Разделение и идентификация органических красителей в их смеси

Как модельные растворы смесей красителей используются 0,05% водные растворы красителей, представленных ниже (кроме бриллиантового зеленого, который готовят на спирте):

феноловый красный – метиловый кристаллический;

бромфеноловый красный – метиловый кристаллический;

активный ярко-голубой – метиловый кристаллический;

метиловый оранжевый – метиловый кристаллический;

феноловый красный – бриллиантовый зеленый;

бромфеноловый красный – бриллиантовый зеленый;

активный ярко-голубой – бриллиантовый зеленый;

метиловый оранжевый – бриллиантовый зеленый;

феноловый красный – активный ярко-голубой – метиловый

кристаллический;

бромфеноловый красный - активный ярко-голубой – метиловый кристаллический;

метиловый оранжевый – активный ярко-голубой – метиловый кристаллический.

 

Выполнение работы

На стартовую линию наносят пробу анализируемой жидкости, и край пластинки погружают в растворитель, который действует как подвижная фаза жидкостной адсорбционной хроматографии. Под действием капиллярных сил растворитель движется вдоль слоя сорбента и с разной скоростью переносит компоненты смеси, что приводит к их пространственному разделению. Разделяемые компоненты на пластинке или на полоске бумаги образуют отдельные зоны (пятна), как это показано на рисунке:

Рис. 1. Схема плоскостной хроматографии:

а) на линию старта нанесены растворы индивидуальных веществ, соответствующих предполагаемым компонентам смеси («свидетели»), а также раствор анализируемой смеси; b) после развития хроматограммы

1 – подвижная фаза; 2 – проведенная карандашом линия старта; 3 – анализируемый раствор и растворы «свидетелей», которые капают на линию старта; 4 – фронт растворителя.

Положение зон (пятен) на пластинке или полоске бумаги характеризует индекс R_f, называемый коэффициентом подвижности.

,

где l – смещение зоны вещества относительно линии старта, L – смещение фронта растворителя.

Величина R_f зависит от природы носителя (бумага, активность и природа сорбента), качества и природы растворителя, способа нанесения пробы, детектирования и не зависит от концентрации вещества, наличия в растворе других веществ, продолжительности хроматографирования. Чем больше различие в величинах R_f разделяемых веществ, тем лучше их разделение. Величина R_f изменяется от нуля до единицы. Полное разделение двух веществ методом плоскостной хроматографии происходит, если ≥ 0,05 для бумажной и ≥ 0,1 для тонкослойной хроматографии.

По технике выполнения выделяют восходящую, нисходящую и горизонтальную тонкослойную хроматографию. Наиболее распространена восходящая тонкослойная хроматография. Перед бумажной тонкослойная хроматография имеет преимущество в скорости выполнения анализа.

 

Запись в лабораторном журнале:

Анализируемое вещество	Rf
метиловый оранжевый
….
Смесь 1	вещество 1
вещество 2
вещество 3

 

Тонкослойная хроматография находит широкое применение в анализе объектов окружающей среды воздуха, почвы, воды и др. с целью предупреждения загрязнения, а также при анализе органических соединений, в фармакологии, клинической диагностике и др. ТСХ используют также для обнаружения и полуколичественного определения следовых количеств синтетических пестицидов. Пятна пестицидов обнаруживают опрыскиванием пластинки специальными реактивами. Методом ТСХ были исследованы магнитные фракции космической пыли.

ЛИТЕРАТУРА

1. Алемасова А.С., Єнальєва Л.Я., Щепіна Н.Д. Лекції з аналітичної хімії. – Донецьк: Вебер, 2009. – 329 с.

2. Пилипенко А.Т., Пятницкий И.В. Аналитическая химия: В 2-х книгах: - М.:Химия, 1990. - 846 с.

3. Набиванец Б.И., Мазуренко Е.А. Хроматографический анализ. - Киев: Вища школа, 1979.- 264 с.