А н я т и е 27. ВЗЯТИЕ КРОВИ, ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЕЕ ФИЗИЧЕСКИХ СВОЙСТВ

Цель занятия. Освоить технику взятия крови, научиться определять время ее свертывания, вязкость и скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Объекты исследования и оборудование. Коровы, лошади, свиньи, собаки, овцы.

Иглы для взятия крови, ножницы, стерилизатор, глазные пипетки, предмет­ные и часовые стекла, темные флаконы с рабочими стандартными растворами сульфата меди, цитрата натрия, трилон Б, гепарин, спирт, эфир, 5%-й спиртовой раствор йода, вата, аппараты Панченкова, эритроседиометр, вискозиметр ВК-4.

Взятие крови. Кровь для исследований лучше брать у животных утром до кормления.

В малых количествах кровь получают из мелких кровеносных сосудов уха; у пушных зверей — из лапки (пальца), кончика хвос­та; у кур — из гребня или сережек; у гусей и уток — из ступни ко­нечностей; у мышей — из хвоста.

В больших количествах кровь у крупного рогатого скота, лоша­дей, овец, коз, верблюдов, буйволов, яков, оленей берут из ярем­ной вены; у свиней — из хвоста (отрезают его кончик или пересе­кают кровеносные сосуды на вентральной поверхности хвоста), из глазного венозного синуса, крупных сосудов уха или краниальной полой вены; у собак — из вены сафена или подкожной вены пред­плечья; у песцов и лисиц — из плантарной вены, у кроликов — из ушной вены; у морских свинок — из сердца; у кур — из кожной локтевой вены, плечевой артерии на внутренней поверхности

 

крыла или из сердца; у рыб — из хвос­товой артерии. Место взятия крови выс­тригают, кожу дезинфицируют спиртом или спирт-эфиром.

При взятии капиллярной крови ис­пользуют иглу Франка, перо Джаннера, копьевидное перо или инъекционную иг­лу. Первую каплю крови удаляют, а сле­дующую берут для анализа. При взятии крови из яремной вены используют кро­вопускательные иглы (Боброва, Каспера, Сайковича, Афанасьева и др.) (рис. 7.1). Вену предварительно пережимают ниже

Й(г| Ң W Д места прокола (на переходе верхней тре-

3 4 5 6 Иглы для взятия крови:

Рис. 7.1.

jj _s < ц^ Н (J Jj. ™ ^{шеи в} среднюю) большим пальцем ле­вой руки, резиновым жгутом, специаль­ными щипцами или с помощью других приспособлений.

-Афанасьева; 2...S— Боброва; 6— инъекционная

Получение плазмы. В кровь, чтобы она не свертывалась, добавляют антикоагу­лянты: из расчета на 10 мл крови — 30 мг цитрата натрия или калия, 15 мг оксалата натрия, 30 мг фторида натрия, 50 ЕД гепарина или 0, 2 мл 10%-го раствора трилона Б. Затем стабилизированную кровь центрифугируют 10 мин при 3000 мин^-1, после чего плазму отбирают пипеткой, оставляя на дне пробирки форменные элементы.

Получение сыворотки. Кровь собирают в пробирки без анти­коагулянта, выдерживают несколько часов при комнатной тем­пературе или помещают на 0, 5...1, 0ч в термостат. Свернувшуюся кровь отделяют от стенки пробирки стеклянной палочкой. В за­ключение пробирку центрифугируют 10 мин при 3000 мин^-1 и отделившуюся сыворотку отбирают пипеткой.

Определение физических свойств крови. В клинической практи­ке чаще определяют время свертывания крови, ее вязкость и ско­рость оседания эритроцитов.

Определение времени свертывания крови. Как правило, исполь­зуют методы Ли—Уайта и Бюркера.

Метод Л и—У а й т а: каплю свежевзятой крови помещают на предметное стекло, которое каждые Юс наклоняют. Момент, когда капля при наклоне стекла не будет менять свою форму, со­ответствует началу свертывания крови.

