Колонки представляют собой прямые трубки из нержавеющей стали, с внутренним диаметром 2 – 6 мм и длиной 100 – 250 мм. На верхнем и нижнем концах колонки расположены фильтры, представляющие собой диски из пористой нержавеющей стали. Назначение фильтров – удерживание сорбента в колонке и задержка механических примесей, которые могут находиться в подвижной фазе. Колонки заполнены сорбентом с размером частиц 5 – 10 мкм. Стандартные колонки имеют длину 250 мм и диаметр 4.6 мм и обеспечивают эффективность разделения до 50000 теоретических тарелок на 1 метр колонки. Для сокращения расхода высокочистых и дорогих растворителей часто используют микроколонки, с внутренним диаметром до 1 мм и длиной до 100 мм. В таких колонках используют сорбенты с размером частиц 3 мкм, что позволяет повысить эффективность до 100000 теоретических тарелок на метр колонки. Наиболее часто применяемые в ВЭЖХ колонки и их характеристики приведены в таблице 1.
| Таблица 1
| Сравнительная характеристика некоторых колонок для ВЭЖХ
|
| Размер колонки, мм
| Мертвый объем колонки, мл
| Объем пика, мкл
| Потребление элюента, мл
| Сэкономленный элюент, %
|
| 4.6×250
| 2.5
|
| 18.9
|
|
| 4.6×150
| 1.5
|
| 11.4
|
|
| 3.0×250
| 1.06
|
| 8.0
|
|
| 3.0×150
| 0.64
|
| 4.8
|
|
| 2.1×150
| 0.3
|
| 2.4
|
|
| | | | | | |
Между инжектором и разделяющей колонкой может располагаться предколонка, представляющая собой небольшую колонку длиной 30 – 100 мм, заполненную, как правило, тем же сорбентом, что и разделяющая. Предколонка выполняет несколько функций. Во-первых, она задерживает мелкие частицы, которые могут попасть из насоса или компонентов пробы в разделяющую колонку и испортить ее, снизив эффективность и селективность. Во-вторых, на предколонке задерживаются сильно сорбируемые компоненты пробы, которые в случае их сорбции на разделяющей колонке было бы трудно элюировать. Таким образом, предколонка продлевает срок службы разделяющей колонки.
