Студопедия — Жидкостная хроматография
Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Жидкостная хроматография






Это вариант хроматографии, при котором пользуются жидкой подвижной фазой, неподвижная фаза может быть жидкой (жидко-жидкостная хроматография) или твердой (жидкостно-адсорбционная хроматография).

Высокоэффективная жидкостная хроматография, высокоскоростная жидкостная хроматография. Применяют носители, состоящие из тонкого пористого слоя сорбента, окружающего твердое непроницаемое ядро (поверхностно-пористые насадки), помещенного в колонку диаметром 1—3 мм. Скорость прохождения жидкости — 1—5 мл/мин, разделение осуществляется за 1—2 мин [235].

Мультихроматография — разделение компонентов одной и той же пробы при использовании минимум 2 колонок (обычно с полярной и неполярной неподвижной фазой). Реализуется ступенчатое изменение селективности разделительной системы за счет изменения времени пребывания сорбента в контакте с одной из неподвижных фаз. Достигается почти оптимальное разделение смеси [237].

Противоточная хроматография — метод жидко-жидкостной распределительной хроматографии без применения твердого носителя [227].

В зависимости от принципа разделения различают следующие виды хроматографии.

Распределительная (экстракционная) хроматография. Разделение основано на различной растворимости определяемых веществ в подвижной и неподвижной фазах [226].

Бывают:

Распределительная тонкослойная хроматография.

Неподвижная фаза — ундекан, тетрадекан, парафиновое масло, силиконовые масла и др.

Подвижная фаза — полярные органические растворители.

Экстракционная хроматография — вариант жидкостной хроматографии в колонке, сочетание жидкостной экстракции с техникой хроматографии, экстракция становится многостадийным процессом. Неподвижная фаза — органический растворитель или раствор на его основе, например дитизон, дитиокарбаминаты и другие вещества, растворенные в органических растворителях, сорбированных на твердом носителе. Подвижная фаза — анализируемый водный раствор. Многочисленность экстракционных реагентов существенно расширяет методику разделения.

Ионообменная хроматография — разделение компонентов смеси основано на различии констант ионообменного равновесия. В качестве неподвижной фазы используют вещества, способные к обмену ионов (иониты). Поглощение растворенных веществ твердой фазой является результатом межфазных ионообменных реакций.

Элютивная ионообменная хроматография. Колонку с ионообменной смолой вначале обрабатывают раствором того электролита, который будет использован в качестве элюента.

Ионная хроматография — автоматизированный скоростной вариант ионообменной хроматографии.

Гель-хроматография, гель-проникающая хроматография, гель-фильтрационная хроматография, хроматография на молекулярных ситах — вариант хроматографического анализа, основанный на различной доступности пор сорбента для макромолекул разных размеров.

Хроматографические методы по способу разделения классифицируют следующим образом [234].

Вытеснительная хроматография. Сначала в колонку вводят разделяемую смесь (А+Б+В+ и т.д.), затем непрерывно подают раствор вещества Г, обладающего наибольшим сродством к неподвижной фазе — вытесняющий компонент. Он вытесняет все ранее удержанные компоненты и выталкивает их из колонки. Компоненты смеси вытесняют друг друга из неподвижной фазы. Компоненты элюируются из колонки в определенной последовательности. Компонент с наименьшим сродством к неподвижной фазе выходит первым, компонент Г — последним.

Вытеснительная ионообменная хроматография. Сначала смолу в колонке переводят в форму иона, имеющего коэффициент селективности меньший, чем коэффициенты селективности ионов разделяемой смеси. Затем вводят раствор разделяемой смеси (около десятой части обменной емкости колонки). Пропускают раствор элюента, последний содержит ион, имеющий больший коэффициент селективности. Термическая десорбция — вариант вытеснительного анализа. Роль вытеснителя играет нагретая трубчатая печь, надвигающаяся на слой сорбента, полосы разделившихся веществ примыкают друг к другу

Фронтальная хроматография. Разделяемую смесь непрерывно пропускают через колонку с сорбентом. На последнем образуются зоны сорбированных веществ. Наименее сорбирующийся компонент выделяется в чистом виде первым за слоем сорбента. Следующая фракция содержит наряду с этим еще один компонент, занимающий по сорбируемости второе место. Последующие фракции содержат 3, 4 и более компонентов. Наконец выходит порция такого же состава, как и начальная смесь [219, 220, 223].

