ТЕМЫ ДЛЯ РЕФЕРАТИВНЫХ СООБЩЕНИЙ. 1. Молекулярный механизм развития алкогольной интоксикации

1. Молекулярный механизм развития алкогольной интоксикации. Причины повышенной чувствительности детей к алкоголю. Хронический алкоголизм. Клинико-лабораторная диагностика.

2. Алкогольдегидрогеназа, катализируемые реакции, субстраты. Участие в биохимических и физиологических процессах. Изоферменты.

Глюконеогенез и его значение в метаболизме плода и новорожденного. Гипогликемия новорожденных, критерии, причины возникновения.

Лабораторная работа 1

Глюкозооксидазный метод определения концентрации
глюкозы в сыворотке крови и моче

Принцип

Глюкоза с помощью глюкозооксидазы окисляется до глюконовой кислоты с образованием пероксида водорода. Пероксид водорода в присутствии хлорфенола при участии фермента пероксидазы окисляет краситель 4‑ аминоантипирин, превращая его в хинонимин, окрашенный продукт розово-малинового цвета. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию глюкозы и определяется фотоколориметрически.

Материал исследования

Сыворотка крови. Моча.

Реактивы

1) Рабочий реагент, содержащий фенол, глюкозооксидазу, пероксидазу, 4‑ аминоантипирин в калиево‑ фосфатном буфере.

Стандартный раствор глюкозы, 5, 5 ммоль/л.

Проведение анализа

	Опыт 1, мл	Опыт 2, мл	Стандарт, мл
Сыворотка крови	0, 02	––	––
Моча	––	0, 02	––
Стандартный раствор глюкозы	––	––	0, 02
Рабочий реагент	2, 0	2, 0	2, 0
	Инкубируют в течение 25 минут при 37°С. Измеряют оптическую плотность против воды при длине волны 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрация глюкозы, ммоль/л = , где

Е_оп и Е_ст – оптическая плотность опытных и стандартной проб,
С_ст – концентрация стандартного раствора