Метод серийных разведений

Данным методом определяют минимальную ингибирующую рост исследуемой культуры бактерий концентрацию антибиотика (МИК). Вначале готовят основной раствор, содержащий определенную концентрацию антибиотика (мкг/мл или ЕД/мл) в специальном растворителе или буферном растворе. Из него готовят все последующие разведения в бульоне (в объеме 1 мл), после чего к каждому разведению добавляют 0,1 мл исследуемой бактериальной суспензии, содержащей 10⁶-10⁷ бактериальных клеток в 1 мл. В последнюю пробирку вносят 1 мл бульона и 0,1 мл суспензии бактерий (контроль культуры). Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня, после чего отмечают результаты опыта по помутнению питательной среды, сравнивая с контролем культуры. Последняя пробирка с прозрачной питательной средой указывает на задержку роста исследуемой культуры бактерий под влиянием содержащейся в ней минимальной ингибирующей концентрации а/б.

 

Номер пробирки	Разведение антибиотика	Концентрация антибиотика, мкг/мл	Исследуемая культура, мл	Рост бактерий (помутнение среды)
	1:100		0,1	-
	1:200		0,1	-
	1:400		0,1	-
	1:800	12,5	0,1	-
	1:1600	6,25	0,1	+
	1:3200	3,12	0,1	+
	1 мл бульона без антибиотика	0,1	+ (контроль)

Оценку результатов определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам проводят по таблице, которая содержит пограничные значения диаметров зон задержки роста для устойчивых, умеренно устойчивых и чувствительных штаммов, а также значения МИК антибиотиков для устойчивых и чувствительных штаммов.

К чувствительным относятся штаммы микроорганизмов, рост которых подавляется при концентрациях препарата, обнаруживаемых в сыворотке крови больного при использовании обычных доз антибиотиков. К умеренно устойчивым относятся штаммы, для подавления роста которых требуются концентрации, создающиеся в сыворотке крови при введении максимальных доз препарата. Устойчивыми являются микроорганизмы, рост которых не подавляется препаратом в концентрациях, создаваемых в организме при использовании максимально допустимых доз.

 

Схема описания антибиотиков

Название препарата ………………….

Классификационное положение:антибиотик (класс препарата)

Действующее начало: антибиотик (механизм действия на микробную клетку)

Получение: путем биосинтеза

полусинтетические

путем химического синтеза

Применение: 1) лечение инфекций;

2) определение чувствительности бактерий к антибиотику

Способ применения: 1) перорально, парентерально, местно;

2) in vitro, метод «бумажных дисков»

К работе № 3