Проведение анализа
1. Готовят пробы соответственно таблице:
2. Для протекания реакции пробирки выдерживают при 37°С в течение 30 минут. 3. После инкубации содержимое каждой пробирки анализируют на присутствие продуктов расщепления полисахарида с помощью реакции Троммера. 4. Для этого в каждую из 8 пробирок добавляют по 15 капель 10% раствора NaOH и по 5 капель 1% раствора CuSO4. Ставят все пробирки в кипящую водяную баню и кипятят в течение 1 минуты. Появление красного осадка оксида меди (I) указывает на положительную реакцию Троммера в присутствии мальтозы. Примечание: возможная окраска пробирок 4 и 8 в розово-фиолетовый цвет обусловлена биуретовой реакцией на белки препарата панкреатина. Желтый цвет в пробе 8 может быть вызван наличием глюкозы в ткани поджелудочной железы, из которой приготовлен панкреатин. Оформление работы Указывают принцип метода и ход работы. Результаты оформляют в виде таблицы. Делают вывод об особенностях переваривания крахмала и целлюлозы в пищеварительном тракте.
Тема 8.2. Актуальность Гликолиз – центральный путь катаболизма глюкозы. В анаэробных условиях гликолиз – единственный процесс в организме, поставляющий энергию. Именно благодаря гликолизу организм может существовать в условиях гипоксии. В эритроцитах анаэробное превращение углеводов является единственным процессом, продуцирующим АТФ и поддерживающим их целостность и функции. В аэробных условиях гликолиз представляет собой начальную стадию расщепления глюкозы, завершающуюся аэробным окислением образовавшихся промежуточных продуктов. Поддержание стабильного уровня глюкозы при физической работе или голодании обеспечивается реакциями глюконеогенеза. Это вносит вклад в снижение ацидоза при данных состояниях и обеспечивает глюкозой нервную ткань и эритроциты. Цель Изучение процессов гликолиза, спиртового брожения, глюконеогенеза, регуляции процессов распада и синтеза глюкозы. Приобретение практических навыков по проведению количественного определения глюкозы в моче и сыворотке крови, молочной кислоты в гомогенате мышечной ткани. Вопросы для самоподготовки 1. Источники и пути превращения глюкозы в клетке. Роль глюкозо-6-фосфата в метаболизме глюкозы. Характеристика процесса гликолиза (молочно-кислое брожение) по плану: локализация и условия протекания процесса, последовательность реакций и ферменты, конечные продукты, участие адениловых нуклеотидов и энергетический эффект, необратимые реакции гликолиза, реакции гликолиза, сопряженные с потреблением АТФ, реакции субстратного фосфорилирования, их сущность и значение, гликолитическая оксидоредукция НАД+ и НАДН, ее сущность и значение. Характеристика процесса глюконеогенеза по плану: локализация и условия протекания реакций, субстраты (молочная кислота, глицерол, аминокислоты). Откуда поступают эти вещества? последовательность реакций и ферменты, реакции глюконеогенеза, сопряженные с потреблением ГТФ и АТФ, необратимые реакции глюконеогенеза, значение при голодании и физической работе, расход энергии для синтеза одной молекулы глюкозы. Роль гликолиза и глюконеогенеза в метаболизме плода и новорожденных. Гормональная регуляция гликолиза и глюконеогенеза. Роль инсулина, адреналина, кортизола, глюкагона. Ферменты, регулируемые этими гормонами. Аллостерическая регуляция гликолиза и глюконеогенеза, роль АТФ, АДФ, АМФ, цитрата, жирных кислот, глюкозо-6-фосфата, фруктозо-6-фосфата, фруктозо-1, 6-дифосфата, ацетил-SКоА. Регулируемые ферменты. Глюкозо-лактатный цикл (цикл Кори), его значение при физической работе. Источники молочной кислоты в организме. Глюкозо-аланиновый цикл, его значение при физической работе и голодании. Энергетический эффект окисления глюкозы в анаэробных условиях. Сравние энергетического эффекта анаэробного окисления глюкозы и распада гликогена до лактата. Спиртовое брожение: локализация процесса, специфические реакции, условия протекания реакций, последовательность реакций, энергетический эффект, конечные продукты. Сходство и отличие спиртового брожения и гликолиза. Метаболизм этилового спирта в печени при участии алкогольдегидрогеназы и ацетальдегиддегидрогеназы, последовательность реакций, конечные продукты. Энергетический эффект окисления одной молекулы этанола. Влияние этилового алкоголя на обмен углеводов в организме человека. Каковы причины гиперлактатемии и гипогликемии при алкогольной интоксикации? Синтез глюкозы из аланина, аспартата и глутамата. При каких условиях и где протекают реакции? В чем их значение? Глюкозооксидазный метод определения содержания глюкозы в сыворотке крови и моче. Принцип метода. Нормальные показатели. Клинико-диагностическое значение. Полуколичественный метод Альтгаузена определения содержания глюкозы в моче. Принцип метода. Нормальные показатели. Клинико-диагностическое значение. Как обнаружить молочную кислоту в мышечной ткани с помощью реакции Уффельмана?
|
