Основные хроматографические величины и их определение
При разделении веществ с помощью ЖХ могут применяться проявительный, фронтальный и вытеснительный варианты. Чаще всего используют проявительный вариант, при котором в колонку в потоке элюента вводят порцию разделяемой смеси. Выход компонентов смеси из колонки регистрируется на хроматограмме в виде пиков (рис. 1, а). Высота или площадь пиков характеризует концентрацию компонентов, а удерживаемые объемы – качественный состав смеси. Идентификацию компонентов обычно проводят по совпадению времен удерживания со стандартными веществами; используют также физико-химические химические или химические методы. При фронтальном варианте через колонку непрерывно пропускают смесь разделяемых веществ, которая играет роль подвижной фазы. Хроматограмма в этом случае представляет собой ступени, высоты которых пропорциональны концентрациям компонентов; удерживаемые объемы определяют по времени удерживания компонентов (рис. 1, б). При дифференцировании такой хроматограммы получают картину, как в проявительном варианте.
Рисунок 1 – Варианты жидкостной хроматографии: а) проявительный; б) фронтальный; в) вытеснительный. В вытеснительном варианте (рис. 1, в) компоненты смеси, введенной в колонку, вытесняются элюентом, который адсорбируется сильнее любого компонента. Порядок выхода компонентов определяется силой взаимодействия их с поверхностью сорбента.
|