Микроскопия.

Микроскопическое строение листа (Рис. 2.1.3).

Цельное сырье. При рассматривании листа с поверхности видны клетки со слабоизвилистыми, слабоволнистыми и извилистыми стенками верхнего эпидермиса (длиной 29-62 мкм, шириной 21-37 мкм) (рис. 2.1.5); клетки со слабоизвилистыми, слабоволнистыми и почти прямыми стенками около железок нижнего эпидермиса (длиной 21-544 мкм, шириной 8-33 мкм) (рис. 2.1.4). Стенки клеток имеют четковидное утолщение. Местами может наблюдаться легкая морщинистость кутикулы (продольно-морщинистая). Морщинистость кутикулы слабо выраженная. Среди клеток эпидермиса встречаются пигментные клетки, заполненные буро-бордовым содержимым. Устьица мелкие (длиной 29-334 мкм, шириной 21-25 мкм), расположены на нижнем эпидермисе и окружены 2 околоустьичными клетками, расположенными параллельно устьичной щели (парацитный тип), с частотой встречаемости 122-331 на 1 мм в квадрате. Около железок устьица отсутствуют. На нижней стороне листа встречаются железки булавовидной формы (рис. 2.1.4) длиной 158-204 мкм, состоящие из многоклеточной ножки, постепенно переходящей в овальную многоклеточную головку (высота головки 104-141 мкм) с коричневым содержимым, с частотой 0-17 на 1 мм в квадрате. По жилкам и на черешке встречаются одноклеточные конусовидные или крючковидные волоски с толстыми стенками и гладкой слабобородавчатой поверхностью длиной до 417 мкм (рис. 2.1.5, 2.1.6). В мезофилле содержатся редкие одиночные призматические кристаллы оксалата кальция размером 2-8 мкм и друзы диаметром 12-25 мкм, более часто они встречаются в черешке и ближе к жилкам. Лист имеет дорсовентральное строение (рис. 2.1.7-2.1.9). Губчатая паренхима с крупными воздухоносными полостями. Клетки ее, кроме субэпидермальных, нелопастные округлой или неправильной формы. По краю листа (в углах поперечных срезов) наблюдается уголковая колленхима. На кончике листа расположена гидатода, клетки эпидермиса которой с более толстыми стенками, водяные устьица на ней круглые, выпуклые, обычно числом около 10.

Клетки эпидермиса черешка вытянуты по его ширине, прямоугольной, веретеновидной, ромбовидной формы и их комбинациями с прямыми четковидно утолщенными стенками.

Измельченное сырье. Проводя анализ, выбирают из аналитической пробы для определения подлинности, измельченности и содержания примесей крупные кусочки листа. Готовят микропрепараты аналогично микропрепаратам из цельного сырья. [19]

При исследовании цельного сырья берут кусочки пластинки листа с краем и жилкой. При исследовании резаного сырья берут по нескольку различных кусочков.

Просветление можно проводить двумя способами.

1. Несколько кусочков сырья помещают в колбу или пробирку, прибавляют 5 % раствор едкого натра, разведенный водой (1:1), и кипятят в течение 1-2 минут. Затем содержимое выливают в чашку Петри (или фарфоровую), жидкость сливают и сырье тщательно промывают водой. Из воды кусочки сырья вынимают скальпелем или лопаточкой и помещают на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата или глицерина.

2. Кусочки кипятят в растворе хлоралгидрата, разведенного водой (1:1), в течение 5-10 минут (до просветления). Просветленный кусочек сырья помещают на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата или глицерина, разделяют скальпелем или препаровальной иглой на две части, одну из них осторожно переворачивают. Объект накрывают покровным стеклом, слегка подогревают до удаления пузырьков воздуха и после охлаждения рассматривают лист с обеих сторон под микроскопом сначала при малом, затем при большом увеличении. При приготовлении микропрепаратов из толстых листьев их предварительно раздавливают скальпелем.

При необходимости приготовления поперечных срезов листьев и стеблей их кипятят в растворе хлоралгидрата в течение 10 минут и делают срезы, зажимая кусочки листа в пробку или сердцевину бузину. Готовые срезы помещают в воду и далее используют для приготовления микропрепаратов, рассматривая их в растворе хлоралгидрата. [6]

Наблюдают анатомо-диагностические признаки, аналогичные признакам цельного сырья.

Из оставшейся части взятой на анализ пробы отсеивают фракцию крупного порошка через сито с отверстиями диаметром 2 мм. Готовят микропрепараты по методике приготовления микропрепаратов порошка. [19]

На предметное стекло наносят 1-2 капли раствора хлоралгидрата и небольшое количество исследуемого порошка. Порошок берут кончиком препаровальной иглы, смоченной хлоралгидратом, тщательно размешивают, закрывают покровным стеклом и нагревают до удаления пузырьков воздуха. Затем стекло слегка придавливают ручкой препаровальной иглы, выступившую по краям жидкость удаляют полоской фильтровальной бумаги. Порошки кожистых листьев просветляют кипячением в 5 % растворе едкого натра. [6]

Наблюдают анатомо-диагностические признаки, характерные для порошка листьев брусники.

Порошок. Микропрепараты порошка (Рис. 2.1.4-2.1.5) под микроскопом представляют собой смесь из различных частиц:

- обрывков эпидермиса с клетками со слабоизвилистыми, слабоволнистами, извилистыми или почти прямыми четковидно утолщенными стенками, иногда с легкой морщинистостью кутикулы, с мелкими парацитными устьицами;

- обрывков эпидермиса с железками булавовидной формы;

- обрывков жилок и черешка с одноклеточными конусовидными или крючковидными волосками с толстыми стенками и гладкой или слабобородавчатой поверхностью;

- обрывков эпидермиса с пигментными клетками, заполненными буро-бордовым содержимым;

- обрывков листа с редкими одиночными призматическими кристаллами и друзами оксалата кальция в мезофилле;

- обрывков листа с губчатой паренхимой с крупными воздухоносными полостями. [20]