Для определения количества белков используют разные подходы
Для количественного анализа белков можно использовать определение белкового азота. Для этого пробу сжигают при высокой температуре в присутствии серной кислоты и перекиси водорода (окислитель). Происходит минерализация, при этом азот в форме аммиака связывается серной кислотой (сульфат аммония). Количество сульфата аммония определяют или с реактивом Несслера, или после перегонки аммиака титрометрически. Значительно чаще для количественного определения используют цветные реакции (биуретовую или реакцию на фенольные группы Lowry). Биуретовая реакция основана на том, что в щелочной среде ионы меди реагируют с пептидными группировками, образуя комплексные соединения, окрашенные в фиолетовый цвет. Интенсивность окраски фотометрируется. Сочетание биуретовой реакции и реакции на фенольные группировки используется в методе Lowry. Для количественного определения индивидуальных белков в сложных смесях белков большой популярностью пользуются иммунологические методы. При взаимодействии белка со специфической антисывороткой образуется мутный раствор. Интенсивность помутнения может быть измерена колориметрическими методами.
21.10.2006
Министерство здравоохранения Республики Беларусь УО «Гомельский государственный медицинский университет»
Кафедра биологической химии
Обсуждено на заседании кафедры (МК или ЦУНМС) Протокол № _________________200__года
ЛЕКЦИЯ наименование дисциплины для студентов _ 2 __ курса лечебного факультета Тема Ферменты-1. Строение и свойства.
Время 90 мин.
Учебные и воспитательные цели: Дать представление: 1. О строении, размерах и форме белковой молекулы, функциях белков. 2. Понятия «денатурация»: причины и признаки, использование в медицине. 3. Понятия «ферменты»: особенностях ферментативного катализа. О строении и структуре ферментов. 4. О полиферментных комплексах, метаболонах. ЛИТЕРАТУРА 1 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. М.: Медицина, 1990. С. 92–102; 1998. С. 114–143. 2 Николаев А. Я. Биологическая химия. М.: Высшая школа, 1989. С. 5–92. Дополнительная 3 Марри Р. и др. Биохимия человека. М.: Мир, 1993. Т. 1. С. 63–75. 4 Филиппович Ю. Б. Основы биохимии. М.: Высшая школа, 1993. С. 93–99. 5 Ленинджер А. Л. Основы биохимии. М.: Мир, 1985. Т. 1. С. 226–302. 6 Тюкавкина Н. А., Бауков Ю. И. Биоорганическая химия, М.: Медицина, 1991. С. 313–376. 7 Албертс Б. и др. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1994. Т. 1. С. 113–171.
МАТЕРИАЛЬНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ 1. Мультимедийная презентация.
РАСЧЕТ УЧЕБНОГО ВРЕМЕНИ
Всего 90 мин
|