БИЛЕТ 31

 

Инсулин -гормон поджел железы, который вырабатывается В-клетками островков Лангерганса. Хим прир его - белок. Первые кристаллы инсулина получили при новейших методах очистки гормонов - ВЭЖХ и электрофорез. В наст время инсулин получают из поджел железы крупного рогатого скота и свиней. НД-промышленный регламент.

Инсулин применяют при гипергликемическом диабете – диабет 1 типа.

Стадия получения инсулина:

1) Подготовка сырья

2) Измельчение замороженных желез и экстракция кислыми спиртовыми растворами;

3) Осаждение балластных белков (рН > 7) и освобождение от липидов;

4) Изоэлектрическое осаждение фракции инсулина (рН= 5,5) и осаждение спиртом 85%- 1 мацерация, 57% этанолом подкис. Ортофосфорной к-той до рН 2,8-3,0 -2 мацерация = бисмацерация;

5) Очистка инсулина: осаждение солями, фракционирование методами хроматографии;

6) Концентрация экстракта (выпаривание до этанола 10-25% при темп. Не выше 30С)

7) Очистка (отстаивание на холоду – балластные в-ва и липиды), фильтрование

8) Высаливание (25% р-р натрия хлорида)

9) Фасовка, упаковка

10) Стандартизация

Заморож инсулин измельчают на мясорубке, экстр способом бисмацерации этанолом подкисленным ортофосфорной кислотой, благодаря чему инактив фермент трипсин. Получ вытяжки объединяют, отстаивают на холоду от освобождения белков не желаемых, которые выпадают в осадок, осадок отделяют центрифуг-ием, затем для выделения и очистки инсулина применяют ионообменную хроматог. Далее проводят сорбцию, десорбцию, в итоге балластные вещества выпадают в осадок их удаляют. Инсулин осаждают раствором CH3COOZn(рН =6,0) - получают цинк-инсулин, который очищают кристаллизацией.

“Инсулин для инъекции” - получают путем растворения кристаллов инсулина в воде, подкисленнойHCL. К раствору добавляют глицерин, консервант - фенол. “Суспензия цинк - инсулина кристаллического для инъекции “ - стерильная суспензия инсулина с ZnCl₂ в буферном растворе. Это пролонгированный препарат. Сахароснижа эффект через 6-8 ч. Продолжит - 36 часов. В последнее время разработаны новые, очищенные от проинсулина и высокомолекулярных белов препараты инсулина. Они лучше не вызывают аллергию.

Биотехнология. Ученые поставили перед собой цель - наладить биохимическое производство человеческого инсулина. Они работали сразу с несколькими генами: ген, отвечающий за синтез инсулина, ген обеспечивающий образования интерферона, ген контролирующий синтез гормона роста. Был получен ген, обеспечивающий синтез инсулина. С помощью методов генной инженерии этот ген был введен в бактериальную клетку, которая в результате приобрела способность синтезировать гормон человека.