Проявительная хроматография,проявительный анализ, элюционная хроматография. Анализируемую пробу вводят в колонку с адсорбентом и пропускают газ-носитель (элюент). При этом смесь передвигается по слою сорбента. Скорость движения компонентов смеси в зависимости от их сорбируемости различна. Разделяемые компоненты выделяются из колонки отдельными зонами (полосами), между которыми выходит чистый газ-носитель [219, 220, 223].

По способу экспериментирования различают ряд хроматографических методов.

Колоночная насадочная хроматография. Разделение осуществляется в колонках, которые заполняют сорбентом (насадкой), длина колонки 1 —10 м, внутренний диаметр 3—6 мм [234].

Комплексообразовательная хроматография. Разделение смеси веществ обусловлено различной устойчивостью и сорбируемостью комплексных соединений, образующихся в результате взаимодействия компонентов со специально введенным в систему комплексообразующим реагентом [244].

Редокс-хроматография,окислительно-восстановительная хроматография. Разделение веществ обусловлено разными скоростями окислительно-восстановительных реакций, протекающих между окислителем и восстановителем, содержащимися в колонке, и ионами хроматографируемого раствора. Колонка заполнена окислительно-восстановительным полимером, обладающим также и ионообменными свойствами — редокситы или электро-ионообменники [233].

Электрохроматография. Движение заряженных частиц осуществляется под действием приложенного напряжения. Скорость движения частиц определяется их массой и зарядом [220].

Высаливающая элюентная хроматография — разделение неэлектролитов или слабых электролитов посредством вымывания с колонки водным раствором соли высокой концентрации.

Повторная (многократная) хроматография. Обычно для получения хроматограммы подвижный растворитель пропускают по пластинке (колонке) один раз — однократная хроматография. Однако для лучшего разделения зон проводят многократное хроматографирование. При повторных операциях можно использовать либо тот же, либо иной растворитель.

Капиллярная хроматография — колонкой служит капилляр, его длина 25—100 м, внутренний диаметр 0,1 — 1 мм. Капилляр готовят из стекла, меди, стали, полимеров и др. Внутренняя поверхность капилляра покрыта тонким слоем неподвижной жидкой фазы (например, скваланом). В таких колонках можно разделять близкие по свойствам вещества [222, 247].

Радиогазовая капиллярная хроматография — вариант капиллярной хроматографии для анализа органических веществ, меченных |4С [248].

Бумажная хроматография — один из вариантов хроматографического метода, основан на применении специальных сортов фильтровальной бумаги в качестве среды, в которой происходит разделение смесей.

Двумерная хроматография — вариант бумажной или тонкослойной хроматографии, развитие процесса последовательно в двух взаимно перпендикулярных направлениях. Используют квадратные отрезки фильтровальной бумаги или квадратные пластинки с нанесенным тонким слоем сорбента (размер 20 на 20 см). Сначала хроматографируют в одном направлении, затем высушивают и хроматографируют в направлении, перпендикулярном первому процессу, применяя либо тот же, либо другой растворитель. Двумерную хроматографию применяют для разделения многокомпонентных смесей [238, 244].

Обычную бумажную или тонкослойную хроматографию называют одномерной.

Денситометрия — исследование бумажных или тонкослойных хроматограмм после их проявления по светопоглощению пятен непосредственно на бумаге или пластинке с последующим определением по градуировочному графику.

Тонкослойная хроматография,адсорбционная тонкослойная хроматография — микрометод жидкостной хроматографии, выполняемый на пластинках в тонком слое адсорбента. Высота слоя адсорбента значительно меньше ширины (линейная тонкослойная хроматография). Подвижная фаза перемещается главным образом за счет капиллярных сил. Адсорбенты — силикагель, оксид алюминия, измельченная целлюлоза, смолы и др.

