Студопедия Главная Случайная страница Обратная связь

Разделы: Автомобили Астрономия Биология География Дом и сад Другие языки Другое Информатика История Культура Литература Логика Математика Медицина Металлургия Механика Образование Охрана труда Педагогика Политика Право Психология Религия Риторика Социология Спорт Строительство Технология Туризм Физика Философия Финансы Химия Черчение Экология Экономика Электроника

Методы определения активности ферментов





Методы определения активности ферментов могут быть под­разделены на 2 основные группы:

а) колориметрические методы, основанные на инкубации сы­воротки с субстратом в соответствующем буфере в течение опре­деленного времени, по истечении которого ферментативную ре­акцию останавливают и образующиеся продукты определяют при помощи подходящей химической реакции либо замеряют коли­чество оставшегося субстрата;

б) спектрофотометрические методы, с помощью которых не­прерывно или периодически в ходе ферментативной реакции определяют потребление субстрата или кофермента либо образо­вание продукта. Эти методы часто называются кинетическими методами, поскольку измерения каталитической активности за­висят от кинетики непрерывной регистрации реакции. Боль­шинство кинетических методов основаны на оптическом тесте Варбурга с применением пиридинкоферментов (НАД, НАДН2)'

Ферменты преим-но локализуются внутри клеток, где и проявляется их действие. Поэтому ↑ акт-сти ферментов в плазме (сыв-ке) крови при целом ряде заб-ний связано прежде всего с ↑ проницаемости плазма­т. мембраны, мембран лизосом, некрозом клеток и вы­ходом энзимов из поврежден. органов и тканей в кровь. При этом содерж-е и акт-сть фермента в повреж­ден. органе ↓, а в сыворотке (плазме) крови - ↑. Полагают, что в рез-те общей реакции орг-ма ферменты переходят в плазму не только из поврежд. ор­гана, но также из клеток других органов и тканей, не затронутых патологическим процессом.

Для исследования акт-сти ферментов чаще всего используется плазма или сыворотка крови. В процессе свертыва­ния крови и последующей ретракции сгустка высвобождаются содержащиеся в тромбоцитах БАВ, под влиянием которых возрастает акт-сть многих энзимов. Наб­людаемое в процессе свертывания разрушение форменных эле­ментов (эритроцитов и др.) крови обусловливает дальнейшее увели­чение ферментативной активности, оказывающейся, как правило, в сыворотке более высокой, чем в плазме. Этим, в частности, объясняется и известное предостережение избегать гемолиза крови.

Хранение сыв-ки сопровождается ↓ активности ферментов. Для бол-ва из них активность не изменяется при комнатной температуре в течение ~-8 ч, при 4 оС _ около недели, а в заморож. состоянии - на про­тяжении месяца. При опред. акт-сти фермен­тов в плазме; следует учитывать, что многие антикоа­гулянты способны и'нгибировать энзиматическую деятельность. Известно, что оксалаты подавляют активность ЛДГ, ЭДТА инги­бирует активность кислой и щелочной фосфатаз.







Дата добавления: 2015-04-19; просмотров: 2935. Нарушение авторских прав; Мы поможем в написании вашей работы!




Вычисление основной дактилоскопической формулы Вычислением основной дактоформулы обычно занимается следователь. Для этого все десять пальцев разбиваются на пять пар...


Расчетные и графические задания Равновесный объем - это объем, определяемый равенством спроса и предложения...


Кардиналистский и ординалистский подходы Кардиналистский (количественный подход) к анализу полезности основан на представлении о возможности измерения различных благ в условных единицах полезности...


Обзор компонентов Multisim Компоненты – это основа любой схемы, это все элементы, из которых она состоит. Multisim оперирует с двумя категориями...

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЦЕНТРА ТЯЖЕСТИ ПЛОСКОЙ ФИГУРЫ Сила, с которой тело притягивается к Земле, называется силой тяжести...

СПИД: морально-этические проблемы Среди тысяч заболеваний совершенно особое, даже исключительное, место занимает ВИЧ-инфекция...

Понятие массовых мероприятий, их виды Под массовыми мероприятиями следует понимать совокупность действий или явлений социальной жизни с участием большого количества граждан...

Ганглиоблокаторы. Классификация. Механизм действия. Фармакодинамика. Применение.Побочные эфффекты Никотинчувствительные холинорецепторы (н-холинорецепторы) в основном локализованы на постсинаптических мембранах в синапсах скелетной мускулатуры...

Шов первичный, первично отсроченный, вторичный (показания) В зависимости от времени и условий наложения выделяют швы: 1) первичные...

Предпосылки, условия и движущие силы психического развития Предпосылки –это факторы. Факторы психического развития –это ведущие детерминанты развития чел. К ним относят: среду...

Studopedia.info - Студопедия - 2014-2025 год . (0.013 сек.) русская версия | украинская версия