Студопедия Главная Случайная страница Задать вопрос

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Ход работы. 10 г дрожжей смешивают в ступке с 7 г песка и тщательно растирают, приливая небольшими порциями 40 мл 0,4%-ного раствор гидроксида натрия





10 г дрожжей смешивают в ступке с 7 г песка и тщательно растирают, приливая небольшими порциями 40 мл 0,4%-ного раствор гидроксида натрия. Растирание продолжают в течение 15 минут. После этого осадок отделяют путем центрифугирования (3 минуты при 3000 обмин). Центрифугат сливают в стакан и к нему добавляют небольшими порциями (по 0,5 мл) 10%-ную уксусную кислоту до слабокислой реакции по лакмусу (5 - 6 мл). Полученный осадок нуклеопротеинов отделяют центрифугированием (5 минут при 5000 обмин).

Гидролиз нуклеопротеинов. В колбу для гидролиза (с обратным воздушным холодильником) помещают осадок нуклеопротеинов и 10 мл 10%-ного раствора серной кислоты. Колбу закрывают пробкой с проходящим через нее воздушным холодильником (трубка длиной 70 см и диаметром 0,7 - 0,8 см) и смесь кипятят на сетке в течение 1 ч, поддерживая слабое кипение. Гидролизат отфильтровывают и в прозрачном растворе определяют наличие белков, пентозы, пуриновых оснований и фосфорной кислоты.

Белки обнаруживают по биуретовой реакции (см. работу 2).

Пентозу – по реакции с орцином. К 1 мл гидролизата добавляют 1 мл орцинового реактива и 1 мл концентрированной соляной кислоты, нагревают до кипения. Появляется зеленое окрашивание.

При нагревании с 20%-ной соляной кислотой рибоза дегидратируется и превращается в фурфурол:

 

 

Последний конденсируется с орцином с образованием окрашенных соединений. Дезоксирибоза не дает этой реакции.

Пуриновые основания обнаруживают по их реакции с аммиачным раствором оксида серебра. К 2 мл гидролизата приливают по каплям крепкий раствор аммиака до щелочной реакции по лакмусу и добавляют равный объем аммиачного раствора оксида серебра. Постепенно образуется осадок серебрянных солей пуриновых оснований.

Фосфорную кислоту обнаруживают с помощью молибдата аммония. К 2 мл раствора молибдата аммония в азотной кислоте прибавляют 1 мл испытуемого раствора. Смесь слегка нагревают. Образуется желто-зеленый осадок молибдата аммония:

12 (NH4)2MoO4 + H3PO4 + 21HNO3 ® (NH4)3PO4´12MoO3 +
+ 21NH4NO3 + 12 H2O.

 

Работа 5. Качественные реакции
на присутствие ферментов

Оборудование и реактивы: ступка с пестиком, пробирки химические, баня водяная, пипетки на 1, 2 и 5 мл, воронка Бюхнера, терка, пероксид водорода (0,5%-ный и 2%-ный), пирогаллол (1%-ный), тирозин (насыщенный), марля, пластинка стеклянная, колба коническая на 100 мл, цилиндр мерный на 50 мл, 1%-ный раствор мочевины и тиомочевины, 0,02%-ный раствор спиртовой фенолфта-леина, клейстер крахмальный (1%-ный), йод (1%-ный) в йодиде калия (3%-ном), фелингова жидкость.

Материалы: картофель сырой, арбузные семечки, разбавленная слюна (рот ополаскивают 2-3 раза водой для удаления остатков пищи, отмеряют цилиндром 50 мл дистиллированной воды и ополаскивают ею рот в течение 3 - 5 мин. в несколько приемов. Собранную жидкость - примерно 50 - 60 мл - фильтруют через вату и фильтрат используют для работы).






Дата добавления: 2014-10-22; просмотров: 329. Нарушение авторских прав

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2017 год . (0.005 сек.) русская версия | украинская версия