DES PROTEINES. Les protéines sous l'effet de divers facteurs (l`action des réactifs chimiques, la chauffe etc.) se soumettent facilement à la

Les protéines sous l'effet de divers facteurs (l`action des réactifs chimiques, la chauffe etc.) se soumettent facilement à la dénaturation – elles perdent certains propriétés natives (naturelles), par exemple, la dissolubilité, l'activité biologique. C'est pourquoi pour l`élimination des albumines on a élaboré des méthodes spéciales «ménageantes».

On commence le processus par l'homogénéisation du matériel biologique – le concassage jusqu`à la désagrégation des structures cellulaires. On utilise pour cela les homogénisateurs pistillaires ou de couteau, les broyeurs à boulets, l'ultrason, la méthode de la congélation et la décongélation alternative du tissu, la méthode de «la bombe azotique».

Puis on fait l'extraction des albumines par les mélanges de tampon avec les significations définies de рН, les dissolvants organiques. La plupart des albumines est bien dissoluble à la solution 8-10 % des sels.

Pour le fractionnement et l`épuration (le nettoyage) des albumines on utilise les méthodes suivantes.

Le relargage (la salaison) – la précipitation des albumines de la solution à l`addition des solutions des sels des métaux alcalins et alcalino-terreux. Cette méthode est utilisée dans la pratique clinique à l'analyse des albumines du sérum du sang, par exemple, pour la division des globulines (précipitent à la saturation de 50 % de la solution du sulfate de l'ammonium) et des albumines (à la saturation de 100 %).

L'électrophorèse est fondée à la différence de la vitesse du mouvement des albumines au champ électrique, qui est définie par la valeur de la charge de l'albumine aux significations définies de рН et la force ionique de la solution. Elle est appliquée à la médecine clinique pour l'analyse des mélanges albuminés et peptidiques, le sérum du sang.

L'ultracentrifugation - la méthode de la division des milieux liquides dispersifs en composants sous l'effet de la force centrifuge.

La chromatographie (du grec. chroma – la couleur) - la méthode physico-chimique de la division et de l'analyse des mélanges des substances, basée à la distribution de leurs composants entre deux phases qui ne se mélangent pas – immobile (le sorbant) et mobile (l`éluant).

On distingue les variétés suivantes de la chromatographie:

- La chromatographie d'adsorption - la division des composants du mélange est basée sur leur sorptivité différente à l'adsorbant dur;

- La chromatographie distributive - la phase solide tient la phase stationnaire liquide. La variété est la chromatographie sur le papier;

- La chromatographie d`échange d`ions – on utilise la résine d'échange ionique convenante, avec les groupes fonctionnels de laquelle la partie des albumines s`échange et se fixe sur la colonne, pendant que d'autres albumines s`éluent sans difficultés de la colonne;

- Le gel-chromatographie, ou la méthode des tamis moléculaire,est fondée à la capacité des petites molécules à pénétrer dans les pores du gel, tandis que les grandes molécules restent en dehors, en s`avançant avec la phase mobile en bas le long de la colonne. Il permet de diviser les albumines avec une différente masse moléculaire.

Les types perspectifs de la chromatographie sont la chromatographie liquide de grande efficacité; (CHLGE) et la chromatographie des gaz. La chromatographie est une des méthodes principales des études biochimiques. Dans les laboratoires cliniques on l`applique pour la division et l'analyse des aminoacides, des albumines, des hydrates de carbone, des phospholipides, des stéroïdes dans le plasma du sang, les extraits de tissu, l'urine.