Метод Бюркера: на парафинированное предметное или ча­совое стекло помещают каплю нативной крови и затем каждые 30 с пытаются оторвать ее от стекла с помощью иглы скарификатора или инъекционной иглы. Появление первых непрочных нитей фибрина соответствует началу свертывания, а момент, когда за нить фибрина удается оторвать кровяной сгусток от стекла, — концу свертывания.

На время свертывания крови оказывают влияние многие фак­торы (температура среды, способ получения крови, размер и фор­ма сгустка и др.), что необходимо учитывать при исследовании этого показателя.

У здоровых животных значения показателя следующие (мин): крупный рогатый скот 6, 0...9, 0; овцы 2, 0...3, 0; лошади 10, 0...13, 0; свиньи 3, 0...4, 0; собаки 2, 0...3, 0; куры 3, 0...5, 0.

Ускоренную свертываемость крови отмечают при гемоглоби-немии, крупозной пневмонии; замедленную — при анемиях, ге­мофилии, лейкемии, холемии, нефрите, геморрагических диа­тезах, скорбуте. Кровь совершенно не свертывается при сибир­ской язве, удушье.

Определение вязкости крови. Вязкость — один из главных пока­зателей, характеризующих реологические свойства крови; отража­ет внутреннее сцепление плазмы, обусловленное клеточным со­ставом и веществами, в ней находящимися. Вязкость крови опре­деляют с помощью вискозиметра ВК-4 (рис. 7.2).

Капиллярную трубку вискозиметра, снабженную краном, за­полняют стабилизированной кровью до метки «0», а вторую труб­ку до аналогичной метки — дистиллированной водой. Вискози­метр укладывают горизонтально на стол и открывают кран. Через мундштук осторожно всасывают воздух так, чтобы столбик крови продвинулся до отметки «1», при этом вода тоже будет двигаться по капилляру. Если столбик воды достигнет отметки 5, а столбик крови — 1, то коэффициент вязкости составит 5.

У здоровых животных коэффициенты вязкости следующие: у крупного рогатого скота 4, 2...5, 2; овец 4, 2...5, 0; лошадей 3, 9...4, 8; свиней 4, 8...6, 2; собак 4, 7...5, 5; кур 4, 5...5, 5.

Повышение вязкости крови наблюдают при потении, венозных застоях, острых экссуда-тивных процессах и при патологиях, приводя­щих к обезвоживанию организма. Понижение вязкости крови характерно для анемий.

Определение скорости оседания эритроци­тов (СОЭ). В ветеринарной практике исполь­зуют методы Неводова и Панченкова.

Метод Т. Г. Па н ч е н к о в а: в градуи­рованный на 100 делений капилляр Панченко­ва набирают до метки «Р» (деление 50) 5%-й раствор цитрата натрия и переносят его на ча­совое стекло. Затем в этот же капилляр наби­рают дважды кровь до метки «К» (деление 0) и

Рис. 7.2. Вискозиметр ВК-4:

/ — капилляр для заполнения водой; 2— капилляр для заполне­ния кровью; 3 — краник; 4— мундштук; 5— открытый конец

 

оба раза выдувают ее на часовое стекло. Кровь, тщательно переме­шанную с раствором цитрата натрия, вновь набирают в капилляр до метки «К». Капилляр ставят в штатив строго вертикально. СОЭ учитывают через 1 ч, при необходимости через 24 ч и выражают в миллиметрах.

У здоровых животных СОЭ составляет (мм): у крупного рогато­го скота 0, 5...1, 5; овец 0, 5...1, 0; коз 0, 3...1, 0; лошадей 40...70; сви­ней 2...9; собак 2...6; кур 2...3.

Метод А. П. Не водов а: в эритроседиометр — пробирку, градуированную на 100 делений, — вносят на кончике скальпеля около 0, 02 г оксалата натрия, затем кровь из вены до метки «0». Пробирку закрывают резиновой пробкой, осторожно переворачи­вают 5...10 раз, смешивая кровь с антикоагулянтом, и ставят в штатив. СОЭ учитывают по высоте столбика плазмы через 15, 30, 45, 60 мин и при необходимости через 24 ч (табл. 7.1).