Сущность техники постановки, учет и контроли РА

Агглютинация – склеивание микробных тел в результате специфического взаимодействия АГ и АТ, которые оседают на дно пробирки, обр. осадок «зонтика». Для диагностики бруцеллеза, сальмонеллеза, лептоспироза, листериоза, колибактериоза.

2 компонента: агглютиноген и агглютинин = осадок агглютинат

РА на стекле а) на обезжир. стекло +исслед-ую сыворотку и смеш. с каплей АГ б) на обезж. пред. стекло + каплю физ. р-ра, туда бак. петлей +культуру с плотной пит.среды + капля полож-ой сыв-ки. Положит: когда когда АГ исслед. культ. спец-ны АТ имм-х сыв-к – появл-ся хлопья агглютината Отриц-я: при несоотв-вии равном-ое помутнение взвеси. Контроли:1) физ. р-р +полож. сывор-ка 2)физ. р-р+АГ-диагн-ум 3) АГ-диаг +полож. сывор-ка.

Кольцевая с молоком: на благоп. стад по бруцеллезу, оценка молока. Цветной бруц-ый АГ, молоко, полож-ая бруцел-я сыворотка. В пробирки с молоком 2 см2, вносят АГ 0,1см2, перемешивают, в термостат 37-38С на 1 час. Контроли: 1) молоко здоровой коровы+цветной бруц. АГ 2) молоко здоровой коровы в смеси с полож. сыв-кой +цвет. бруц. АГ.

Учет: +++ синее кольцо, остальное белое; ++ достат. выраж. синее кольцо; +синее кольцо слабо, столбик синий; - весь столбик раномерно синий, сливки белые

Сущность техники постановки, учет и контроли РП.

Осадочная р-я. Участвуют преципитиноген и преципитин = осадок преципитат.

Кольцепреципитация для диагности сиб. язвы. АГ от павших жив, биофабричный АГ, станд сибиреязвенная сыв-ка. Метод наслаивания -в проб. добавляют сибиреязв. сыв-ку и осторож. наслаив-т исслед. АГ (или метод подслаивания)

Контроли: 1)с полож. сыв+станд. АГ 2) с полож. сыв+физ.р-р 3) с полож. сыв+экстракт тканей здоров. жив.

Полож: серо-белый диск на границе. Отриц: прозрачная граница.

Метод флуорохромирования и метод флуоресцирующих антител (МФА) при диагностике бактериальных инфекционных болезней. Сущность и техника.

Основан на способности объекта светиться при пропускании через него пучка УФЛ. Для окрашивания используют флюорохромные красители (ауромин, родамин G, ФИТЦ). Повышается контрастность и облегчаетя обнаружение возбудителей. Метод окраски по Бойю для обнар. туберк. палочки. Добавляют смесь аурамина с родамином, нагрев 3-4 мин, слив, обесцвеч. 10-15 мин 3% р-ом хлористоводородного спирта, промыв, КMnO4 20-30сек, слив, докраш. 1% р-ом метилен. синего, промыв, суш. На темном фоне оранж. свеч. туберк.

МФА – микроскопическое исследование иммун. комплекса, с использ-ем АТ к которому присоединяют флюорохром = светятся в УФЛ. Микробный АГ фиксир. на пред. стекле, обрабатывают люминисцентными АТ, промывают, микроскопируют в люмин. микроскоп. Если АТ соответствуют, то прочно прикрепляется к АГ.