Отряд Opatinida — опалиныМатериал. Живых опалин можно получить в любое время года, если есть виварий, где содержатся лягушки. Опалины обнаруживаются практически в каждой травяной лягушке {Rana temporarid). Извлечь их можно при вскрытии брюшной полости лягушки, после чего выделяются задняя кишка и клоака и помещаются в часовое стекло или бюкс с физиологическим раствором, в котором опалины долго остаются живыми и активными. Для извлечения опалин из кишечника живой лягушки стеклянную пипетку с отшлифованным концом (глазную), вводят в клоаку и отсосанную слизь с содержащимися в ней опалинами переносят в физиологический раствор. При отсутствии живого материала используют постоянные препараты, изготовленные в виде мазка из содержимого задней кишки лягушки, фиксированного жидкостью Шаудина и окрашенного гематоксилином. 44 Тип Sarcomastigopha Изучение живых опалин. При исследовании содержимо] кишечника травяной лягушки in vivo в нем обнаруживаются мнор. численные опалины, относящиеся к виду Opalina ranarum (рис. Щ Они имеют листовидное овальное или слегка асимметричное тел покрытое многочисленными жгутиками, расположенными S-образ^ но изогнутыми рядами на плоских частях клетки и по ее краю. Коле? бания жгутиков, волнообразно проходящие по всей поверхносг клетки, обеспечивают разнообразное движение опалин.
Рис. 17. Опалина лягушачья (Opalina ranarum): A — взрослая особь: 1 — жгутики; 2 — эндоплазма; 3 — ядра; Б — деление опали В цитоплазме выделяется гомогенная, прозрачная эктоплазма и энд плазма, содержащая различные включения. Пищеварительные и сократи тельная вакуоли в связи с паразитическим образом жизни отсутствуют. Пи тание диффузное. Многочисленные (несколько десятков) ядра имеют вг прозрачных пятен на фоне зернистой эндоплазмы и расположены в ней к сыми рядами. При большом увеличении на окрашенных препаратах в цен тре каждого ядра видно небольшое ядрышко, окруженное сеткой хромати на. В связи с косым расположением ядер плоскость деления клетки оп при бесполом размножении проходит также косо. Опалин до недавнего времени относили к инфузориям из-за много численных жгутиков на всей поверхности клетки и многоядерносг-Однако детальное изучение морфологии и жизненного цикла опали убедительно доказало принадлежность их к жгутиконосцам. В это убеждают однородность ядер (отсутствие ядерного дуализма), копу ляция, а не конъюгация в размножении, многочисленность жгутиков не образующих единой системы, характерной для ресничного аппарата инфузорий. Тип Apicomplexa (=Sporozod) — переднекомплексные, или споровики Это обширная группа простейших, ведущих исключительно паразитический образ жизни, в связи с чем они приобрели ряд структурных й биологических адаптации, обеспечивающих их размножение и распространение. Паразитируют споровики у беспозвоночных и позво-ночных животных, некоторые — у человека. Класс Gregarinina — грегарины Отряд Eugregarinida — настоящие грегарины Материал. Для получения живых грегарин следует вскрыть живых черных тараканов (Blatta orientalis). Им отделяют голову и конец брюшка и извлекают кишечник. Грегарины обитают в средней кишке. Этот отдел кишечника легко отличим по расположению (между слепыми выростами — дивертикулами и мальпигиевыми трубочками), прозрачности и желтовато-белой окраске. Выделенную среднюю кишку переносят в часовое стекло с физиологическим раствором, разрывают иглой и просматривают под МБС или микроскопом при увеличении 8—10 раз. Присутствие грегарин легко обнаружить у зараженного таракана (даже без вскрытия кишки) по наличию беловатых непрозрачных точек, просвечивающихся сквозь прозрачные стенки средней кишки. Извлеченных грегарин изучают в капле воды или физиологического раствора. При отсутствии живого материала можно использовать окрашенные тотальные постоянные препараты. Изучение Gregarina blattarum. При изучении живого материала можно наблюдать медленное скольжение грегарин в растворе, связанное с сокращением тончайших волоконец — мионем, расположенных в эктоплазме. Легко проследить и другой способ движения, если поместить грегарин в каплю растертой в воде туши. За движущейся гре-гариной остается светлый след. По мнению Шевякова, это — столбик слизи, выделяющийся через мельчайшие поры пелликулы. Механизм такого движения объясняется по-разному. Некоторые сравнивают его с реактивным движением (стекающий столбик слизи словно подталкивает грегарину вперед). С другой стороны, на основании результатов исследований с электронным сканирующим микроскопом, Тип Apicompli Класс бгвдяптпа
