Билет №3. 1)Лиазы — ферменты, катализирующие разрыв С–О, С–С, C–N и других связей, аα-токоферола ацетат
1)Лиазы — ферменты, катализирующие разрыв С–О, С–С, C–N и других связей, а также обратимые реакции отщепления различных групп субстратов не гидролити- ческим путем. Выделяют 7 подклассов. Эти реакции сопровождаются образованием двойной связи или присоединением групп к месту двойной связи. Класс насчитывает около 230 ферментов. Лиазы — сложные ферменты.
Класс: 4. Лиазы Подкласс: 4.1. Углерод-углерод-лиазы Подподкласс: 4.1.1.Карбоксилазы Классификационный номер: КФ 4.1.1.22
2)В И Т А М И Н В 1 2 (К О Б А Л А М И Н, А Н Т И А Н Е М И Ч Е С К И Й) Суточная потребность 2.5-5.0 мкг Источники • только животные продукты: печень (90-150 мкг%), рыба, почки, мясо • синтезируется кишечной микрофлорой, однако не доказана возможность его всасывания в нижних отделах ЖКТ. Строение Содержит 4 пиррольных кольца, ион кобальта (с валентностью от Co3+ до Co6+), группу CN- Строение коферментной формы В организме при синтезе коферментных форм группа CN- заменяется на метил, 5-дезоксиаденозил, нитрит, ОН-группу. Метаболизм Для всасывания необходим внутренний фактор Кастла – гликопротеин, синтези- руемый обкладочными клетками желудка. В крови транспортируется в виде гидроксикобаламина специфическими транс- портными белками (α- и β-глобулинами). Биохимические функции Перенос атома Н на атом С в обмен на какую-либо группу. 1. Участие в трансметилировании гомоцистеина при синтезе метионина. Данная реакция обеспечивает удержание свободной фолиевой кислоты в клетке. При не- хватке витамина В12 N5-метил-ТГФК накапливается, легко проникает через мембра- ны и выходит из клетки. Возникает внутриклеточная недостаточность фолиевой ки- слоты, хотя в крови ее может быть много. 2. Участвует в превращении пропионил-КоА в метил-малонил-КоА, а тот далее в сукцинил-КоА. Т.о. витамин обеспечивает полное окисление остатков жирных кислот с нечетным числом атомов в катаболических реакциях, утилизацию треонина, валина, изолейцина, метионина, боковой цепи холестерола. Гиповитаминоз 1. Макроцитарная анемия, (количество эритроцитов снижено в 3-4 раза). Возникает чаще у пожилых, но может быть и у детей Причиной является потеря фолиевой кислоты клетками при недостаточности витамина В12 и, как следствие, нарушение синтеза пуринов и dТМФ. 2. Неврологические нарушения: • накопление нечетных жирных кислот вызывает жировую дистрофию нейронов и демиелинизацию нервных волокон, что проявляется в онемении кистей, стоп, ухудшении памяти; • нехватка метионина опосредует снижение активности реакций метилирования и уменьшает синтез ацетилхолина. 3. Пернициозная анемия Аддисон-Бирмера – аутоиммунное заболевание, при котором образуются антитела против обкладочных клеток желудка либо против внут- реннего фактора Кастла. Причиной гиповитаминоза обычно бывает не отсутствие в пище, а плохое всасывание из-за заболеваний желудка и кишечника (гаст- риты и энтериты). Лекарственные формы Цианкобаламин
3) Колориметрический метод определения активности а-амилазы в сыворотке крови и моче а-Амилаза (диастаза, 1,4-а-0-глюкангидролаза, КФ 3.2.1.1) катализирует гидролиз ос-1,4-глюкозидных связей крахмала и гликогена до мальтозы и декстринов. а-амилаза У здорового человека в крови в небольшом количестве содержится амилаза двух изоферментных типов: панкреатический - Р-тип (около 30%) и слюнной - S-тип (около 70%), которые попадают в кровь в результате естественного старения и отмирания клеток слюнных желез и поджелудочной железы. Фермент иммеет относительно низкую молекулярнуюЧассу (около 48000 Д), фильтруется в почечных клубочках и присутствует в моче. Соотношение изофер-ментов в моче иное, чем в крови: Р-тип - 70%, S-тип - до 30%. Реактивы 1) Фосфатный буфер, рН 7,0, 2) крахмальный субстрат, 3) 9 ммоль/л раствор NaCI, 4) осаждающий раствор: 1,85 ммоль/л MgS04, сульфосалициловая кислота (2 ммоль/л). Материалы исследования Сыворотка крови. Принцип а-Амилаза катализирует гидролиз нерастворимого цветного крахмального субстрата с образованием синего, растворимого в воде красителя. Количество освобожденного красителя пропорционально каталитической активности фермента. Расчет Активность фермента в сыворотке крови находят по приложенной калибровочной таблице, исходя из полученной оптической плотности.
При определении активности фермента в моче полученную по таблице каталитическую активность необходимо умножить на 2. Если проба имеет высокую активность, ее разбавляют физиологическим раствором, определение проводят снова, а результат умножают на разведение. I Нормальные величины Сыворотка 140-350 Е/л Моча 1000-2000 Е/л Практическое значение Повышение активности фермента происходит главным образом при заболеваниях поджелудочной железы. При остром панкреатите активность в крови и моче возрастает в 10-30 раз. Возрастание активности фермента выявляется при беременности, почечной недостаточности, кишечной непроходимости, заболеваниях желчных путей, диабетическом кетоацидозе, некоторых опухолях легких и яичников, поражении слюнных желез. Оформление работы Отмечают принцип метода, регистрируют результаты анализа и делают вывод о возможной патологии.
|