Шаг 1 Шаг 2 Шаг 3 Шаг 4
Шаг 5 Шаг 6 Шаг 7  

 

На одну сторону пластинки нанесен тонкий слой измельченного адсорбента. На расстоянии 1 см от края пластинки отмечают стартовую линию, на которую помещают каплю анализируемого раствора. Пластинку ниже стартовой линии погружают в систему растворителей. По мере продвижения жидкости вверх по слою адсорбента происходит разделение смеси веществ (восходящее элюирование). Отмечают границу подъема жидкости (линия фронта растворителя), высушивают и всю поверхность и осматривают ее под ультрафиолетовым светом или смачивают раствором соответствующего реагента (проявление). При этом разделенные вещества обнаруживают по появлению пятен между стартовой линией и фронтом растворителя. Измеряют расстояние от центра пятна до линии старта (отрезок АБ), находят расстояние от линии старта до фронта растворителя (отрезок АВ): АБ/АВ=Rf — качественная характеристика вещества, образовавшего данное пятно.

Для достижения более полного разделения пользуются градиентной тонкослойной хроматографией (градиентное элюирование) — применение элюирующей системы с меняющейся концентрацией солей (градиент концентрации), меняющимся отношением полярных и неполярных растворителей (градиент полярности), меняющимся значением рН (градиент рН).

Количественная оценка возможна при соблюдении постоянства условий эксперимента по следующим признакам: 1) прямое определение по пластинке по площади образовавшегося при проявлении пятна (градуировочный график); 2) определение по интенсивности окраски проявленного пятна (денсиметрический метод, градуировочный график); 3) снимают адсорбент с соответствующей зоны, обрабатывают растворителем, центрифугируют и в полученном растворе вещества определяют каким-либо способом.

Выше описано разделение путем восходящего элюирования. Возможны иные варианты элюирования [244]: нисходящее элюирование; горизонтальное элюирование (круговая хроматография [250]) — пробу наносят по кругу на квадратную пластинку с тонким слоем сорбента (на пересечение диагоналей), в центр подают растворитель, вещества разделяются с образованием концентрических зон; многократное элюирование одним и тем же растворителем (после элюирования пластинку высушивают и операцию повторяют со свежей порцией элюента); ступенчатое элюирование — многократное элюирование разными растворителями; центрифужное элюирование — под действием центробежной силы движение потока растворителей ускоряется в 2—3 раза; градиентное элюирование — состав элюента непрерывно изменяется.







Дата добавления: 2015-09-07; просмотров: 1515. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!



Кардиналистский и ординалистский подходы Кардиналистский (количественный подход) к анализу полезности основан на представлении о возможности измерения различных благ в условных единицах полезности...

Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...

Композиция из абстрактных геометрических фигур Данная композиция состоит из линий, штриховки, абстрактных геометрических форм...

Важнейшие способы обработки и анализа рядов динамики Не во всех случаях эмпирические данные рядов динамики позволяют определить тенденцию изменения явления во времени...

Неисправности автосцепки, с которыми запрещается постановка вагонов в поезд. Причины саморасцепов ЗАПРЕЩАЕТСЯ: постановка в поезда и следование в них вагонов, у которых автосцепное устройство имеет хотя бы одну из следующих неисправностей: - трещину в корпусе автосцепки, излом деталей механизма...

Понятие метода в психологии. Классификация методов психологии и их характеристика Метод – это путь, способ познания, посредством которого познается предмет науки (С...

ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФОРМЫ ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ К лекарственным формам для инъекций относятся водные, спиртовые и масляные растворы, суспензии, эмульсии, ново­галеновые препараты, жидкие органопрепараты и жидкие экс­тракты, а также порошки и таблетки для имплантации...

Определение трудоемкости работ и затрат машинного времени На основании ведомости объемов работ по объекту и норм времени ГЭСН составляется ведомость подсчёта трудоёмкости, затрат машинного времени, потребности в конструкциях, изделиях и материалах (табл...

Гидравлический расчёт трубопроводов Пример 3.4. Вентиляционная труба d=0,1м (100 мм) имеет длину l=100 м. Определить давление, которое должен развивать вентилятор, если расход воздуха, подаваемый по трубе, . Давление на выходе . Местных сопротивлений по пути не имеется. Температура...

Огоньки» в основной период В основной период смены могут проводиться три вида «огоньков»: «огонек-анализ», тематический «огонек» и «конфликтный» огонек...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2024 год . (0.009 сек.) русская версия | украинская версия