А. Получение спиртового раствора (вытяжки) пигментов зеленого листа

Из листьев растений (не затрагивая крупных жилок) пробочным сверлом вырезают диски. Из них составляют навеску в 1,0-1,5 г. Для расчета поверхности листьев взятой пробы необходимо сосчитать количество дисков и измерить их диаметр.

Навеску листьев переносят в фарфоровую ступку и растирают с небольшим количеством этилового спирта, прибавив предварительно на кончике ножа СаСОз (для нейтрализации кислот клеточного сока) и чистого кварцевого песка (для лучшего растирания). Носик ступки с наружной стороны смазывают вазелином. После небольшого отстаивания зеленый раствор осторожно (чтобы не потерять ни капли раствора) по палочке сливают в воронку с пористым стеклянным фильтром. С помощью масляного или водоструйного насоса фильтруют вытяжку в колбу Бунзена. Оставшуюся в ступке густую массу снова растирают со спиртом. После отстаивания жид­кость переносят на фильтр.

Эту операцию повторяют несколько раз, пока раствор, стекаю­щий из воронки, не будет бесцветен. Переносят спиртовую вытяжку из колбы Бунзена в мерную колбу на 25-50 мл, спиртом доливают до метки и перемешивают. Полученный зеленый раствор содержит следующие пигменты.

1. Зеленые:

хлорофилл «a» C₃₂H₃₀ON₄Mg (COOCH3) (СООС₂₀Н₃₉);

хлорофилл «б» C₃₂H₂₈O₂N₄Mg (СООСНз) (СООС_2оН₃₉).

2. Желтые:

каротин С_4оН_5б; ксантофилл С_4оН_5бО₂.

С полученной вытяжкой производят ряд исследований и определяют количество хлорофилла в ней.