Правила работы с микроскопом

1. Установка микроскопа на рабочем месте является важным условием успешной работы. Микроскоп следует поставить, ориен­тируя его для наблюдения левым глазом, на расстоянии около 3 см от края стола.

2. Перед работой необходимо протереть все внешние части микро­скопа, не вынимая окуляр.

3. Для обеспечения максимального движения предметного столика (и препарата) перед началом работы с микроскопом следует центрировать предметный столик, т.е. движением винтов привести его в положение,

при котором линза конденсора располагается точно посередине отвер­стия предметного столика. Центрировать предметный столик нужно и в процессе работы, и после ее окончания.

4. Освещение поля зрения проводится следующим образом. При изучении зоологических подвижных объектов лучше использовать вогнутое зеркало, предварительно подняв конденсор вверх до упора. Наилучшее освещение дает рассеянный дневной свет, но можно ис­пользовать и другие источники света. Следует помнить, что нежела­тельно слишком яркое и с бликами освещение поля зрения, беспокоящее живые объекты и опасное для зрения исследователя. Поле зрения долж­но быть освещено равномерно. При обнаружении в нем темных зон следует проверить положение револьвера и частей конденсора. При изучении прозрачных или бесцветных объектов поле зрения следует притенить, прикрыв диафрагму или опустив конденсор. При рассмо­трении темных, интенсивно окрашенных объектов, диафрагму нуж­но открыть.

5. Фокусировка изображения. Используя постоянный или изго­товив временный препарат, помещают его на предметный столик.

Начинать работу нужно с изучения объекта при малом увеличе­нии, поэтому, приступая к работе и закончив ее, следует поставить микроскоп на малое увеличение. Понять необходимость выпол­нения этого требования можно, если наблюдать изменения расстояния между нижним концом объектива и препаратом при повороте револь­вера и смене объектива малого увеличения (10^х или 15^х) на большое (40^х). Исходное положение объектива малого увеличения ~1 см от ниж­него его края до препарата.

Исследуя объект, основную информацию о нем можно получить при малом его увеличении, при котором оптимальны освещенность и резкость. Переходя на большое увеличение, мы выигрываем в разме­рах объекта, но значительно проигрываем в четкости общей картины.

При малом увеличении фокусировка (наведение на резкость) осу­ществляется с помощью макровинта под постоянным контролем глаза, т.е. не отнимая глаза от окуляра. Добившись необходимой резкости (грубая наводка макровинтом), окончательную доводку фокусировки выполняют микровинтом. При хорошей грубой наводке движение микровинта в одну или другую сторону (от себя или к себе) не должно превышать двух полных оборотов. В противном случае следует снова использовать макровинт. Это особенно важно при работе с большим увеличением, когда расстояние от края объектива до препарата очень

18 Технические средства изучения микроскопических объектов

Микроскоп бинокулярный стереоскопический (МБС) 19

 

мало. При большом увеличении следует пользоваться только микро­винтом, предварительно проведя грубую наводку при малом увели­чении, а затем поворотом револьвера установив большое увеличение. Закончив изучение препарата при большом увеличении, микроскоп следует сразу перевести на малое увеличение.

При работе с объективами разного увеличения нужно помнить два важных обстоятельства.

Во-первых, микроскоп дает плоскостное изображение объекта. Поэтому при большом увеличении мы видим четко очень тонкую плоскость, все, что выше или ниже ее, видно неясно, и нужно посто­янно работать микровинтом, чтобы рассмотреть все структуры. При объективе малого увеличения исследуемая плоскость толще и часто позволяет отчетливо видеть весь объект.

Вторая особенность работы при разных увеличениях связана с освещением. Маленькое входное отверстие и свойства линз объек­тива большого увеличения пропускают очень узкий пучок световых лучей, поэтому при переходе с малого на большое увеличение мы зна­чительно теряем в интенсивности освещения объекта. Необходимо открыть диафрагму конденсора.

6. Перемещение препарата на предметном столике при малом увели­чении осуществляется вручную. Определенную трудность представляет то, что оптическая система микроскопа дает обратное изображение. Нужна определенная сноровка, чтобы усвоить: все, что мы видим сверху, на са­мом деле расположено внизу, то, что справа, — находится слева, и нао­борот.

При переходе на большое увеличение движение препарата долж­но быть очень точным и проводится винтами предметного столика. Переходя с малого на большое увеличение, объект или его часть, ко­торую нужно изучить, необходимо предварительно движением пре­парата разместить в центре поля зрения малого увеличения и лишь после этого перевести на большое увеличение.

Микроскоп, как всякий точный прибор, требует бережного обра­щения. Протирать его, особенно линзы окуляра и объектива, изготов­ленные из мягкого, легко повреждаемого стекла, нужно осторожно, используя мягкие, много раз стиранные сухие полотняные салфетки. Нельзя использовать для очистки стекол спирт, т.к. это вызывает рас­творение специальных покрытий и помутнение оптики.

Нельзя самостоятельно развинчивать окуляры и объективы. Их повреждения может устранить только специалист.

Микроскоп бинокулярный стереоскопический (МБС)

Для изучения объемных организмов и наблюдения за движени­ем, питанием и другими формами поведения достаточно крупных (не микроскопических) животных, а также для их препарирования используются бинокулярные стереоскопические микроскопы малого увеличения (МБС). Они дают прямое изображение, имеют большое поле зрения, широкий диапазон разрешающих увеличений (табл. 2). С помощью МБС можно изучать прозрачные водные объекты в про­ходящем световом потоке и непрозрачные, темные — в отраженном свете. В настоящее время используются модели МБС-9 и МБС-10 (рис. 3).