на поверхности пелликулы обнаружена система продольно располЯ женных гребней, колебания которых, вероятно, и обеспечивают па тупательное движение грегарин. Грегарины, в связи с паразитическим образом жизни, приобре* ли ряд специальных адаптации. Их тело разделено на три участку эпимерит, протомерит и дейтомерит (рис. 18). В последнее расположено ядро. При отделении грегарины от стенки кишечник^ на последней, обычно, остается эпимерит, обеспечивающий фиксацик паразита и препятствующий выносу его из кишечника. Тело грегарин покрыто плотной пелликулой (иногда ее называю) кутикулой). Под ней располагается прозрачный тонкий слой э кто^ п л а з м ы, а основную часть клетки составляет зернистая эндоплазма Включения эндоплазмы — зерна гликогена, которые легко выявля ются при окраске клетки жидкостью Люголя (смесь глицерина с йодной тинктурой). Этим красителем зерна гликогена окрашиваются в кра^ сновато-коричневый цвет. Питание и все обменные процессы осуществляются диффузнс^ пищеварительные и сократительные вакуоли отсутствуют. В исследуемом материале часто можн<|
обнаружить попарное соединение грегарин I сизигий, который образуется перед поло? вым размножением грегарин, иногда на р них стадиях их развития. Monocystis agilis Материал. Грегарина Monocystis agilis пара зитирует в семенных мешках дождевых червей Для получения материала можно использоват живых или фиксированных червей. Практичес ки все дождевые черви заражены разными ] гаринами рода Monocystis. Рис. 18. Грегарина таракановая (Gregarina blattarum) ■ две особи соединены в сизигий: 1 — протомерит; 2 —дейтомерит; 3— ядро; 4— ку] тикула; 5— эктоплазма; 6— эндоплазма; 7— зерна гликогена Вскрывают червя острым скальпелем или лезвием бритвы в пе-едней трети тела, извлекают три пары беловатых семенных мешков и помешают их в часовое стекло с небольшим количеством воды. Ткань семенного мешка измельчают, а затем капля полученной взвеси исследуется под микроскопом. В большинстве случаев в семенных мешках дождевых червей встречаются небольшие (около 1 см при 80-кратном увеличении микроскопа) шаровидные цисты на разных стадиях развития. Сами грегарины попадаются редко, имеют нерасчлененное на эпи-, прото- и дейтомерит тело, удлиненное или округлое. Изучение препарата. При рассмотрении препарата под микроскопом при малом увеличении в поле зрения заметны многочисленные клетки семенных мешков червя, имеющие желтоватую окраску. Это половые клетки червя на разных стадиях созревания. Среди них четко выделяются цисты, имеющие правильную округлую форму и серую окраску (рис. 19). На материале можно проследить различные стадии полового размножения грегарин. Вначале в цисте грегарины изменяют форму, округляются, но сохраняют самостоятельность и превращаются в гамонты. Затем в каждом гамонте ядра многократно делятся, каждое ядро окружается участком цитоплазмы и образуются гаметы. Неиспользованная цитоплазма дает остаточное тело. При слиянии гамет разных гамонтов образуются зиготы, позднее покрывающиеся оболочкой и превращающиеся в ооцисты. В каждой ооцисте
Рис. 19. Моноцистис (Monocystis agilis). Цисты с ооцистами в ткани семенного мешка дождевого червя: 1 — цисты с ооцистами; 2 — гамонты в цисте; 3 — ткань семенного мешка Тип Apicomplexa «ласе Coccidiomorpha
в процессе спорогонии ядра делятся 3 раза, образуя соответственно восемь спорозоитов, лежащих в ооцисте своеобразными «пакетами». Спорозоиты в ооцисте хорошо видны при большом увеличении микроскопа. На этой стадии развитие ооцист в цисте заканчивается. Позднее оболочка цисты разрушается, и ооцисты со спорозоитами попадают в семенные мешки дождевых червей и при их копуляции поступают в семяприемники, а при оплодотворении яйцеклеток — в зиготу и вызывают заражение нового поколения червей. Вот почему почти 100 % дождевых червей заражены разными видами моноцистисов. Класс Coccidiomorpha — кокцидиеобразные Отряд Haemosporidia — кровяные споровики Материал. Изучение малярийного плазмодия проводится по препаратам мазков крови человека, зараженного паразитом. Это позволяет ознакомиться с той частью жизненного цикла, которая протекает в эритроцитах человека, т.е. с периодом эритроцитарной шизогонии (бесполое размножение) и образованием микро- и макрогамонтов (рис. 20).
|
