РАСТЕНИЯ ОГУРЦА, УСТОЙЧИВЫЕ К ЗАБОЛЕВАНИЯМ1. Растение, которое является устойчивым к клостеровирусу огурцов и к мучнистой росе, причем указанное растение представляет собой растение вида Cucumis sativus, указанное растение, содержит на одной хромосоме по меньшей мере один хромосомальный регион, который придает устойчивость к клостеровирусу, и по меньшей мере один хромосомальный регион, который придает устойчивость к мучнистой росе, где указанный по меньшей мере один хромосомальный регион, который придает устойчивость к клостеровирусу, связан по меньшей мере с одним маркером, выбранным из группы, состоящей из маркеров E16/M50-244, E16/M50-188 и E11/M48-251, и где указанный по меньшей мере один регион, который придает устойчивость к мучнистой росе, связан по меньшей мере с одним маркером, выбранным из группы, состоящей из: маркера однонуклеотидного полиморфизма 39T маркера однонуклеотидного полиморфизма 29G маркера однонуклеотидного полиморфизма 193C мутации вставки 5'-AATTT-3' в позиции 221 в SEQ ID NO:4, и маркеров E16/M50-F-194, E11/M48-F-251, E23/M38-M001, E23/M40-M003, E24/M46-M002, E24/M46-M003, E12/M91-M003, E26/M43-M003, E14/M59-F-134 и E14/M59-F-200. 2. Растение по п.1, где указанное растение включает по меньшей мере два хромосомальных региона, которые придают устойчивость к мучнистой росе, где первый из указанных по меньшей мере двух регионов связан с по меньшей мере одним маркером, выбранным из группы, состоящей из: маркера однонуклеотидного полиморфизма 39T маркера однонуклеотидного полиморфизма 29G маркеров E16/M50-F-194, E11/M48-F-251, E23/M38-M001, и где второй из указанных по меньшей мере двух регионов связан по меньшей мере с одним маркером, выбранным из группы, состоящей из: маркера однонуклеотидного полиморфизма 193C мутации вставки 5'-AATTT-3' в позиции 221 в SEQ ID NO:4, и маркеров E23/M40-M003, E24/M46-M002, E24/M46-M003, E12/M91-M003, E26/M43-M003, E14/M59-F-134 и E14/M59-F-200. 3. Растение по п.2, где указанный по меньшей мере один регион, который придает устойчивость к клостеровирусу, помещен между указанными по меньшей мере двумя регионами, которые придают устойчивость к мучнистой росе, как определено в п.2. 4. Часть растения огурца по любому из пп.1-3. 5. Часть растения по п.4, где указанная часть растения выбрана из пыльцы, семязачатков, листьев, корней, кончиков корней, пыльников, цветов, плодов, стеблей, отростков, прививочных черенков, корневых побегов, семян, протопластов и каллий. 6. Семя F1, полученное скрещиванием растения огурца по любому из пп.1-3, со вторым растением огурца или растением другого сорта, предпочтительно из ряда огурцов, который включает желаемые с коммерческой точки зрения характеристики, где указанное семя включает по меньшей мере один маркер устойчивости к клостеровирусу, выбранный из группы, состоящей из маркеров E16/M50-244, E16/M50-188 и E11/M48-251 и, по меньшей мере одного маркера устойчивости к мучнистой росе, выбранного из группы, состоящей из: маркера однонуклеотидного полиморфизма 39T маркера однонуклеотидного полиморфизма 29G маркера однонуклеотидного полиморфизма 193C мутации вставки 5'-AATTT-3' в позиции 221 в SEQ ID NO:4, и маркеров E16/M50-F-194, E11/M48-F-251, E23/M38-M001, E23/M40-M003, E24/M46-M002, E24/M46-M003, E12/M91-M003, E26/M43-M003, E14/M59-F-134 и E14/M59-F-200. 7. Семя по п.6, где указанное второе растение огурца является чувствительным к клостеровирусу и где указанный по меньшей мере один маркер устойчивости к мучнистой росе представлен в виде гомозиготы. 8. Семя по п.6 или 7, где указанное второе растение огурца является инбредным растением. 9. Гибридное растение, полученное выращиванием семени по любому из пп.4-8. 10. Часть гибридного растения по п.9. 11. Часть растения по п.10, где указанная часть растения выбрана из пыльцы, семязачатков, листьев, корней, кончиков корней, пыльников, цветов, плодов, стеблей, отростков, побегов, корневых побегов, семян, протопластов и каллий. 12. Способ отбора растения, которое является устойчивым к клостеровирусу огурцов и к мучнистой росе огурцов, где указанное растение является растением вида Cucumis sativus, указанный способ включает анализ для определения маркера, где указанный анализ включает стадии: а) обнаружения в геноме указанного растения наличия по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к клостеровирусу, выбранного из группы, состоящей из маркеров E16/M50-244, E16/M50-188 и E11/M48-251, и b) обнаружения в геноме указанного растения наличия по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к мучнистой росе, выбранного из группы, состоящей из: маркера однонуклеотидного полиморфизма 39T маркера однонуклеотидного полиморфизма 29G маркера однонуклеотидного полиморфизма 193C мутации вставки 5'-AATTT-3' в позиции 221 в SEQ ID NO:4, и маркеров E16/M50-F-194, E11/M48-F-251, E23/M38-M001, E23/M40-M003, E24/M46-M002, E24/M46-M003, E12/M91-M003, E26/M43-M003, E14/M59-F-134 и E14/M59-F-200. 13. Способ по п.12, в котором стадия включает: обнаружение наличия в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного с первым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурцов, показанным SNP маркером 39Т обнаружение в геноме указанного растения наличия по меньшей мере одного маркера, связанного со вторым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурцов, показанным SNP маркером 193C 14. Способ по п.12, где способ включает: а) предоставление образца геномной ДНК из указанного растения; b) получение указанного по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к клостеровирусу, и указанного по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к мучнистой росе, в указанном образце геномной ДНК из указанного растения. 15. Способ по п.13, где способ включает: а) предоставление образца геномной ДНК из указанного растения; b) получение указанного по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к клостеровирусу, и указанного по меньшей мере одного маркера, связанного с устойчивостью к мучнистой росе, в указанном образце геномной ДНК из указанного растения. 