Таблица 2 Кратность увеличения объектов бинокулярным микроскопом при использовании разных объективов и окуляров

 

					Окуляры
Объективы		6"		8"	12,5х	14"
0,6"	3,5		4,5			8,1
Iх					12,5	14,3
2"						28,6
4х						57,2
7х

Оптический блок МБС включает оптическую головку и окуляр­ную насадку.

В оптическую головку вмонтированы все оптические детали, включающие объектив микроскопа, выше которого установлен барабан с галилеевскими системами. Ось барабана заканчивается расположен­ными снаружи с двух сторон рукоятками, при вращении которых происходит переключение увеличений, значения которых нанесены на рукоятках (7^х, 4^х, 2^х, I^х, 0,6^х).

Чтобы установить нужное увеличение, необходимо, вращая ба­рабан, цифру на рукоятке совместить с точкой на подшипнике. При этом перефокусировку проводить не нужно. Положение барабана фиксируется щелчком. Фокусировка объектива оптической головки производится винтами на направляющей, с помощью которых поднимают или опускают головку относительно столика микроскопа.

20 Технические средства изучения микроскопических объектов

Изготовление препаратов для микроскопирования

крамальеры

Окулярная насадка состоит из двух призм, заключенных в по­движные оправы, на которых укреплены окулярные трубки. Двигая оп-швы призм, можно менять расстояние между центрами линз окулярных tdv6ok адаптируя их положение к межзрачковому расстоянию глаз исследователя.

Предметный столик съемный, устанавливается и закрепля­ется винтом на специальном основании. На задней стенке основания столика имеется гнездо для осветителя. Внутри основания располо­жено зеркало с матовой и зеркальной поверхностями и рукояткой для его вращения при регулировании освещения поля зрения.

Осветительная система, помимо зеркала, включает специальный осветитель, состоящий из конденсора и лампы накаливания, объе­диненных общим корпусом.

Изучение объекта возможно в отраженном и проходящем свете. Что­бы использовать осветитель для работы в отраженном свете, его крепят на шарнирном кронштейне. Для наблюдения в проходящем свете осветитель переносится в гнездо основания предметного столика.

В зависимости от структурных особенностей объекта (его плот­ности, прозрачности, окраски) отверстие предметного столика может закрываться стеклянной или металлической пластинкой, одна сторо­на которой окрашена в белый, другая — в черный цвет.

Изготовление препаратов для микроскопирования

Для изучения под микроскопом используют заранее изготовлен­ные постоянные препараты (их изготовление требует определен­ных навыков и времени) либо по ходу работы готовятся временные препараты. Материалом для них могут служить целые микроскопи­ческие или достаточно мелкие объекты (тотальные препараты) или части их тела.

При работе с микроскопом любой объект помещается на пред­метное стекло — стеклянную пластинку стандартного размера (76 х 26 мм). Очень немногие объекты рассматриваются сухими, чаще в капле воды или другой жидкости. Чтобы предохранить стекла объек­тивов от увлажнения, помещенный на предметное стекло в капле жидкости материал покрывается покровным стеклом. Его обычный размер 18 х 18 мм. Оно изготавливается из высококачественного сте­кла, очень тонкое и хрупкое.

Технические средства изучения микроскопических объектов

 

Рис.4.

Накладывание покровного стекла на объект

Покрывать каплю жидкости с исследуемым материалом нужно так, чтобы на препарате не остава­лись пузырьки воздуха. Для этого, держа покровное стекло за два угол­ка, противоположную его грань ста­вят в каплю жидкости и постепенно опускают стекло (рис. 4). Оставши­еся пузырьки легко отличить: они имеют широкий темный ободок, а поверхность их отливает зеркаль­ным блеском. Крупные пузырьки также имеют темное окаймление, а внутренняя их поверхность напо­минает запотевшее стекло.

Покрывая подготовленный временный препарат покровным стек­лом, необходимо учитывать объем изучаемого объекта, в противном случае он может быть деформирован или раздавлен тяжестью стекла. Во избежание этого на покровное стекло наносят восковые ножки. Обычный чистый пчелиный воск смешивается со скипидаром при подогреве (и тщательном соблюдении правил противопожарной бе­зопасности!) в пропорции 2,5:1. Такая масса может длительное время храниться, лучше в стеклянном бюксе или коробке. Перед исполь­зованием воск слегка разминают пальцами, чтобы он стал пластич­нее. Затем все четыре уголка покровного стекла, слегка царапая ими по комочку, снабжают восковыми ножками желаемой высоты и по­крывают объект на препарате, ориентируя покровное стекло ножками вниз.

Подцарство Protozoa — простейшие Тип Sarcomastigophora — саркомастигофоры

Тип объединяет более 25 000 видов простейших. Знакомству с его представителями в лабораторном практикуме по зоологии беспозво­ночных уделяется значительное внимание. В частности, предусмат­ривается ознакомление студентов с простейшими, принадлежащими к трем наиболее значимым подтипам: саркодовых, жгутиконосцев и опалинат.

Подтип Sarcodina — саркодовые

Изучение животных традиционно начинается с одноклеточных, а среди последних — с саркодовых. Наиболее удобным объектом явля­ется группа пресноводных амеб. Они малоподвижны, имеют доста­точно простое строение и легко культивируются в лабораторных усло­виях. Все это облегчает их изучение.

Представители подтипа в большинстве своем характеризуются амебоидным движением. Обитают в водной среде, почве, имеются па­разитические формы.

Надкласс Rhizopoda — корненожки

Объединяет организмы с псевдоподиями, не имеющими высоко-дифференцированных внутренних скелетных образований.

Класс Lobosea

Амебоидные формы с лопастевидными псевдоподиями (лобопо-диями), для которых не характерно слияние в сетевидные структуры.