Завдання

Дата добавления: 2015-08-29; просмотров: 526

Непременным условием при проведении исследований на белок является абсолютная прозрачность мочи. Для этого мочу фильтруют. Если мутность не устраняется фильтрованием, при­меняют другие способы освобождения от мутности (см. выше).

Качественны е пробы

Проба с сульфосалициловой кислотой — самая чувствительная из качест­венных проб. К нескольким миллилитрам мочи добавляют 20% раствор сульфосалициловой кислоты из расчета две капли на 1 мл. При положи­тельной реакции появляется мутность, которая тем более выражена чем выше содержание белка в моче. Результат обозначают следующим образом: реакция слабоположительная (+), положительная (++), резко положительная(+++).

Проба с азотной кислотой. В пробирку наливают 1—2 мЛ 50% раствора азотной кислоты, затем наслаивают на кислоту равное количество мочи. При наличии белка на границе двух жидкостей появляется белое кольцо. Иногда несколько выше границы между жидкостями образуется кольцо красновато-фиолетового цвета от присутствия уратов. Уратное кольцо в отличие от белкового растворяется при легком нагревании.

Практически никаких реактивов не требуют качественнаяпроба Брайтас кипячением и сухие колориметрическиепробы—скрининг-тесты на протеинурию.

При кипячении мочи, содержащей белок, он денатурируется, образуя облаковидный осадок или хлопья, не растворяющиеся в 6% уксусной кис­лоте, в отличие от солей фосфатов. Скрининг-тесты основаны на способ­ности белка (альбумина) изменять цвет бумаги с нанесенным индикатором (как правило, бромфеноловым синим) и буфером. Прямая зависимость между интенсивностью окраски индикаторной бумаги и количесгвом белка позволяет ориентировочно оценить и величину протеинурий. Однако применяемые в настоящее время скрининг-тесты не лишены недостатков, в частности, бромфеноловый синий не выявляет белок Бенс-Джонса.

Количественные методы ,

Метод Робертса - Стольникова. В основе метода лежит качественная проба с азотной кислотой. Ход проведения пробы описан выше. Появление кольца на границе двух жидкостей между 2-й и 3-й минутой наслаивания указывает на наличие в моче 0,033 г/л белка (концентрацию белка в моче принято выражать в промилле, т. е. в граммах на литр). Если кольцо появилось раньше, чем через 2 мин, мочу следует развести водой. Подбирают такое разведение мочи, чтобы при наслаивании ее на кислоту кольцо появилось на 2—3-й минуте. Степень разведения зависит от ширины и компактности кольца и времени его появления. концентрацию белка вычисляют, умножив 0,033 г/л на степень разведения мочи. табл.6).

Метод разведения Робертса — Стольникова обладает рядом недостатков:

он субъективен, трудоемок, точность определения концентрации белка снижается по мере разведения мочи. Наиболее удобными в работе и точными являются нефелометрический и биуретовый методы.

Таблица 6