А. Получение спиртового раствора (вытяжки) пигментов зеленого листа
Из листьев растений (не затрагивая крупных жилок) пробочным сверлом вырезают диски. Из них составляют навеску в 1,0-1,5 г. Для расчета поверхности листьев взятой пробы необходимо сосчитать количество дисков и измерить их диаметр. Навеску листьев переносят в фарфоровую ступку и растирают с небольшим количеством этилового спирта, прибавив предварительно на кончике ножа СаСОз (для нейтрализации кислот клеточного сока) и чистого кварцевого песка (для лучшего растирания). Носик ступки с наружной стороны смазывают вазелином. После небольшого отстаивания зеленый раствор осторожно (чтобы не потерять ни капли раствора) по палочке сливают в воронку с пористым стеклянным фильтром. С помощью масляного или водоструйного насоса фильтруют вытяжку в колбу Бунзена. Оставшуюся в ступке густую массу снова растирают со спиртом. После отстаивания жидкость переносят на фильтр. Эту операцию повторяют несколько раз, пока раствор, стекающий из воронки, не будет бесцветен. Переносят спиртовую вытяжку из колбы Бунзена в мерную колбу на 25-50 мл, спиртом доливают до метки и перемешивают. Полученный зеленый раствор содержит следующие пигменты. 1. Зеленые: хлорофилл «a» C32H30ON4Mg (COOCH3) (СООС20Н39); хлорофилл «б» C32H28O2N4Mg (СООСНз) (СООС2оН39). 2. Желтые: каротин С4оН5б; ксантофилл С4оН5бО2. С полученной вытяжкой производят ряд исследований и определяют количество хлорофилла в ней.
|
