Работа 1. Определение групп крови системы АВ0.

Группы крови определяют по свойствам эритроцитов. Для определения групп крови можно использовать стандартные изогемагглютинирующие сыворотки четырёх групп или синтетические цоликлоны. Цоликлоны – это растворы, содержащие аналоги агглютининов α и β. Метод синтетических цоликлонов более простой и надежный. Он позволяет с помощью двух эритротестов анти-А и анти-В провести реакции агглютинации между агглютиногенами А и В эритроцитов и одноименными агглютининами цоликлонов и определить группы крови.

Стандартные сыворотки содержат известные агглютинины. Для определения групповой принадлежности крови по системе АВ0 пользуются стандартными сыворотками 4-х групп 2-х серий. Группы крови необходимо определять в хорошо освещенном помещении при температуре от +15 до +25. Кровь для исследования берут, как правило, из пальца (допускается из мочки уха или же с помощью шприца из вены). Объем исследуемой крови (эритроцитов) должен быть приблизительно в 10 раз меньше объема сыворотки, с которым ее смешивают.

Для работы необходимы: стандартные сыворотки 4-х групп крови 2-х серий, маркированные тарелки, предметные стекла, спирт, вата, скарификаторы.

Методика выполнения работы: На маркированную тарелку наносят в соответствующие сектора по 1-2 капли стандартной гемагглютинирующей сыворотки I, II, III, IY групп. Сыворотки из каждого флакона следуют брать отдельной пипеткой.

Обрабатывают палец спиртом, прокалывают скарификатором. Первую каплю снимают ватным тампоном, а затем уголком предметного стекла берут немного крови и вносят её в каплю сыворотки I группы и хорошо перемешивают. Другим уголком стекла вносят кровь в каплю сыворотки II группы и т.д.

Слегка покачивая тарелку, следят за агглютинацией эритроцитов. Через 3 минуты после появления агглютинации в каждую сыворотку добавляют по одной капле 0,9 % раствора хлорида натрия для исключения неспецифической агглютинации. Окончательный результат читают через 5 минут.

Рекомендации к оформлению протокола: В тетради для протоколов нарисуйте капли сывороток и содержащиеся в них агглютинины. Укажите наличие или отсутствие агглютинации в каплях. Проведите анализ реакций в каждой сыворотке (обсудите причины наличия агглютинации или её отсутствия). На основе анализа сделайте вывод: имеются ли в исследуемой крови агглютиногены А и В. Изобразив исследуемые эритроциты в каждой сыворотке, покажите схематично, с какими агглютининами сывороток связались агглютиногены эритроцитов. Сделайте вывод о группе крови. Сформулируйте основной принцип определения групп крови.