Занятие № 23

 

ТЕМА. ПЕРЕВАРИВАНИЕ И ВСАСЫВАНИЕ ЛИПИДОВ. УЧАСТИЕ ЖЕЛЧНЫХ КИСЛОТ В ПРОЦЕССЕ УСВОЕНИЯ ЛИПИДОВ.

 

Цель занятия: 1.Повторить физико-химические свойства и био-логическую роль липидов.

2.Знать процессы переваривания и всасывания липидов, роль желчных кислот.

3.Ознакомиться с методами качественного определения желчных кислот и активности липаз.

Исходный уровень знаний:

- строение и свойства высших жирных кислот;

- строение и свойства нейтральных жиров;

- строение и свойства сложных липидов;

- биологическая роль липидов;

- классификация и номенклатура ферментов.

Содержание занятия.

I.2.Строение и свойства природных высших жирных кислот на примере пальмитиновой, олеиновой, линолевой и других кислот.

Классификация липидов.

Физико-химические свойства и биологическое значение триацилглицеринов.

Особенности строения и биологическая роль фосфолипидов.

Особенности строения и биологическая роль сфинголипидов.

Особенности строения и биологическая роль стероидов.

Переваривание и всасывание липидов.

Физиологическое значение желчных кислот.

 

II.1. Работа № 1. ВЛИЯНИЕ ЖЕЛЧИ НА АКТИВНОСТЬ

ЛИПАЗЫ.

Липаза - малоспецифичный фермент, действующий на многие жиры при рН=9,0, гидролитически расщепляющий эфирную связь в a-положении (т.е. в крайнем положении).

 

Принцип метода.

Скорость действия липазы в отдельных порциях молока можно узнать по количеству жирных кислот, образующихся при гидролизе жира за определенный промежуток времени. Количество жирных кислот (ЖК) определяют титрованием щелочью в присутствии фенолфталеина. В случае добавления в пробу желчи липаза активируется и гидролиз жиров молока протекает с большей скоростью. Результаты определения выражают в миллилитрах титрованного раствора щелочи. Строят графики, где по оси ординат откладывают количество 0,05 N раствора щелочи в миллилитрах, пошедшей на нейтрализацию жирных кислот, а на оси абсцисс - время в минутах.

 

Порядок выполнения работы.

Реактивы (мл)	Колба № 1	Колба № 2
Молоко	10,0	10,0
5% р-р панкреатина	1,0	1,0
Дистиллированная вода	1,0	-
Желчь	-	1,0
Быстро перемешать и поместить в термостат при t=380С

 

Каждые 15 мин из обеих колб переносить в стаканчики по 1,0 мл смеси и сразу титровать 0,05 N раствором NaОН до слаборозового окрашивания, не исчезающего в течение 30 сек. Всего провести 4 определения. По полученным данным построить 2 графика в одной системе координат.

 

РЕЗУЛЬТАТЫ:

 

мл

0,05 N р-р NaOH

 

0 15 30 45 время в мин

ВЫВОД:

 

Работа № 2. ДЕЙСТВИЕ ФОСФОЛИПАЗ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ

ЖЕЛЕЗЫ.

В поджелудочной железе и ее соке содержится несколько фосфолипаз - ферментов, ускоряющих гидролиз фосфолипидов, в частности, лецитина. Лецитин под действием фосфолипаз А₁, А₂, С и D расщепляется на глицерин, жирные кислоты, фосфорную кислоту и холин. Точки приложения действия фосфолипаз на лецитин (фосфатидилхолин):

фосфолипаза А₁

 

фосфолипаза А₂ СH₂-O-CO-R

|

R-CO-О-CH

|

CH₂-O-PO-O-CH₂-СH₂-N(CH₃)₃

|

OH

 

фосфолипаза С фосфолипаза Д

 

Принцип метода.

Об активности фосфолипаз поджелудочной железы судят по появлению свободной фосфорной кислоты, способной образовывать желтый осадок при нагревании с молибдатом аммония.

Порядок выполнения работы.

В две пробирки налить по 5 кап. суспензии яичного желтка. В первую пробирку добавить 2 кап. панкреатина, а во вторую (контроль) - 2 кап. воды. Обе пробирки поместить в термостат при t=38⁰ C на 30 мин. После инкубации в обе пробирки налить по 5 кап. молибденового реактива, нагреть их на пламени горелки и охладить водой под краном.

РЕЗУЛЬТАТЫ:

 

 

ВЫВОД:

 

 

Работа № 3. КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА ЖЕЛЧНЫЕ

КИСЛОТЫ.

Переваривание и всасывание липидов и жирорастворимых витаминов нарушается при воспалении печени, желчного пузыря и при желчнокаменной болезни.

 

Принцип метода.

Желчные кислоты можно открыть реакцией Петтенкофера. При взаимодействии желчной кислоты с оксиметилфурфуролом, образующимся из тростникового сахара под действием концентрированной серной кислоты, появляется красно-фиолетовое окрашивание.

Порядок выполнения работы.

На сухую чашку Петри, под которую подложен лист белой бумаги для лучшей визуализации результатов, нанести 2 кап желчи, 2 кап 20% раствора сахарозы и тщательно перемешать стеклянной палочкой, затем прилить 7 кап концентрированной H₂SO₄ и вновь перемешать. Через 2-3 мин отметить появление окраски.

РЕЗУЛЬТАТ:

 

III.2. Контрольные вопросы.

Какие условия нужны для переваривания липидов?

В каком отделе желудочно-кишечного тракта и под действием каких ферментов происходит основной распад липидов и почему?

Какие Вы знаете промежуточные и конечные продукты переваривания триглицеридов, фосфолипидов?

Как и в каком отделе желудочно-кишечного тракта происходит всасывание продуктов переваривания липидов?

Какие фосфолипиды Вы знаете?

Что такое лизофосфатидилхолины?

Что такое парные желчные кислоты?

 

Материал для самоподготовки.а)1. с.363-370; II, III