Лабораторная работа 3. Проведение проб на коллоидоустойчивость белков сыворотки кровиПроведение проб на коллоидоустойчивость Устойчивость белков сыворотки крови зависит от их заряда и наличия гидратной оболочки. Нарушение коллоидной устойчивости белков под влиянием различных агентов проявляется сначала склеиванием (коагуляцией) белковых молекул, а затем выпадением их в осадок. При этом в первую очередь осаждаются более крупные и менее заряженные белки – глобулины. Осадочная проба Вельтмана в модификации Тайфля Принцип При добавлении к сыворотке крови раствора СаСl2 снижается коллоидная устойчивость белков вследствие уменьшения электрического заряда частиц при действии электролита. Вследствие этого при нагревании первыми выпадают в осадок g-глобулины (иммуноглобулины). Реактивы 0, 5% р-р CaCl2. Материал исследования Сыворотка крови. Проведение анализа В химическую пробирку добавляют 0, 1 мл сыворотки, 4, 9 мл дистиллированной воды и 0, 1 мл 0, 5% раствора CaCl2. Встряхивают, нагревают в кипящей водяной бане или на спиртовке до однократного закипания и охлаждают. Если хлопья в пробирке не обнаруживаются, то в нее добавляют еще 0, 1 мл 0, 5% раствора CaCl2 и раствор вновь нагревают до кипения. Процедуру повторяют до выпадения хлопьевидного осадка. Учитывают объем СaCl2, пошедший на образование хлопьевидного осадка сывороточных белков, и определяют состояние по коагуляционной ленте Вельтмана по схеме:
Нормальные величины
Тимоловая проба Принцип Сывороточные b‑, g‑ глобулины и липопротеины осаждаются при рН 7, 55 тимоловым реактивом вследствие образования глобулин-тимол-липидного комплекса. Реактивы Тимоловый буфер, рН 7, 55‑ 7, 60. Материал исследования Сыворотка крови. Проведение анализа
|
