Принцип метода блоттинга по Саузерну. Применение в биологии и медицине.
Принцип Метод Саузерн блоттинга заключается в переносе электрофоретически разделённых фрагментов ДНК с геля на мембрану и гибридизации нуклеотидов искомой ДНК с ДНК-зондом. Метод позволяет выявить различия молекулярной массы между фрагментами ДНК.
Альтернативный сплайсинг. Приведите примеры. Альтернативный сплайсинг — процесс, позволяющий одному гену производить несколько мРНК и, соответственно, белков. В процессе созревания про мРНК (описан в предыдущем вопросе), после удаления интронов, экзоны могут быть сшиты в любой последовательности, что позволяет в дальнейшем увеличить разнообразие белковых продуктов. В процессе развития организма на определенном этапе осуществляется один вариант альтернативного сплайсинга, а на другом этапе – другой вариант. Пример: ген кальцитонина может кодировать гормон кальцитонин и относящийся к кальцитониновому гену пептид альфа. В С-клетках щитовидной железы в результате сплайсинга объединяться экзоны 1-4, которые кодируют кальцитонин. В чувствительных же нейронах процессируется мРНК, где экзон 4 отсутствует, но добавятся 5 и 6 экзоны. В результате клетки будут синтезировать уже не кальцитонин, а относящийся к кальцитониновому гену пептид альфа.
|
