительно других лекарственных веществ более сильными основаниями). Для разрушения водорастворимых метаболитов и увеличения степени экстракции можно провести кислотный гидролиз: мочу подкисляют 25 % кислотой серной до рН-2-3, нагревают на кипящей водяной бане 5 мин, охлаждают и далее поступают как описано выше Для максимального изолирование из мочи возможно применение ферментативного гидролиза β-глюкуронидазой/арилсульфатазой. Изолирование из крови проводят следующим образом: к 5 мл крови добавляют этанол, подкисленный 10 % спиртовым раствором кислоты щавелевой до рН-2-3, нагревают 10 мин на водяной бане (образуются хорошо растворимые в этаноле оксалаты), жидкость охлаждают, спиртовое извлечение сливают, выпаривают досуха, сухой остаток растворяют в горячей воде, подщелачивают и извлекают органическим растворителем. Обнаружение: 1) Предварительные испытания – моча с реактивом ФПН (FPN – растворы кислоты азотной, хлорной и 5 % хлорид железа (III)) – синий, сине-фиолетовый цвет (за счет окраски мочи и продуктов метаболизма). 2) Общеалкалоидные реактивы, например реактив Драгендорфа – аморфные бурые, буро-коричневые осадки – реакция имеет отрицательное судебно-химическое значение. 3) С цветными реактивами (серная концентрированная кислота, азотная концентрированная кислота, Марки, Фреде, Манделина, Эрдмана, 5 % хлорид железа (III)) каждое вещество обладает своей характерной окрашивание, которая не изменяется в зависимости от реактива. Исходя из условий реакции в данном случае обнаружен аминазин. Полученные продукты окисления имеют характерные максимумы поглощения в видимой области спектра 500 – 600 нм (в зависимости от окраски). 4) Микрокристаллическая реакция: аминализ – образование кристаллов характерной формы с 5% раствором золотохлористоводородной кислотой – темно-красный аморфный осадок при стоянии (15-20 мин) переходящий в кристаллический. 5) ТСХ:пластинки Силуфол, Сорбфил; вещества сравнении – аминазин, левомепромазин, тиоридазин, дипразин. Системы: бензол: диоксан: 25% раствор аммония гидроксида (60:35:5) или этанол: 25% раствор аммония гидроксида (100:1) Проявители: · кислота серная концентрированная в этаноле, · раствор железа (III) хлорид 5 %, · раствор кислоты хлорной концентрированной, содержащая 3% раствора натрия нитрита 0,5 % – пятна характерного цвета. · На уровне пятна метчика аминазина наблюдали окрашенное пятно в извлечении. СФМ: сухой остаток аликвоты хлороформного извлечения растворяют в 0,1 М кислоте серной или этаноле и записывают спектр в УФ области, характерно наличие двух полос поглощения в области 250-260 нм и 300-315 нм, спектр соли совпадает со спектром основания аминазина. Примеси метаболитов (сульфоксидов) можно определить по наличию 4 максимумов – 230, 265, 285 и 400 нм. Метаболиты, мешающие проведению спектрофотомерии, удаляют методом ТСХ очистки. Аминазин в р-ре кислоты серной 0,1 М – 255 и 307 нм (сульфоксид – 230, 265, 285 и 400 нм) Дипразин в р-ре кислоты хлористоводородной 0,1 М 249 и 300 нм Тиоридазин в р-ре кислоты хлористоводородной 0,1 М 251 и 310 нм Количественное определение: 1) СФМ в УФ области для нативной молекулы; 2) ФЭК - для окрашенных продуктов окисления после взаимодействия с цветными реактивами, область 500-600 нм, в зависимости от окраски продуктов. Расчет ведут по сравнению с раствором РСО.
|
