Определена константа Михаэлиса 0,02±0,01моль/л и максимальная скорость 0,0050±0,0025мкмоль/(мл·мин).

График Эйзеншталя-Корниш-Боудена

Определение константы Михаэлиса графическим методом Эйзеншталя-Корниш-Боудена (см. Приложение, график 3). Способ получения графика описан в теоретической части. Из графика видно, что идеального совпадения с теорией нет, так как наблюдается “плавающая точка” пересечения графиков. Такое явление довольно обычно для подобных экспериментов.

Причина, наверное, состоит в погрешностях приборов. Из графика 3 видно, что уменьшение концентрации субстрата приводит к увеличению точности нанесения точек по оси ординат в ущерб точности нанесения точек по оси абсцисс. Мы не можем брать очень близкие между собой концентрации субстрата, так как иначе из экспериментального графика (см. Приложение) в силу случайных или систематических ошибок невозможно с хорошей точностью рассчитать начальную скорость.

 

Таблица 3

Концентрация субстрата, моль/л	0,0028	0,0055	0,0138	0,0276	0,0553	0,1106	0,2764
Скорость реакции, мкмоль/(мл*мин)	0,00053	0,00079	0,00168	0,00280	0,00380	0,00483	0,00502
Обратная скорость, мл*мин/мкмоль

Из графика 3 находим, что константа Михаэлиса находится в пределах 0,0015±0,005моль/л, что совпадает с результатом, полученным методом двойных обратных координат Лайнуивера-Берка. Максимальная скорость реакции определена как 0,0056±0,0003 мкмоль/(мл·мин).

График Иди-Хофсти

Таблица 4

Скорость реакции, мкмоль/(л*мин)	0,5278	0,7895	1,6786	2,8042	3,8048	4,8295	5,0188
Скорость / Концентрация субстрата *10-6,мин-1

График 4

Построенный по экспериментальным данным график был приближен прямой по методу наименьших квадратов. Было получено уравнение прямой в координатах (W, W/[S]), что позволило определить константу Михаэлиса как –tg угла наклона прямой графика с положительным направлением оси абсцисс. Фактически константа Михаэлиса – коэффициент пропорциональности в уравнении прямой. Получено среднее значение 0,030±0,007 моль/л.

.