16. Способ по п.14, в котором указанная стадия b) включает применение по меньшей мере одного набора праймеров, для определения указанного маркера (ов), или применение по меньшей мере одного зонда нуклеиновой кислоты с последовательностью оснований, которая, по существу, комплементарна последовательности нуклеиновой кислоты, определяющей указанный маркер, и зонда для нуклеиновой кислоты, который специфически гибридизируется в жестких условиях с последовательностью нуклеиновой кислоты, определяющей указанный маркер (ы). 17. Способ по любому из пп.12-16, в котором дополнительно доказывают, что указанные маркеры находятся на той же самой хромосоме, указывает на то, что они присутствуют и в фазе сцепления, например, путем демонстрации пониженной сегрегации между маркерами в экспериментах по скрещиванию, когда их сравнивают с несцепленными маркерами. 18. Растение, отобранное способом по любому из пп.12-17. 19. Способ получения растения вида Cucumis sativus, причем у растения показана устойчивость к клостеровирусу огурцов и к мучнистой росе огурцов, включающий стадии: а) отбора первого растения огурца, которое содержит хромосомальный регион, который придает устойчивость к клостеровирусу огурца, путем обнаружения в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного с QTL, придающим устойчивость к клостеровирусу огурцов, выявленый маркерами E16/M50-244, E16/M50-188, и E11/M48-251; b) отбора второго растения огурца, которое содержит по меньшей мере один хромосомальный регион, который придает устойчивость к мучнистой росе, путем обнаружения в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного с первым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе, показанным следующими маркерами: маркер однонуклеотидного полиморфизма 39T маркер однонуклеотидного полиморфизма 29G маркеры E16/M50-F-194, E11/M48-F-251, E23/M38-M001; или путем обнаружения в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного со вторым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе, показанным следующими маркерами: маркер однонуклеотидного полиморфизма 193C мутация вставки 5'-AATTT-3' в позиции 221 в SEQ ID NO:4, и маркеры E23/M40-M003, E24/M46-M002, E24/M46-M003, E12/M91-M003, E26/M43-M003, E14/M59-F-134 и E14/M59-F-200; с) скрещивания указанных растений стадии а) и стадии b) с получением семян F1; d) выращивания некоторого количества семян F1 до растений F1, создавая следующую популяцию потомков из указанных растений F1 путем скрещивания или самоопыления, и e) отбора из числа следующих растений -потомков растения, которое содержит по меньшей мере один маркер, связанный с QTL, придающим устойчивость к клостеровирусу огурца, как определено на стадии а) и по меньшей мере один маркер, связанный с QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурца, как определено на стадии b). 20. Способ по п.19, где стадия отбора второго растения огурца на стадии b) включает отбор второго растения огурца с одним из указанных, первого или второго QTL, придающих устойчивость к мучнистой росе огурца, и где указанный способ дополнительно включает стадию: f) отбора третьего растения огурца, имеющего другой чем указанные первый или второй QTL, придающие устойчивость к мучнистой росе огурца, (т.е. QTL, который не представлен в указанном втором растении огурца); g) скрещивания растений F1, полученных на стадии е) с указанным третьим растением огурца с получением последующих растений -потомков, и h) отбора из числа растений -потомков растения, которое содержит QTL, придающий устойчивость к клостеровирусу огурца, как определено на стадии а) и оба QTL, придающие устойчивость к мучнистой росе огурца, как определено на стадии b). 21. Способ по п.19, в котором стадия отбора растения огурца, содержащего хромосомальный регион, который придает устойчивость к мучнистой росе огурцов, как определено на стадиях b), e), f) или h), включает обнаружение в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного с первым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурца, показанным SNP маркером 39Т обнаружение в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного со вторым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурцов, показанным SNP маркером 193C 22. Способ по п.20, в котором стадия отбора растения огурца, содержащего хромосомальный регион, который придает устойчивость к мучнистой росе огурцов, как определено на стадиях b), e), f) или h), включает обнаружение в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного с первым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурца, показанным SNP маркером 39Т обнаружение в геноме указанного растения по меньшей мере одного маркера, связанного со вторым QTL, придающим устойчивость к мучнистой росе огурцов, показанным SNP маркером 193C 23. Способ по любому из пп.19-22, где по меньшей мере одна из стадий a), b), e), f) или h), включает стадию получения образца геномной ДНК из указанного растения и обнаружения в указанном образце геномной ДНК по меньшей мере одного указанного маркера. 24. Способ получения растения вида Cucumis sativus, у которого показана устойчивость к клостеровирусу огурца и к мучнистой росе огурца, включающий стадии: а) отбора растения вида Cucumis sativus, которое содержит хромосомальные регионы, которые придают устойчивость против клостеровируса огурца и мучнистой росы огурца путем осуществления способа любого из пп.12-17; b) инбридинга указанного растения с получением гомозиготной линии растения указанных QTL; с) скрещивания указанных растений стадии а) и стадии b) с получением семян F1 и d) выращивание указанных семян F1 до растений -потомков F1. 25. Растение или его часть, получаемые способом по любому из пп.19-24.
ПРИЛОЖЕНИЕ З Заявка на изобретение: 2008139096
|
G в SEQ ID NO:1,
