На практике используют разные способы определения константы Михаэлиса.
Координаты Лайнуивера-Берка. График отображает зависимость от величины и представляет собой прямую. Пересечение графика с осью ординат даёт, а пересечение с осью абсцисс – значение. При малых значениях концентрации субстрата этот способ даёт большую погрешность, поэтому на практике данный метод используют для приблизительных оценок. Уравнение, таким образом, имеет следующий вид:. Метод Иди (Эди) – Хофсти. Проводят построение графика. Метод Эйзеншталя – Корниш – Боудена. Предполагает собой построение графика. Для каждой концентрации субстрата отмечают точки с координатами (-[S], 0) и (0, V0). По этим двум точкам строят графики, которые представляют собой прямые. Точка пересечения графиков для разных концентраций субстрата имеет координаты (КМ,Vmax). Этот способ определения константы Михаэлиса считается наиболее точным. Уравнение может быть записано так:. Общим недостатком данной теории является её ограниченная применимость. Всё вышесказанное справедливо только для начальных скоростей реакций. Кроме того, существуют аллостерические ферменты. Кинетика химических реакций с их участием отличается от кинетики ферментативных реакций Михаэлиса-Ментен. Свойства глюкозы Глюкоза с точки зрения химика представляет соединение, в котором присутствуют свойства альдегида и многоатомного спирта, и относится к классу углеводов. Природным сахаром является D-глюкоза. Её L-аналог получен синтетически. Отличие между ними заключается во вращении плоскости поляризованного света в разные стороны (D – вправо, L - влево). В растворе реализуется сложное равновесие между разными конформациями молекулы. Открытой формы в смеси, как правило, очень немного, значительно преобладают две циклические – α и β. В зависимости от растворителя из раствора кристаллизуется либо α (H2O, CH3OH; угол вращения +112°), либо β (C5H5N, CH3COOH; угол вращения +19°) формы [4].
|