Диагностическое значение: позволяет обнаружить витамины в биологических жидкостях, пищевых продуктах определить подлинность лекарственного препарата.
Витамин
| Принцип метода
| Порядок выполнения работы
| Качественная реакция
|
В1
| В щелочной среде тиамин окисляется в тиохром, который флуоресцирует в УФ
| 2 капли 5% раствора тиамина
2-4 капли 10% раствора NaOH
2-3 капли 5% р-ра K3[Fe(CN)6] (окислитель)
10 минут выдержки после перемешивания
| УФ, синяя флуоресценция
|
В2
| Рибофлавин и флавиновые ферменты флуоресцируют в УФ. Восстановленные формы не флуорисцируют в УФ.
| 10 капель 0,025% р-ра рибофлавина
10 капель 0,025% р-ра рибофлавина, 2 капли 0,5% р-ра тиосульфата натрия (восстановитель). Перемешивают.
| УФ, желто-зеленая
УФ, отсутствие флуоресценции
|
Фолиевая к-та
| В щелочной среде флуоресцирует
| 10 капель 0,001% р-ра фолиевой к-ты
1 мл 0,1Н р-ра NaOH. Перемешивают
| УФ, голубая флуоресценция
|
В6
| Качественная реакция связана с присутствием в молекуле вит. В6 фенольного гидроксила.
| 5 капель 1% р-ра вит. В6.
5 капель 1% р-ра FeCl3. Перемешивают
| Красное окрашивание
|
РР
| Качественная реакция связана с кислотными свойствами никотиновой кислоты.
| 20 капель 3% р-ра вит. РР взбалтывают и нагревают до кипения
Добавляют 20 капель ацетата меди. Нагревают до кипения.
Охлаждают под струей воды.
| Синий осадок медной соли никотиновой кислоты
|
Работа № 1. Качественные реакции на витамины А, Е, Д.
Диагностическое значение: позволяет обнаружить витамины в биологических жидкостях, пищевых продуктах определить подлинность лекарственного препарата.
Витамин
| Принцип метода
| Порядок выполнения работы
| Качественная реакция
|
А
| Дегидратация в кислой среде приводит к образованию окрашенного соединения
| 3 капли масляного раствора витамина А в хлороформе
1 капля конц. Н2SO4. Перемешивают
| Красно-фиолетовая окраска переходит в красно-бурую
|
Д
| Продукт взаимодействия витамина Д с бромом – окрашенное соединение
| 2-4 капли масляного раствора витамина Д.
2-4 капли раствора брома в хлороформе (1:60). Перемешивают.
| Зеленовато-голубое окрашивание
|
Е
| Α-токоферол окисляется в хинон, который окрашивает раствор
| 4-5 капель 0,1% спиртового раствора витамина Е.
0,5 мл 1% раствора FeCl3. Перемешивают
| Красное окрашивание
|